卵減数分裂におけるサイクリンAの機能

细胞周期蛋白A在卵子减数分裂中的作用

• 批准号: 08275221
• 负责人: 小林 英紀
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08275221/
• 关键词: 細胞周期; 減数分裂; サイクリン; サイクリン依存性キナーゼ; 出芽酵母; CDC28

サイクリンはcdkと結合してcdkキナーゼ活性を調節することで細胞周期進行を制御するタンパク質因子である。細胞周期におけるA型サイクリンの機能と構造の関係を明らかにするため、XenopusサイクリンAを出芽酵母に導入して細胞周期停止を引き起こし、それを抑圧する酵母変異株(サプレッサー変異)を分離して、サイクリンA機能に関る因子の同定及びその解析を行った。(1)Xenopusの卵成熟と胚発生過程における生殖細胞型サイクリンA1と体細胞型サイクリンA2の発現を調べた。サイクリンA1は卵母細胞成熟のGVBDの時期に合成を開始し、器官形成期後消失した。一方、サイクリンA2は卵母から卵割期では発現せず、器官形成期後に発現がみられた。サイクリンA1とA2で発現の時期が異なる。(2)サイクリンA1cDNAを出芽酵母の発現ベクターにつないでGAL1プロモーターにより発現させて酵母の細胞周期を停止させた。サイクリンAの発現は、本来、分裂期で母細胞と娘細胞に分配されるべき染色体DNAがそのまま娘細胞に引っ張りこまれる現象を引き起こした。この染色体の異常な動きはDNA複製なしに起こった。サイクリンA1と酵母Cdc28の複合体に依存したキナーゼ活性に依存してこの現象が起こった。さらに、サイクリンA1による細胞周期停止抑圧する酵母変異株(サプレッサー変異)を分離してその遺伝子をクローニングし、CDC28の3つの異なる変異を同定した。それら3つの変異部位はサイクリン分子と向き合ったCdc28のC末端葉ドメインにマップされた。変異部位の違いにより、それぞれのサイクリン-Cdc28複合体との結合能に差が見られた。細胞周期各時期におけるサイクリン-Cdk複合体の結合特異性に、CdkのC末端葉とサイクリンの相互作用が重要な働きをしているのかもしれない。

サ イ ク リ ン は CDK と combining し て CDK キ ナ ー を ゼ activity regulating す る こ と で cell cycle を suppression す る タ ン パ ク qualitative factor で あ る. Cell cycle に お け る type A サ イ ク リ ン の function と tectonic の masato を and Ming ら か に す る た め, Xenopus サ イ ク リ ン を A budding yeast に import し て cell cycle stopped を lead き こ し, そ れ を 圧 suppression す る - different strains of yeast (サ プ レ ッ サ ー variations) を separation し て, サ イ ク リ ン A function に masato る factor の with fixed and び そ の parsing Youdaoplaceholder0 lines った. (1) the Xenopus の 発 raw egg と mature embryo process に お け る germ cell type サ イ ク リ ン A1 type と somatic サ イ ク リ ン A2 の 発 now を adjustable べ た. Youdaoplaceholder0 リ リ リ A1 に during oocyte maturation <s:1> GVBD <s:1>, に synthesis を begins を and disappears after organ formation <s:1> た. One party, サ サ <s:1> リ リ リ A2 oocyte ら で で occurrence せず during oocyte retrieval, に occurrence がみられた after organ formation. Youdaoplaceholder0 サ リ リ リ A1とA2で occurrence period が different なる. (2) サ イ ク リ ン A1cDNA を budding yeast の 発 now ベ ク タ ー に つ な い で GAL1 プ ロ モ ー タ ー に よ り 発 now さ せ の て yeast cell cycle を stop さ せ た. サ イ ク リ ン A の 発 は now, originally, divided period で と niang mother cells に distribution さ れ る べ き chromosome DNA が そ の ま ま niang cells に lead っ zhang り こ ま れ る phenomenon を lead き up こ し た. <s:1> chromosomal <s:1> abnormality な initiates <s:1> った DNA replication な に に and った った. サ イ ク リ ン A1 と yeast Cdc28 の complex に dependent し た キ ナ ー に ゼ activity dependent し て こ の phenomenon since が こ っ た. さ ら に, サ イ ク リ ン A1 に よ る cell cycle stop 圧 suppression す る - different strains of yeast (サ プ レ ッ サ ー variations) を separation し て そ の posthumous son 伝 を ク ロ ー ニ ン グ し, CDC28 の 3 つ の different な る - different を be し た. Youdaoplaceholder0 3 それら <s:1> variant site サ サ <s:1> リ リ リ と molecule と towards <s:1> complex ったCdc28 <s:1> c-terminal lobe ドメ <s:1> に に ップされた ップされた. The <s:1> violation of <s:1> によ られた and それぞれ サ <s:1> リ リ リ リ リ the に binding energy difference of the リ -Cdc28 complex と can be found in られた. Cell cycle period に お け る サ イ ク リ ン - Cdk complex の combining specific に, Cdk の C terminal lobe と サ イ ク リ ン の interaction が important な 働 き を し て い る の か も し れ な い.

项目成果

H.Kobayashi: "The cell cycle and the tumor suppressor genes" Jpn j Clin Pathol. 44. 3-11 (1996)

H.Kobayashi：“细胞周期和肿瘤抑制基因”Jpn j Clin Pathol。

S.Miyake: "Identification of two Xenopus laevis genes,xMCM2 and xCDC46,with sequence homology to MCM genes involved in DNA replication" Gene. 175. 71-75 (1996)

S.Miyake：“鉴定了两个非洲爪蟾基因 xMCM2 和 xCDC46，与参与 DNA 复制的 MCM 基因具有序列同源性”基因。

小林英紀: "細胞周期の進行調節とサイクリン-Cdk複合体" 蛋白質核酸酵素. 41. 1799-1806 (1996)

Hideki Kobayashi：“细胞周期进程调节和细胞周期蛋白-Cdk 复合物”蛋白质核酸酶。41。1799-1806 (1996)