eIF4G関連蛋白質NAT1の機能解明

eIF4G相关蛋白NAT1的功能阐明

• 批准号: 14035238
• 负责人: 山中 伸弥
• 金额: $ 1.86万
• 依托单位: Nara Institute of Science and Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14035238/
• 关键词: 翻訳調節; ES細胞; DNAアレー; RNA結合蛋白質; 発癌

NAT1は翻訳開始因子eIF4Gに類似する蛋白質で、癌抑制遺伝子の候補として同定された。これまでの研究でNAT1は特定mRNAの翻訳調節に関与していることが示唆されている。そこで本研究においてはNAT1により翻訳調節されているmRNAの同定を目標とした。この目的のために2つの方法を用いた。まず一つ目の方法ではNAT1蛋白質をTandem affinity法により細胞から精製し、この際共精製されてくるRNAをDNAマイクロアレーにより同定することにした。これまでのところNAT1のC末端に2つのタッグを融合させた蛋白質をES細胞で発現させ、アフィニティー精製により高純度に融合蛋白を精製することに成功している。現在DNAアレーの条件検討を行っている。第2の方法では、NAT1の標的である可能性の高いIRES配列を有するmRNAについて、正常細胞とNAT1遺伝子欠損細胞の間で翻訳レベルを比較し、真にNAT1による調節を受けているかどうかを検討した。その結果、p27Kip1のIRES依存的な翻訳がNAT1遺伝子欠損細胞で亢進していることが明らかとなった。

NAT1 is a protein similar to eIF4G and a candidate for a cancer suppressor gene. These studies have shown that NAT1 is involved in the regulation of specific mRNAs. The aim of this study is to regulate mRNA expression in NAT1. The purpose of this is to use the method. A method for the purification of NAT1 protein by Tandem affinity is described. The fusion protein was successfully purified from ES cells and purified from the C-terminal region of NAT1. Now the condition of DNA loss is discussed. The second method is to compare the mRNA expression of NAT1 target with that of NAT1 gene deficient cells, and to discuss the regulation of NAT1 gene expression. As a result, p27 Kip1 and IRES dependent cells are damaged by NAT1 gene.

项目成果

Y.Tokuzawa: "Fbx15 is a novel target of Oct3/4 but is dispensable for ES cell self-renewal and mouse development"Molecular and Cellular Biology. (in press).

Y.Tokuzawa：“Fbx15 是 Oct3/4 的新靶标，但对于 ES 细胞自我更新和小鼠发育来说是可有可无的”《分子和细胞生物学》。