受容体型チロシンキナーゼを介する情報伝達機構

受体酪氨酸激酶介导的信息转导机制

• 批准号: 04152079
• 负责人: 春日 雅人
• 金额: $ 6.4万
• 依托单位: Kobe University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Cancer Research
• 财政年份: 1992
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1992 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-04152079/
• 关键词: インスリン受容体; EGF受容体; PI3-キナーゼ; IRS-1; SH-2ドメイン; SHC

インスリン受容体を介する情報伝達系に関しては、PI3-キナーゼの活性化機構について検討を行った。まずPI3-キナーゼの85Kに対するモノクロナル抗体を作製した。この抗体を用いて、CHO-IR細胞について検討した。その結果、インスリン添加により、IRS-1と呼ばれている分子量185,000の蛋白にPI3-キナーゼ活性が結合すると考えられた。その機構としては、IRS-1のチロシン燐酸化部位と想定される燐酸化ペプチドによって、IRS-1と85Kサブユニットの結合が阻害されるが非燐酸化ペプチドによっては阻害されないこと、また85KサブユニットのSH-2ドメインのみを発現するとこの部分がIRS-1と結合することにより、インスリン受容体によってIRS-1がチロシン燐酸化するとその部位をPI3-キナーゼの85KサブユニットのSH-2ドメインが認識して両者が結合すると推定された。EGF受容体を介する情報伝達系に関しては、EGF受容体の各種の変異体を作製した。これらの変異体と細胞内蛋白との結合を検討した。この中で我々はSHCと呼ばれる蛋白がEGF依存性にEGF受容体と結合すること、ある種の変異体ではこの蛋白の結合が認められないことを見い出した。SHCの結合はRas蛋白の活性化、すなわちGTP結合型Ras蛋白の増加と関係していると想定されているが、現在この点について検討中である。またEGF受容体の各種変異体とその作用との関係では、EGF受容体のキナーゼ欠損の変異体でもMAPキナーゼの活性化やチミジンのDNAへの取り込みは高濃度のEGFでは生じることを認めた。従って、EGF受容体には、高濃度ではその内在するキナーゼ活性を介さない情報伝達系も存在すると考えられる。

The information transmission system of the receptor medium is related to the PI3-C activation mechanism. The PI3-C resistance is controlled at 85K. This antibody is used in the detection of CHO-IR cells. The results showed that IRS-1 and IRS-1 had a molecular weight of 185,000 and a protein activity of 185,000. The mechanism of IRS-1 phosphorylation site is determined by the binding of IRS-1 to 85K protein, and the binding of IRS-1 to 85 K protein is inhibited by the non-phosphorylation of IRS-1 to SH-2 protein. The receptor of IRS-1 is phosphorylated at the site of PI-3 - 2, and the receptor of IRS-1 is recognized and presumed to be bound. EGF receptor information transmission system is related to the control of various EGF receptor variants. The protein binding in the cell was investigated. This is the first time that we've seen an EGF-dependent protein binding. SHC binding to Ras protein activation, GTP-binding Ras protein increase in the relationship between the two, now the point of discussion The effect of EGF receptor on DNA synthesis was studied. The EGF receptor has a high concentration and an intrinsic activity.

项目成果

Ando,A.: "Enhanced insulin-induced mitogenesis and mitogen-activated protein kinase activities in mutand insulin receptors with substitution of two COOH-terminal tyrosine antophosphory lution sites by phenylalanine" J.Biol.Chem.267. 12788-12796 (1992)

Ando,A.：“用苯丙氨酸取代两个 COOH 末端酪氨酸抗磷酸化位点，增强突变胰岛素受体中胰岛素诱导的有丝分裂和有丝分裂原激活的蛋白激酶活性”J.Biol.Chem.267。

Yonezawa,K.: "Insulin-dependent formation of a complex containing 85-kDa subunit of PI3-kinase and tyrosine-phosphorylated IRS-1." J.Biol.Chem.267. 25958-25966 (1992)

Yonezawa,K.：“胰岛素依赖性形成含有 85 kDa PI3 激酶亚基和酪氨酸磷酸化 IRS-1 的复合物。”