ヒト甲状腺細胞の癌化・増殖過程に関与するβ型Cキナ-ゼの薬理学的解析
ヒト甲状腺細胞の癌化・増殖過程に関与するβ型Cキナ-ゼの薬理学的解析
批准号:
03670099
负责人:
萩原 正敏
金额:
$1.09万
依托单位:
依托单位国家:
日本
项目类别:
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份:
1991
资助国家:
日本
项目状态:
已结题
起止时间:
1991 至 --
中文摘要
血漿中のカルシウムイオン濃度の調節は、副甲状腺から分泌される副甲状腺ホルモン(PTH)が重要な役割を果たしている。しかしながらPTHの分泌機構は正確に解明されているとはいえない。現在は、細胞外カルシウムイオン濃度が上昇すると、副甲状腺細胞膜のカルシウム透過性が変化し、細胞内カルシウムイオン濃度が上昇する。この後細胞内のカルシウム情報伝達系が活性化され、PTHが分泌されるという経路が考えられている。本研究は細胞外カルシウムイオン濃度が上昇したとき、活性化される細胞内カルシウム情報伝達系を同定することである。原発性副甲状腺腫の手術標本(3g)を検討材料とした。カルシウムを含むバッファ-で標本を破砕し、超遠心する。この上清をカルモデュリンを固定化したカラムに固着させる。同じバッファ-でよく洗浄した後、EGTAでカルシウムをキレ-トすることでカルシウム依存的カルモデュリン結合蛋白質を精製した。この蛋白質は分子量約500000であった。この蛋白質は、ラット脳より精製したカルモデュリン依存性蛋白質リン酸化酵素II(CaM KII)の抗体と反応した。さらに精製蛋白質のリン酸化酵素活性を測定したところ、シナプシンI・シンタイドIIをよくリン酸化し、ヒストンは基質とはならなかった。さらにCaM KIIの特異的阻害剤であるKNー62に対する感受性も脳のCaM KIIと同様であった。以上の結果より、我々がカルモデュリンアフィニティ-カラムで精製に成功した蛋白質はCaM KIIであると推定された。つまりPTH分泌に関与する細胞内カルシウム情報伝達系の一つにカルシウム依存的リン酸化酵素(CaM KII)が存在する可能性が示唆された。
英文摘要
血漿中のカルシウムイオン濃度の調節は、副甲状腺から分泌される副甲状腺ホルモン(PTH)が重要な役割を果たしている。しかしながらPTHの分泌機構は正確に解明されているとはいえない。現在は、細胞外カルシウムイオン濃度が上昇すると、副甲状腺細胞膜のカルシウム透過性が変化し、細胞内カルシウムイオン濃度が上昇する。この後細胞内のカルシウム情報伝達系が活性化され、PTHが分泌されるという経路が考えられている。本研究は細胞外カルシウムイオン濃度が上昇したとき、活性化される細胞内カルシウム情報伝達系を同定することである。原発性副甲状腺腫の手術標本(3g)を検討材料とした。カルシウムを含むバッファ-で標本を破砕し、超遠心する。この上清をカルモデュリンを固定化したカラムに固着させる。同じバッファ-でよく洗浄した後、EGTAでカルシウムをキレ-トすることでカルシウム依存的カルモデュリン結合蛋白質を精製した。この蛋白質は分子量約500000であった。この蛋白質は、ラット脳より精製したカルモデュリン依存性蛋白質リン酸化酵素II(CaM KII)の抗体と反応した。さらに精製蛋白質のリン酸化酵素活性を測定したところ、シナプシンI・シンタイドIIをよくリン酸化し、ヒストンは基質とはならなかった。さらにCaM KIIの特異的阻害剤であるKNー62に対する感受性も脳のCaM KIIと同様であった。以上の結果より、我々がカルモデュリンアフィニティ-カラムで精製に成功した蛋白質はCaM KIIであると推定された。つまりPTH分泌に関与する細胞内カルシウム情報伝達系の一つにカルシウム依存的リン酸化酵素(CaM KII)が存在する可能性が示唆された。
期刊论文(1)
专著(0)
科研奖励(0)
会议论文
Kato,M.et al.: "Purification and characterization of calciumーcalmodulin kinase II from human parathyroid glands." Journal of Endocrinology. 131. 155-162 (1991)
Kato, M. 等人:“人甲状旁腺中钙钙调蛋白激酶 II 的纯化和表征。内分泌学杂志 131. 155-162 (1991)
DOI:
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发表时间:
期刊:
影响因子:
--
作者:
[]
通讯作者:
Synthetic investigation of pathological phase separation of RNA-binding proteins
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批准号:21H05042
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项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research (S)
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资助金额:$121.14万
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财政年份:2021
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负责人:萩原 正敏
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依托单位:
トランスクリプトームの人為的操作による遺伝病の治療
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批准号:15H02505
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项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research (A)
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资助金额:$12.65万
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财政年份:2015
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负责人:萩原 正敏
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依托单位:
ヘルペスウイルスRNAの核外輸送制御機構の解明
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批准号:19041027
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项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
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资助金额:$4.8万
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财政年份:2007
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负责人:萩原 正敏
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依托单位:
ケミカルジェネティクスによる生体機能の解明
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批准号:18631008
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项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
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资助金额:$2.18万
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财政年份:2006
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负责人:萩原 正敏
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依托单位:
合成化合物による選択的スプライシングの制御
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批准号:02F00501
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项目类别:Grant-in-Aid for JSPS Fellows
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资助金额:$1.15万
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财政年份:2002
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负责人:萩原 正敏
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依托单位:
Biobjeによる遺伝子発現制御機構のシミュレーション
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批准号:13208005
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项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
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资助金额:$4.16万
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财政年份:2001
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负责人:萩原 正敏
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依托单位:
歌学習臨界期におけるキンカチョウ脳内CREBの活性化と遺伝子発現変動
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批准号:13041018
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项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
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资助金额:$2.56万
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财政年份:2001
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负责人:萩原 正敏
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依托单位:
遺伝子発現過程のOIMによるシミュレーション
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批准号:12208018
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项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
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资助金额:$0.0万
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财政年份:2000
