窒素含有型ビスホスホン酸によるがん標識免疫療法の基盤解析

含氮双膦酸癌症标记免疫治疗的基础分析

基本信息

批准号：
16023236
负责人：
田中義正
金额：
$ 3.84万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

まず、γδ型T細胞の示す腫瘍細胞傷害性に関与する特異的分子の同定とその生理的役割について検討を行った。膀胱がん由来のEJ-1および肺がん由来のLK-2をマウスおよびラットに免疫し、それら2種の細胞、および、他の感受性の増加を示すヒト腫瘍細胞株のほとんどに特異性を示すモノクローナル抗体を8種樹立した。そのうち、免疫沈降可能な抗体と、ウェスタンブロッティング可能な抗体を利用して、その分子がCD166であることを明らかにした。また、CD166分子の受容体であるCD6分子の発現を検討した結果、γδ型T細胞においては恒常的にその発現がみとめられ、CD6/CD166の相互作用がシグナル伝達に関わっていることが示唆された。そこで、エリスロリューケミアの一種であるK562にCD166を発現させ、窒素含有型ビスホスホン酸パルスによるγδ型T細胞に対する感受性変化におけるCD166の影響について詳細な検討を行った。その結果、CD166の強制発現により、窒素含有型ビスホスホン酸パルス後のγδ型T細胞に対する感受性増加が著名となった。この結果により、CD6/CD166の相互作用がγδ型T細胞の腫瘍細胞障害性を正に制御している可能性が示唆された。さらに、反対に、CD166を発現しているLK-2に、CD166のRNA干渉用ベクターを導入し、CD166のタンパク質レベルでの発現を低下させた場合において、窒素含有型ビスホスホン酸パルス後のγδ型T細胞に対する感受性の変化を検討したところ、明らかな感受性増強効果の減少がみとめられた。この結果も、CD6/CD166の相互作用がγδ型T細胞の腫瘍細胞障害性を正に制御している可能性を支持している。以上より、γδ型T細胞の示す抗腫瘍作用において、CD6/CD166分子が正の副刺激シグナル伝達分子として作用していることが明らかになった。

首先，我们研究了γδ型T细胞表现出的参与肿瘤细胞损伤的特定分子及其生理作用。用EJ-1对膀胱癌和肺癌的LK-2进行免疫，并建立了八种单克隆抗体，这些抗体对这两个细胞和大多数其他表现出易感性提高的人类肿瘤细胞表现出了特异性。其中，使用免疫可负抗的抗体和蛋白质印迹抗体来揭示该分子为CD166。此外，研究了CD6分子的表达，它是CD166分子的受体，并在γδ型T细胞中组成型观察到，这表明CD6/CD166的相互作用与信号转导有关。因此，CD166在K562（一种红细胞溶解血症）中表达，并且详细研究了CD166对γδ型T细胞的敏感性变化的影响。结果，CD166的强迫表达导致含氮双膦酸脉冲后对γδ型T细胞的敏感性显着增加。该结果表明，CD6/CD166的相互作用可能会在γδ型T细胞中积极调节肿瘤细胞毒性。此外，当将表达CD166表达LK-2引入表达CD166的LK-2时，在蛋白质水平下降低了表达CD166的表达时，对含氮双磷酸脉冲后对γδ型T细胞的敏感性的变化被发现了，并明确地发现了增强效率的敏感性。该结果还支持CD6/CD166相互作用阳性调节γδ型T细胞中肿瘤细胞毒性的可能性。从上面可以看出，CD6/CD166分子在γδ型T细胞的抗肿瘤作用中充当阳性共刺激性信号分子。