熱ショック応答の分子機構と生理的役割の解明

阐明热休克反应的分子机制和生理作用

• 批准号: 12028215
• 负责人: 中井 彰
• 金额: $ 1.47万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12028215/
• 关键词: 熱ショック応答; 熱ショック蛋白質; 核移行シグナル; 熱ショック転写因子

トリのHSF3は熱ショック応答に必須であり、刺激により二量体から三量体へと転換する。高効率で相同組み替えが起こるニワトリBリンパ球系細胞株DT40を用いて、HSF3の遺伝子破壊を行いHSF3欠損細胞を作成した。その細胞に一連の欠損変異株を再導入した安定発現細胞を作成し、温熱ストレスを与えた前後の変異HSF3のオリゴマー構造を調べた。この生理的な条件下でのアッセイにより以下のことが明らかになった。(1)全長HSF3の二量体から三量体への正しい転換には分子サイズ20kDaの共有結合による翻訳後修飾が必要である。(2)議論の余地が残されていたカルボキシル末端側のロイシンジッパー様ドメインは、非ストレス下で活性型の三量体への移行を抑制することが決定付けられた。(3)活性型の三量体への転換に必須の領域を2カ所同定した。一つはDNA結合ドメインの一部であり、もう一つは核移行シグナル(NLS)と推測される部位であった。(4)NLSと推測される領域が確かにHSF3の核移行シグナルとして働くこと、さらにアミノ酸の部位特異的置換により核移行のみでなく活性型の三量体形成も妨げられることを明らかにした。

HSF3 is a hot, hot High efficiency, high efficiency, high The cells were damaged and the cells were reintroduced. Under these physiological conditions, the following conditions are required. (1)Full-length HSF3 dimers, trimers, and trimers are required for molecular binding to 20kDa. (2)There is room for discussion on how to control the migration of active three-dimensional molecules under the condition of non-active three-dimensional molecules (3)The active form of the three-dimensional transition must be determined by the same domain. A part of DNA binding site is predicted to be a nuclear transition site. (4)NLS estimates that the domain of nuclear migration of HSF3 is determined by site-specific substitution of HSF3.

项目成果

Nakai et al: "Arrest of spermatogenesis in mice expressing an active heat shock transcription factor 1"EMBO J.. 19. 1545-1554 (2000)

Nakai 等人：“表达活性热休克转录因子 1 的小鼠精子发生的停止”EMBO J.. 19. 1545-1554 (2000)

Tanikawa et al: "p53 suppresses the c-myb-induced activation of heat shock transcription factor 3"J.Biol.Chem.. 275. 15578-15585 (2000)

Tanikawa 等人：“p53 抑制 c-myb 诱导的热休克转录因子 3 的激活”J.Biol.Chem.. 275. 15578-15585 (2000)

Nakai et al: "A nuclear localization signal is essential for stree-induced dimor-to-trimer-transition of heat shock transcription factor 3"J.Biol.Chem.. 275. 34665-34671 (2000)

Nakai 等人：“核定位信号对于热休克转录因子 3 的 stree 诱导的二聚体向三聚体转变至关重要”J.Biol.Chem.. 275. 34665-34671 (2000)