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細胞内酸性小胞からの毒素タンパク質の細胞内遊離機構の解析

細胞内酸性小胞からの毒素タンパク質の細胞内遊離機構の解析
胞内酸性囊泡毒素蛋白胞内释放机制分析
批准号：
05259224
负责人：
目加田 英輔
金额：
$0.96万
依托单位：
Kurume University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1993
资助国家：
日本
项目状态：
已结题
起止时间：
1993 至 --
来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-05259224/
关键词：
ジフテリア毒素V-ATPase膜通過theta毒素エンドサイトーシス

项目摘要

项目成果

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本研究は、ジフテリア毒素を材料に、プロトンATPaseによるエンドソームの酸性化機構と酸性化を引金とするタンパク質の膜通過機構の解明を目指すものである。今年度は、cell-permealizationによる実験系の構築を行い、ジフテリア毒素のエンドソーム膜通過機構の解析を行った。Clostridium perfringensのtheta毒素は、細胞膜のコレステロールに結合子、細胞膜にタンパク質が通過できるような穴を開ける。そこで、ジフテリア毒素を取り込んだ細胞に、theta毒素を作用させて細胞膜に選択的に穴を開け(cell permealization)、細胞質に遊離したジフテリア毒素フラグメントA分子を回収する実験系を開発した。得られた系を用いて、種々の条件下での毒素の通過の効率を測定し、1)リセプターに結合しているジフテリア毒素は約20分で細胞質に到達する、2)この過程でジフテリア毒素のAフラグメントとBフラグメントの間に蛋白分解酵素(おそらくfurin)によるニッキングが起こる、3)V-ATPaseの阻害剤であるbafilomycin A1は毒素分子のエンドソーム膜通過を完全に抑えるが、4)ニッキングは阻害しない、ことを明らかにした。次に、毒素分子Bフラグメント内の疎水性領域に変異がある毒素について膜通過効率を調べた。その結果、毒素分子のE349,D352は膜通過過程に非常に重要であることが明らかになった。また、フラグメントAのADPリボシル化活性は、膜通過には影響しないことが明らかになった。
期刊论文(4)
专著(0)
科研奖励(0)
会议论文
M.Tsuneoka et al.: "Evidence for involvement of furin in cleavage and activation of diphtheria toxin." J.Biol.Chem.268. 26461-26465 (1993)
M.Tsuneoka 等人：“弗林蛋白酶参与白喉毒素裂解和激活的证据。”
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
Y.Koda et al.: "Analysis of Lewis fucosyltransferase genes from the human gastric mucosa of Lewis-positive and-negative individuals." Blood. 82. 2915-2919 (1993)
Y.Koda 等人：“Lewis 阳性和阴性个体胃粘膜的 Lewis 岩藻糖基转移酶基因分析。”
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
膜結合型増殖因子と細胞間接着因子による細胞増殖および浸潤制御
  • 批准号：
    12215152
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
  • 资助金额：
    $24.96万
  • 财政年份：
    2001
  • 负责人：
    目加田 英輔
  • 依托单位：
    Osaka University
膜結合型細胞増殖因子による細胞接着を介した細胞増殖制御
  • 批准号：
    09254261
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
  • 资助金额：
    $3.84万
  • 财政年份：
    1997
  • 负责人：
    目加田 英輔
  • 依托单位：
    Kurume University
CD9ファミリーを介した膜結合型細胞増殖因子-細胞接着因子複合体の機能解析
  • 批准号：
    08265257
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
  • 资助金额：
    $1.98万
  • 财政年份：
    1996
  • 负责人：
    目加田 英輔
  • 依托单位：
    Kurume University
CD9ファミリーを介した膜結合型細胞増殖因子-細胞接着因子複合体の機能解析
  • 批准号：
    08265257
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
  • 资助金额：
    $1.98万
  • 财政年份：
    1996
  • 负责人：
    目加田 英輔
  • 依托单位：
    Kurume University
国内基金
海外基金
V-ATPase和S100A10正反馈调控内体pH促进CARDS毒素逆向转运的机制研究
  • 批准号：
  • 项目类别：
    省市级项目
  • 资助金额：
    --
  • 批准年份：
    2026
  • 负责人：
    黄呈
  • 依托单位：
    南华大学
溶酶体DOX阻断V-ATPase亚基聚合诱导耐药胶质瘤细胞巨泡式死亡的机制研究
  • 批准号：
    QN25H160010
  • 项目类别：
    省市级项目
  • 资助金额：
    --
  • 批准年份：
    2025
  • 负责人：
    郭宇航
  • 依托单位：
    温州医科大学
V-ATPase 突变通过影响 cGAS-STING 轴阻碍 CCL5 分泌介导滤泡性淋巴瘤荒漠 型肿瘤微环境形成的机制研究
大补阴丸经GSK-3β/mTORC1/TFEB促进v-ATPase维持溶酶体酸化改善AD认知障碍的机制研究
  • 批准号：
    82304911
  • 项目类别：
    青年科学基金项目
  • 资助金额：
    30万元
  • 批准年份：
    2023
  • 负责人：
    刘潇
  • 依托单位：
    成都中医药大学