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T細胞の活性化におけるNa^+イオンおよびNa^+イオン・チャンネルの役割

Na^+离子和Na^+离子通道在T细胞激活中的作用

基本信息

批准号：
11877059
负责人：
西村泰治
金额：
$ 1.15万
依托单位：
Kumamoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
1999
资助国家：
日本
起止时间：
1999 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

申請者らはNa^+を含まない培養液中では、抗原刺激によるエフェクターT細胞の増殖応答が消失することを見出し、本研究ではその不応答の機序の解明を目的に以下の実験を行った。1.ヒトCD4^+T細胞クローンをアミロライドで処理した。その結果抗原刺激に対する増殖応答が抑制されたので、ヒトT細胞にはある種の上皮細胞に発現するアミロライド感受性Na^+チャンネル(ENaC)が存在すると考えた。すでにENaCはB細胞とは発現することが報告されている。2.そこでRT-PCR法によりヒトCD4^+T細胞クローンにおけるENaC遺伝子の転写の検出を試みた。しかし、T細胞にはENaCの発現は検出できなかった。3.Na^+イオンを欠損する培養液中での、抗CD3抗体によるJurkat細胞の活性化を試みたところ、CD3分子、ζ鎖およびZAP-70などのシグナル伝達に関わる蛋白質のチロシリン酸化は、通常の培養液中で行ったコントロール細胞のものと同様に認められた。以上より、T細胞の活性化におけるNa^+チャンネルの作用機序を探索するのは困難と判断した。いっぽうで、申請者らは新たにIL-2存在下に長期培養したCD4^+T細胞クローンが、抗CD3抗体によるTCR刺激およびCD28を介した副刺激に不応答性となるが、抗原提示細胞により提示されたHLAクラスII・ペフチド複合体にはむしろ過剰に反応を示すことを発見した。そこで現在は、この研究に力を注ぎ、T細胞のメモリー形成にもつながるT細胞の長期生存機構の解明を試みている。

The applicant found that the proliferation of T cells disappeared in culture medium containing Na^+ and antigen stimulation, and the following research was carried out to clarify the mechanism of response. 1. CD4^+T cell processing As a result of antigen stimulation, the proliferation of T cells was inhibited, and the expression of T cells was inhibited by the presence of Na^+ cells (ENaC). ENaC and B cells are reported to be present. 2. RT-PCR assay for CD4 +T cell culture and detection of ENaC gene T cells and ENaC are not present. 3. The activation of Jurkat cells in the presence of anti-CD3 antibodies in culture medium without Na ^+ ion depletion is similar to that of human cells in normal culture medium. The phosphorylation of proteins involved in the expression of CD3 molecules, zeta chains and ZAP-70 molecules is similar to that of human cells in normal culture medium. It is difficult to determine the mechanism of Na^+ cell activation In addition, the applicant was able to detect the presence of anti-CD3 antibodies, TCR stimulation and CD28 mediated secondary stimulation, and the presence of anti-CD3 antibodies in long-term culture of CD4 +T cells. This research is focused on the development of T cells and their long-term survival mechanisms.