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DNAによる形質転換を利用したヒトや哺乳動物の遺伝子の解析

使用 DNA 转化分析人类和哺乳动物基因

基本信息

批准号：
60106007
负责人：
関口睦夫
金额：
$ 11.39万
依托单位：
Kyushu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Special Project Research
财政年份：
1985
资助国家：
日本
起止时间：
1985 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-60106007/
关键词：
形質転換遺伝子クローニング遺伝病哺乳動物培養細胞

项目摘要

細胞に外来性のDNAを移入することによりその細胞の遺伝的な性質を変える、いわゆる形質転換の実験は微生物では再現性よく実施することができるが、哺乳動物培養細胞ではその効率が低く、それを用いて遺伝子のクローニングを行うには困難があった。しかし形質転換を利用すると、たとえ遺伝子の産物が不明の場合でも目的とする遺伝子を分離することが原理的に可能であり、これによって遺伝病の解析などに大きく貢献すると考えられるので、この方法の確立と適用に努めた。まず試験管内で突然変異原などを作用させて分離したミュータント細胞に正常細胞より抽出したDNAを導入し、ミュータントの性質を正常型に形質転換する方法を確立した。この方法を用いて細胞の染色体凝縮を制御するヒトの遺伝子およびチミジル酸合成酵素の構造遺伝子をクローニングすることに成功した。特に並者は細胞増殖に必須の遺伝子であり、このような遺伝子を形質転換法を用いて成功したのは世界でも初めてのことである。この方法を用いて遺伝病に関する遺伝子を分離するには、ヒトの遺伝病の細胞にDNAを導入して形質転換を行うことが必要である。そのため色素性乾皮症やファンコニー症の細胞を用いて紫外線高感性やマイトマイシンC高感受性の抑制を指標として形質転換実験を行った。その結果一過性の感受性の抑制はみられたが、永続的な形質転換細胞は未だ得られていない。これについては現在研究を継続中である。以上の点から、所期の目標のコアの部分はほぼ達成することができた。現在この方法を用いて各種の哺乳動物ミュータント細胞の解析が本研究班の班員によって強力に展開されつつある。遺伝病細胞については未だ突破口を開くに至っていないが、現段階はそれに至る重要なステップと考えている。

The nature of the foreign DNA that has been transferred into the cell and the nature of the cell's legacy. The efficiency of mammalian cultured cells is low , それを用いて伝子のクローニングを行うには狠があった.しかしmorphological transformationをUsing the principle of すると、たとえ伝子のproductがUnknown occasionでもPurpose とする伝子をSeparation することがIt is possible that であり、これによって人伝のanalyticsなどに大きくcontributionすると考えられるので、このmethodのEstablishmentとapplicableにNUめた. In the test tube, the sudden change of allogeneic analytes causes the separation of normal cells and normal cells. The DNA was extracted and introduced, and the properties and properties of the DNA were extracted and transformed into the normal type. The method was established. The method is to use the chromosome condensation of the cells to control the するヒトの伝子およびチThe structural relics of ミジル acid synthase enzyme were successfully used. The special combination is necessary for cell proliferation, and it is necessary for cell proliferation. The transformation method of form and substance is the success of the world and the beginning of the world.このmethodを Useいて缝 Diseaseに关する缝子をSeparationするには、ヒトの窒It is necessary to introduce the DNA into the diseased cells and change the shape and quality of the cells. Xeroderma pigmentosum, xeroderma pigmentosum, cell type, high sensitivity to ultraviolet rays The inhibitory index of high susceptibility to Mathematics is the shape of the material. The results of the temporary suppression of sensitivity and the change of cells in Nagasaki's body are determined by the results.これについては is currently studying を継続中である. The above points are achieved, and the desired goal is achieved in part. Now the method is to use various mammalian cells to analyze and analyze, and the research team member of this research class is to use the strong power to develop the method. The pathogenesis of rickets has not yet opened, and the current stage is important.