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负责人:萩原 正敏
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依托单位:
キンカチョウの歌学習機構における転写因子CREBの役割
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批准号:12053223
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项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
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资助金额:$1.47万
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财政年份:2000
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负责人:萩原 正敏
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依托单位:
スプライシング因子リン酸化酵素の活性制御機構
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批准号:12029208
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项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
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资助金额:$1.41万
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财政年份:2000
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负责人:萩原 正敏
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依托单位:
選択的スプライシングのリン酸化制御機構
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批准号:11155208
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项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
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资助金额:$1.02万
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财政年份:1999
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负责人:萩原 正敏
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依托单位:
アポトーシスの細胞内リアルタイムイメージング
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批准号:11877020
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项目类别:Grant-in-Aid for Exploratory Research
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资助金额:$0.9万
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财政年份:1999
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负责人:萩原 正敏
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依托单位:
転写因子ATF1による細胞増殖制御とその融合遺伝子による癌化機構の解明
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批准号:10152217
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项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
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资助金额:$1.28万
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财政年份:1998
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负责人:萩原 正敏
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依托单位:
mRNA factoryのリン酸化制御
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批准号:10174210
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项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
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资助金额:$1.22万
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财政年份:1998
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负责人:萩原 正敏
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依托单位:
GFP蛍光による細胞内リン酸化反応のイメージング
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批准号:10877019
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项目类别:Grant-in-Aid for Exploratory Research
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资助金额:$1.28万
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财政年份:1998
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负责人:萩原 正敏
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依托单位:
Prospero相同遺伝子はCREBによって制御され神経可塑性に関与するのか?
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批准号:09259216
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项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
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资助金额:$1.28万
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财政年份:1997
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负责人:萩原 正敏
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依托单位:
悪性黒色腫に発現する融合症遺伝子EWS/ATF1の癌化機構における役割の解明
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批准号:09254225
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项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
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资助金额:$2.43万
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财政年份:1997
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负责人:萩原 正敏
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依托单位:
CREB結合蛋白CBPのリン酸化による制御
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批准号:08250206
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项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
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资助金额:$1.6万
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财政年份:1996
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负责人:萩原 正敏
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依托单位:
CREB/ATF1ドミナント・ネガティブ分子の構築と遺伝子改変マウスの作成
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批准号:08877025
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项目类别:Grant-in-Aid for Exploratory Research
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资助金额:$1.28万
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财政年份:1996
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负责人:萩原 正敏
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依托单位:
CREB欠損ショウジョウバエを用いる記憶関連遺伝子のサブトラクションクローニング
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批准号:08270219
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项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
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资助金额:$1.28万
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财政年份:1996
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负责人:萩原 正敏
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依托单位:
海外基金