発生工学的手法によるエイズ制圧の試み

1、HIV活性化機構の解析;以前、HIV Tgマウスを用いた解析から、LPS投与により脾臓で著しいHIV活性化が認められることを報告したが、この活性化におけるサイトカインの役割を明らかにするためにTNF-α、IL-6、IL-1 α/β、IFN-γといった各種サイトカイン遺伝子を欠損したHIV Tgマウスを作製し、解析した。HIV活性化は、TNF-α欠損あるいはIL-1 α/β欠損HIV Tgマウスで、それぞれ30%、50%に抑制された。従って、この活性化にはTNF-αおよびIL-1が重要な役割を果たすことが示唆された。更に、Tatの転写活性化能に関与する宿主因子であるCyclin T1をHIV Tgマウスに導入し、LPSによるHIV活性化を検討した結果、脾臓だけでなく胸腺、リンパ節でも著しい活性化が確認された。現在、このCyclin T1-dependentな活性化機構について更に詳細な解析を行っている。2、 Vpr Tgマウスの解析:HIV-1 vpr遺伝子を発現するTgマウスを作製し、解析した結果、Vpr発現によりT細胞のアポトーシスの亢進及びそれに伴う胸腺の著しい委縮が観察された。このアポトーシス誘導におけるFas/FasL系の関与を調べるために、FasLに不活化変異をもつgldマウスとVprマウスを交配し、Vpr/gldマウスを作製したが、このマウスでも同様に胸腺の委縮およびアポトーシスの亢進が観察された。従って、VprはFas/FasL系とは別の系でT細胞にアポトーシスを誘導することが明らかになった。3、HIV感受性マウスの作製:以前、CD4/CXCR4 TgマウスおよびCD4/CCR5 Tgマウスを作製し、HIV感受性を検討したところ、ウイルスDNAの合成(逆転写)は確認できたが、子孫ウイルスの産生は見られなかった。今回更に、ヒトCyclin T1を共発現するマウスを作製し、解析した。このマウスから調製したリンパ球を用いて同様のHIV感受性試験を行ったが、ウイルス産生は検出できなかった。従って、HIV感受性マウスの作出には更に他の宿主因子の導入が必要であることが明らかになった。現在、この因子の同定を進めている。

1、HIV活性化機構の解析;以前、HIV Tgマウスを用いた解析から、LPS投与により脾臓で著しいHIV活性化が認められることを報告したが、この活性化におけるサイトカインの役割を明らかにするためにTNF-α、IL-6、IL-1 α/β、IFN-γといった各種サイトカイン遺伝子を欠損したHIV Tgマウスを作製し、解析した。HIV活性化は、TNF-α欠損あるいはIL-1 α/β欠損HIV Tgマウスで、それぞれ30%、50%に抑制された。従って、この活性化にはTNF-αおよびIL-1が重要な役割を果たすことが示唆された。更に、Tatの転写活性化能に関与する宿主因子であるCyclin T1をHIV Tgマウスに導入し、LPSによるHIV活性化を検討した結果、脾臓だけでなく胸腺、リンパ節でも著しい活性化が確認された。現在、このCyclin T1-dependentな活性化機構について更に詳細な解析を行っている。2、 Vpr Tgマウスの解析:HIV-1 vpr遺伝子を発現するTgマウスを作製し、解析した結果、Vpr発現によりT細胞のアポトーシスの亢進及びそれに伴う胸腺の著しい委縮が観察された。このアポトーシス誘導におけるFas/FasL系の関与を調べるために、FasLに不活化変異をもつgldマウスとVprマウスを交配し、Vpr/gldマウスを作製したが、このマウスでも同様に胸腺の委縮およびアポトーシスの亢進が観察された。従って、VprはFas/FasL系とは別の系でT細胞にアポトーシスを誘導することが明らかになった。3、HIV感受性マウスの作製:以前、CD4/CXCR4 TgマウスおよびCD4/CCR5 Tgマウスを作製し、HIV感受性を検討したところ、ウイルスDNAの合成(逆転写)は確認できたが、子孫ウイルスの産生は見られなかった。今回更に、ヒトCyclin T1を共発現するマウスを作製し、解析した。このマウスから調製したリンパ球を用いて同様のHIV感受性試験を行ったが、ウイルス産生は検出できなかった。従って、HIV感受性マウスの作出には更に他の宿主因子の導入が必要であることが明らかになった。現在、この因子の同定を進めている。