細胞周期チェックポイントにおけるM期サイクリン分解制御因子の機能解析

细胞周期检查点 M 期细胞周期蛋白降解调节因子的功能分析

• 批准号: 12215115
• 负责人: 小林 英紀
• 金额: $ 2.3万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12215115/
• 关键词: 細胞周期; サイクリン; サイクリン依存性キナーゼ; 蛋白質分解; ユビキチン; プロテアソーム; ユビキチン関連蛋白質

細胞周期におけるサイクリン依存性キナーゼの活性はその調節サブユニトであるサイクリンの結合と分解により制御を受けている。M期サイクリンはユビキチンープロテアソーム経路により分解されるが、その分解制御については細胞周期チェッックポイントの観点から重要な研究課題となっている。本研究では、サイクリンと相互作用する新規の分解制御因子を分離同定し、その機能解析を行なった。我々はまず、サイクリンAのN末端ドメインを用いた2-ハイブリッド法にを用いて、アフリカツメガエルのXDRP1遺伝子をクローニングした。XDRP1は585アミノ酸からなる蛋白質であり、N末端領域にユビキチンと高い相同性を示し、出芽酵母のDsk2蛋白質とよく似ていた。XDRP1はサイクリンAのリン酸化部位を含むN末端ドメインと結合する。XDRP1はA型サイクリンさらに異種のサイクリンA(ヒト)とは結合するが、サイクリンBとは結合しないことから、A型サイクリンと特異的に結合する因子である。XDRP1はリン酸化蛋白質であり、サイクリンAキナーゼに依存してリン酸化される。XDRP1のリン酸化にはサイクリンA-CDKとの結合が必要である。XDRP1をインジェクトした受精卵の細胞分裂は阻害され、XDRP1蛋白質を加えた卵抽出液中では、サイクリンAの分解が選択的に阻害された。また、XDRP1の出芽酵母ホモログDSK2発現による生育阻止を抑圧するサプレッサーを分離してその変異を同定したところ、プロテアソームのサブユニットのPRE2,PRE9,RPN1,NAS2であることが明らかになった。これらの結果から、XDRP1/DSK2は蛋白分解経路とユビキチン経路とプロテアソム間をリンクして、サイクリンAの分解を負に制御する抑制因子ではないかと推測される。

The cell cycle is dependent on the activity of the cell. The cell cycle is controlled by the combination of the cell cycle and the decomposition phase. In the M phase, we need to know how to decompose and control the cell cycle. it is important to study the problem. In this study, the new rule decomposition control factors are separated from each other in this study, and the machine can analyze the bank data. I'm sorry, I'm sorry. XDRP1 585, acid, protein, N-terminal domain, high homogeneity, budding yeast Dsk2 protein. The acidified site of XDRP1 contains N-terminal antigens. The combination of XDRP1, type A, and type A. XDRP1, acidify protein, acid protein, protein. XDRP1 chemical acidification is necessary to combine the necessary A-CDK conditions. XDRP1 zygote, cell division block, XDRP1 protein plus egg extract, block A decomposition, block cell division and block cell division. Saccharomyces cerevisiae, XDRP1, budding yeast, DSK2, fertility prevention, fertility inhibition, fertility prevention, fertility prevention, pregnancy prevention, fertility prevention, prevention and treatment. The results of the experiment, the XDRP1/DSK2 proteolysis pathway, the enzyme pathway, the inter-cell cycle, the enzyme inhibitor, the proteolytic enzyme, the proteolytic pathway, the

项目成果

H.Kobayashi: "サイクリンの周期的発現による細胞周期制御;実験医学シリーズ「細胞周期がわかる」"羊土社.. 24-35 (2001)

H. Kobayashi：“通过细胞周期蛋白的周期性表达来控制细胞周期；实验医学系列“理解细胞周期”Yodosha.. 24-35 (2001)

M.Funakoshi et al.: "Isolation and characterisation of a mutation in the PMR1 gene encoding a Golgi membrane ATPase, which causes hypersensitivity to over-expression of Clb3 in Saccharomyces cerevisiae."Mol.Gen.Genet.. 264. 29-36 (2000)

M.Funakoshi 等人：“编码高尔基膜 ATP 酶的 PMR1 基因突变的分离和表征，该突变导致酿酒酵母对 Clb3 过度表达过敏。”Mol.Gen.Genet.. 264. 29-36

T.Goda et al.: "The N-terminal helix of Xenopus cyclins A and B contributes to binding specificity of the cyclin-CDK complex."J.Biol.Chem.. 276(in press). (2001)

T.Goda 等人：“非洲爪蟾细胞周期蛋白 A 和 B 的 N 末端螺旋有助于细胞周期蛋白-CDK 复合物的结合特异性。”J.Biol.Chem.. 276（出版中）。

M.Funakoshi et al.: "サイクリンAのタンパク分解調節機構;細胞周期のフロンティア."実験医学.. 18. 903-909 (2000)

M.Funakoshi 等人：“细胞周期蛋白 A 的蛋白水解调节机制；细胞周期前沿”18. 903-909 (2000)。