サイクリンの分解ドメインの構造と機能

细胞周期蛋白降解域的结构和功能

• 批准号: 09267226
• 负责人: 小林 英紀
• 金额: $ 1.6万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09267226/
• 关键词: 細胞周期; サイクリン; 蛋白質分解; 機能ドメイン; CDK-サイクリン複合体

細胞周期時期特異的に分解されるサイクリンは、その蛋白分解と細胞の生理機能との関係が具体的に解析されている蛋白質である。本研究では、細胞周期の調節機能を担うサイクリン蛋白質の機能ドメインを解析するため、サイクリンの分解機構とM期終了におけるサイクリン分解の調節的役割に焦点を絞り、in vivo及びin vitroでのサイクリン分解の機能ドメインの解析を行なった。卵抽出液によるサイクリン分解の機能ドメインのin vitro解析とサイクリンの酵母への導入によるin vivo解析を通して、サイクリンA,サイクリンBの分解に関与する機能ドメインを解析した結果、サイクリン分解に必要な領域が、M期サイクリンのN末端領域の分解ボックス及び分解ボックスの下流側N末端ヘリクッスに存在することがわかった。次に、分解ボックスとcdk結合部位サイクリンボックス間の保存領域であるN末端ヘリクッスに注目してその機能を解析した結果、N末端ヘリクッスはCdc2と弱い相互作用を介して、サイクリン分解機能に関与することがわかった。次に、XenopusサイクリンA1のN末端ドメインをベイトにした酵母2-ハイブリッドにより、成熟卵母細胞cDNAライブラリーから、サイクリンA1と特異的に相互作用する新規のユビキチン関連遺伝子を同定した。この新規因子は、サイクリンAに保存されたN末端ドメインの特異的モチーフと結合して、サイクリン-CDK複合体に結合することが判明した。

Specific cell cycle period に decomposition さ れ る サ イ ク リ ン は, そ の protein decomposition と cell の physiology と の masato is が specific analytical さ に れ て い る protein で あ る. This study で は の, cell cycle regulation function を bear う サ イ ク リ ン protein の function ド メ イ ン を parsing す る た め, サ イ ク リ ン の decomposition institution と M final に お け る サ イ ク リ ン decomposition の cut に focus adjustment service stranded を り, in vivo and び in vitroで で サ サ リ リ リ リ decomposition of <s:1> function ドメ を リ リ analysis of を lines なった. Egg extract に よ る サ イ ク リ ン decomposition の function ド メ イ ン の in vitro analytical と サ イ ク リ ン の yeast へ の import に よ る in Vivo analytical を tong し て, サ イ ク リ ン A, サ イ ク リ ン B の decomposition に masato and す る function ド メ イ ン を parsing し た results, サ イ ク リ ン phase decomposition が に な necessary field, M サ イ ク リ ン の N terminal domain decomposition ボ の ッ ク ス and び decomposition ボ ッ ク ス の downstream side N terminal ヘ リ ク ッ ス に exist す る こ と が わ か っ た. Time に, decomposition ボ ッ ク ス と CDK combining site サ イ ク リ ン ボ ッ ク ス の preservation areas between で あ る N terminal ヘ リ ク ッ ス に attention し て そ の function analytical し を た results, N terminal ヘ リ ク ッ ス は Cdc2 と weak い を interaction interface し て, サ イ ク リ ン decomposition function に masato and す る こ と が わ か っ た. に, Xenopus サ イ ク リ ン A1 の N terminal ド メ イ ン を ベ イ ト に し た yeast 2 - ハ イ ブ リ ッ ド に よ り, mature oocytes cDNA ラ イ ブ ラ リ ー か ら, サ イ ク リ ン A1 と specific に interaction す る new rules の ユ ビ キ チ ン masato even heritage 伝 son を be し た. こ の new rules factor は, サ イ ク リ ン A に save さ れ た N terminal ド メ イ ン の specific モ チ ー フ と combining し て, サ イ ク リ ン - CDK complex に combining す る こ と が.at し た.

项目成果

H.Kobayashi: "The cell cycle and the tumor suppressor genes" Jpn j Clin Pathol. 44. 3-11 (1996)

H.Kobayashi：“细胞周期和肿瘤抑制基因”Jpn j Clin Pathol。

H.Sikder: "An altered nuclear migration into the daughter bud is induced by the cyclin Al-mediated Cdc28 kinase through an aberrant spindle movement in Saccharomyces cerevisiae" Cell Struct.Funct.22. 465-476 (1997)

H.Sikder：“细胞周期蛋白 Al 介导的 Cdc28 激酶通过酿酒酵母中异常的纺锤体运动诱导改变的核迁移到子芽中”Cell Struct.Funct.22。

M.Funakoshi: "Xenopus cyclin Al can associate with Cdc28 in budding yeast, causing cell-cycle arrest with an abnormal distribution of nuclear DNA" Genes to Cells. 2. 329-343 (1997)

M.Funakoshi：“非洲爪蟾细胞周期蛋白 Al 可以与出芽酵母中的 Cdc28 结合，导致细胞周期停滞，并导致核 DNA 分布异常”《Genes to Cells》。

小林 英紀: "サイクリン/サイクリン依存性キナーゼ" 医学のあゆみ. 181. 749-749 (1997)

Hideki Kobayashi：“细胞周期蛋白/细胞周期蛋白依赖性激酶”医学史 181. 749-749 (1997)。

S.Miyake: "Identification of two Xenopus laevis genes,xMCM2 and xCDC46,with sequence homology to MCM genes involved in DNA replication" Gene. 175. 71-75 (1996)

S.Miyake：“鉴定了两个非洲爪蟾基因 xMCM2 和 xCDC46，与参与 DNA 复制的 MCM 基因具有序列同源性”基因。