膜細胞骨格蛋白質異常に基づく心筋細胞機能失調の研究

基于膜细胞骨架蛋白异常的心肌细胞功能障碍研究

• 批准号: 06274235
• 负责人: 重川 宗一
• 金额: $ 1.6万
• 依托单位: National Cardiovascular Center Research Institute
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-06274235/
• 关键词: 心筋症; 心筋症ハムスター; ジストロフィン; ジストロフィン結合糖蛋白質; 細胞骨格

本研究においては、心筋機能不全の発症メカニスムを研究するモデルとして、遺伝性心筋症ハムスター心筋異常について検討を行っている。昨年度までの研究で我々は、心筋症ハムスター心筋の場合、細胞骨格系に異常があり50kDaジストロフィン結合糖蛋白質(DAG)が細胞膜から欠損していること、ジストロフィンと他のDAGとの結合性が失われていることを示した。今年度は、50kDDAGについてさらに調べ、この動物心筋には、ほぼノーマルサイズのmRNAが正常心筋とほぼ同量発現していることがわかった。現在そのcDNAの塩基配列を正常のものと比較検討している。また、正常ハムスター心筋からのジストロフィン-DAG複合体の分離精製を行い骨格筋のものと比較した。心筋のジストロフィン-DAG複合体は、骨格筋とは異なって、ミクロゾーム分画からは抽出できないが、デタ-ジェント存在下心筋を直接ホモジネートすることにより50-60%の効率で可溶化できることが明かになった。精製は、さらにレクチンaffinity chromatography及びジストロフィン抗体chromatographyにより行った。その結果、複合体を構成するDAPの組成には心筋と骨格筋とで大きな差異を認めなかったが、心筋では、複合体含量が骨格筋より約10倍多いことが判明した。

The purpose of this study is to investigate the development of cardiac insufficiency and cardiac abnormalities in patients with inherited cardiac insufficiency. In the past year, we have studied the abnormality of 50kDa glycoproteins (DAG) in the cytoskeleton system and the lack of membrane damage in the cytoskeleton system. This year, 50kDDAG is produced in the same amount as the mRNA in the normal heart muscle. Now the cDNA sequence is normal and the comparison is discussed. Comparison of the separation and purification of the normal DAG complex The core tendon is directly soluble at an efficiency of 50-60%. Fine, fine affinity chromatography and fine affinity chromatography As a result, the composition of DAP is about 10 times higher than that of the core and the skeleton.