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動物細胞での相同組換之頻度をあげる分子の細胞内導入と導入法の開発

動物細胞での相同組換之頻度をあげる分子の細胞内導入と導入法の開発
增加动物细胞同源重组频率的分子的细胞内导入及导入方法的开发
批准号：
04262206
负责人：
河野 憲二
金额：
$1.47万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1992
资助国家：
日本
项目状态：
已结题
起止时间：
1992 至 --
来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-04262206/
关键词：
遺伝子ターゲティング遺伝子導入法ジフテリア毒素耐性RecAHVJ-リポソーム法核蛋白質

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项目成果

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1.重物細胞での相同組換え頻度に及ぼすRecAの効果毒素耐性型ペプチド鎖伸長因子2(EF-2)のジフテリア毒素耐性を利用した遺伝子ターゲティングシステムを浮遊培養系ではなく、プレート培養で定量的に検出できる系を確立した。この系を利用し、CHO-K1細胞でRecAを安定に発現している株を用いて、ターゲティングに及ぼすRecAの効果を調べたところ、E13細胞で野生型細胞に比べターゲティング頻度が約3倍上昇していることがわかった。上昇の効果が少ないため。細胞株間の差だけによるものかどうかを現在検討中である。また細胞に導入、発現させた核移行型RecAが細胞内に導入したプラスミド-プラスミド間の相同組換えを促進するかどうかを、大腸菌由来のneo遺伝子を用いて検討した、直鎖状の二重鎖neo遺伝子間での組換え頻度が、RecA発現細胞において有意に上昇しているという果結は現在までのところ残念ながら得られていない。今後単鎖と二重鎖同士の相同組換え頻度をあげられるかどうかについて検討する予定である。2.蛋白質と遺伝子両者を同時に臓器細胞内に導入する系の開発核蛋白質とプラスミド両者を混ぜ合わせ、されをリポソームに包み込み、その後リポソームと不活化HVJ(センダイウィルス)を混合することにより、HVJ-リポソームを作成する。このHVJ-リポソームをラット肝臓に直接注入すると、導入した遺伝子が効率よく核に運ばれ、その形質を発現することが明かとなった。また、同様の方法で肝炎ウィルスの表面抗原を一過的にラットの肝臓で発現させると、宿主の抗原抗体反応により肝炎の症状を引き起こすことが明かとなった(病理学的所見)。今後は安定に発現させる系の開発を行なう予定である。
期刊论文(8)
专著(0)
科研奖励(0)
会议论文
Keiko Kato: "Direct injection of hepatitis B virus DNA into liver induced hapatitis in adult rats." J.Biol.Chem.266. 22071-22074 (1991)
Keiko Kato：“将乙型肝炎病毒 DNA 直接注射到成年大鼠的肝脏中诱发肝炎。”
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
Mitsuru Kido: "Targeted introduction of a diphteria toxinresestan point mutation into the chromosomal.EF-2 locrs by in vivo homoloqous recombination." Cell Struct.Funct.16. 447-453 (1991)
Mitsuru Kido：“通过体内同源重组，有针对性地将白喉毒素抵抗点突变引入染色体。EF-2 基因座。”
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
Naoko Imamoto: "Antibodies against 70 KD heat shock cognate protein inhibit mediated mucleal import of Karyophilic proteins." J.Cell Biol.119. 1047-1061 (1992)
Naoko Imamoto：“针对 70 KD 热休克同源蛋白的抗体可抑制亲核蛋白介导的粘膜输入。”
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
Masao Tokunaga: "Purification and characterization of Bip/KAR2 protein from Saccharomyces cerevisiae." J.Biol.Chem.267. 17553-17559 (1992)
Masao Tokunaga：“酿酒酵母 Bip/KAR2 蛋白的纯化和表征。”
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
視線移動を伴う顔画像処理機構のサル下側頭葉多点電極記録による研究
  • 批准号：
    22K07331
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
  • 资助金额：
    $2.66万
  • 财政年份：
    2022
  • 负责人：
    河野 憲二
  • 依托单位：
    Dokkyo Medical University
哺乳動物小胞体ストレス応答の分子機構の解明
  • 批准号：
    24248019
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Scientific Research (A)
  • 资助金额：
    $12.23万
  • 财政年份：
    2012
  • 负责人：
    河野 憲二
  • 依托单位：
    Nara Institute of Science and Technology
TRECK肝炎モデルマウスを用いたヒト肝機能をもつマウスの作製
  • 批准号：
    19650107
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Exploratory Research
  • 资助金额：
    $2.11万
  • 财政年份：
    2007
  • 负责人：
    河野 憲二
  • 依托单位：
    Nara Institute of Science and Technology
高次脳機能による感覚から運動への情報変換の修飾
  • 批准号：
    16100004
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Scientific Research (S)
  • 资助金额：
    $29.37万
  • 财政年份：
    2004
  • 负责人：
    河野 憲二
  • 依托单位：
    Kyoto University
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