内因性ジギタリス様物質の化学構造の同定および本態性高血圧症におけるその役割の研究

内源性洋地黄类物质的化学结构鉴定及其在原发性高血压中的作用研究

• 批准号: 61570409
• 负责人: 後藤 淳郎
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1986
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1986 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-61570409/
• 关键词: 内因性ジギタリス様物質; 本態性高血圧症; 【Na^+】・【K^+】・ATPase抑制因子; 視床下部

食塩と本態性高血圧症との関係を解く鍵となる物質として注目されている内因性ジギタリス様物質の精製を行った。出発材料として約20トンのヒト尿を用い、吸着クロマト,陽イオン交換,陰イオン交換,ゲル濾過の順に粗分画した。抗ジゴキシン抗体との交又活性では多くのステロイドをとらえる可能性があること、シグマ社犬腎【Na^+】・【K^+】・ATPase標品を用いる抑制作用では必ずしも生体内での作用を反映しない可能性があることなどから、本物質の検定法としてはヒト赤血球への【^3H】ウァバィン結合阻止活性を採用した。本物質は、SephadexG25において塩ピークとほぼ一致して高濃度に存在し、次にODSによる逆相高速液体クロマトにより分離した。この結果、本物質はヒト尿中では極性の異なる4つの活性から成ることが判明した。しかし、これらは蒸発・凍結乾燥に際して極性のより高い活性に移行する事実から、相互に関連した物質であると考えられる。4つの活性のうち最も取り扱いやすい、【CH_3】CN16%で溶出される活性について最初にアプローチした。本活性は熱に強く、酸・アルカリに対しても安定であった。陽・陰イオン交換とも素通りし中性物質で電荷は有しないと考えられた。タンパク分解酵素で失活せず、TFAの有無でODS上の挙動が変化しないことからペプチドではない。分子量は1000以下で、ヒト尿中の他,ラット・ヒト・イヌ血漿・ラット視床下部でも逆相高速液体クロマトの同一位置に溶出される活性を認めた。正常イヌ血漿中では【CH_3】CN16%で溶出される活性に比し、0DS素通りの極性の高い活性が圧倒的に優位にあり、急性生食負荷により両活性とも有意に増加した。以上の成績より、動物体内には、従来報告されている脂肪酸・リン脂質,アスコルビン酸などとは異なり、極めて水溶性のジギタリス様物質が存在することは間違いないと結論される。現在、FAB質量分析,NMR,紫外吸収バターンなどの検討により構造を解析中である。

Eat salt と normality high blood 圧 this disease と の masato is を solution く key と な る material と し て attention さ れ て い る endogenous ジ ギ タ リ ス others in line material の refined を っ た. About 20 ト 発 material と し て ン の ヒ ト urine を い, sorption ク ロ マ ト, Yang イ オ ン exchange, Yin イ オ ン exchange, ゲ ル filtration の shun に raw score draw し た. Antibodies against ジ ゴ キ シ ン と の more active で は more く の ス テ ロ イ ド を と ら え る possibility が あ る こ と, シ グ マ club canine kidney [Na ^ + 】 【 K ^ + ATPase, label product を い る inhibition で は will ず し も born in vivo で の role を reflect し な い possibility が あ る こ と な ど か ら, this material の 検 set method と し て は ヒ ト red blood The spheres へ へ [^3H] ウァバィ ウァバィ combine to prevent the activity を using た. This substance は, SephadexG25 に お い て salt ピ ー ク と ほ ぼ consistent し て high-concentration に し, time に ODS に よ る anti-phase high-speed liquid ク ロ マ ト に よ り separation し た. The results of <s:1> とが, the polarity of the substance in ヒト ヒト urine is で <s:1> different なる4 <e:1> <s:1> activity ら ら is determined to be る とが とが とが. し か し, こ れ ら は steamed 発, freeze drying に interstate し て polarity の よ り high い activity に transitional す る things be か ら, mutual に masato even し た material で あ る と exam え ら れ る. 4 つ の active の う ち も take most り Cha い や す い, CH_3 CN16 】 % で stripping さ れ る active に つ い て initially に ア プ ロ ー チ し た. This activity is <s:1> heat に strong く, acid · ア カリに カリに is stable であった against <s:1> て <e:1>. The <s:1> <s:1> exchange と of the anode and cathode と of the と glycoside through the <s:3> neutral substance で charge <e:1> has the <s:1> な と と test えられた. で タ ン パ ク decomposition enzyme inactivation せ ず, TFA の presence of で on ODS の 挙 dynamic が variations change し な い こ と か ら ペ プ チ ド で は な い. は molecular weight below 1000 で, ヒ ト urine の him, ラ ッ ト · ヒ ト · イ ヌ plasma · ラ ッ ト depending on the bed bottom で も anti-phase high-speed liquid ク ロ マ ト の same location に dissolution さ れ を る activity recognition め た. In normal イ ヌ plasma で は CN16 CH_3 】 【 % で dissolution さ れ に る activity than し, 0 ds tong り の polarity の high い activity が 圧 pour に optimal bit に あ り, acute raw load に よ り struck active と も intentionally に raised plus し た. Above の achievement よ り, animals に は, 従 to report さ れ て い る fatty acids, リ ン lipid, ア ス コ ル ビ ン acid な ど と は different な り, extremely め て water-soluble の ジ ギ タ リ ス others in the が matter す る こ と は breach between い な い と conclusion さ れ る. Now, in the FAB quality analysis,NMR, and ultraviolet absorption, バタ, な, な, <s:1>, 検 are discussed to explore the である in the structural を analysis.

项目成果

A.Goto;K.Yamada;M.Ishii;T.Sugimoto: Biochemical Biophysical Research Communication.

A.Goto；K.Yamada；M.Ishii；T.Sugimoto：生物化学生物物理研究通讯。