胚性幹細胞(ES細胞)の分化誘導による肝臓再構築に関する基礎的研究

胚胎干细胞（ES细胞）诱导分化重建肝脏的基础研究

• 批准号: 12877176
• 负责人: 谷口 英樹
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: University of Tsukuba
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12877176/
• 关键词: 胚性幹細胞; 分化; 肝臓; 再生医学

多能性を持つ胚性幹細胞(embryonic stem cell:以下、ES細胞)の培養系における肝実質細胞への分化誘導を試みた。ES細胞からの肝臓の分化誘導系は、現在までに全く確立されていなかった。そこで、まず最初にES由来細胞群の中に肝実質細胞へ分化したと考えられる細胞が存在するか否かを検証した。すなわち、ES細胞をLIF(leukemia inhibitory factor)の非存在下に浮遊培養を行い胚様体を形成させたのち長期培養し、肝実質細胞の特異的マーカーであるHNF(hepatocyte specific nuclear factor)3、HNF4、albumin、alpha-fetoprotein、G-6-P等の発現を定量的PCR(タックマンPCR)により解析した。その結果、胚様体の付着培養系において培養15日目以降に肝実質細胞の特異的マーカーの発現上昇が認められた。これらのES細胞を細胞外マトリックスとしてラミニン・コラーゲンIV、サイトカインとしてHGF(hepatocyte growth factor)およびEGF(epidermal growth factor)の存在下に培養を継続すると、タンパクレベルでアルブミンを発現する2核を有する成熟肝細胞が分化誘導されることが判明した。今後、さらに効率のよいES細胞から肝幹細胞への分化誘導法の確立へと研究を進める予定である。

Pluripotent を embryonic stem cell (embryonic stem cell: below, ES cells) <s:1> culture line における liver parenchymal cell へ <s:1> differentiation induction を test みた. ES cell ら ら <s:1> liver <s:1> differentiation-inducing line, now までに is fully く established されて な な な った った. そ こ で, ま ず に ES origin of cells initially の へ に liver be in cell differentiation し た と exam え ら れ が る cells exist す る か no か を 検 card し た. す な わ ち, ES cells を LIF (leukemia inhibitory factor) の the presence of に floating line cultivate を い embryo を others body formation さ せ た の ち long-term training し, liver be stromal cells の specific マ ー カ ー で あ る HNF (hepatocyte specific nuclear factor)3, HNF4, albumin, alpha-fetoprotein, G-6-P, etc. are を quantified by PCR(タッ <s:1> <s:1> <s:1> PCR)によ analysis た. そ の の pay the training results and others in embryo, body is に お い て cultivate 15 orders to drop に liver be stromal cells の specific マ ー カ ー の 発 now rising が recognize め ら れ た. こ れ ら の ES cells を extracellular マ ト リ ッ ク ス と し て ラ ミ ニ ン · コ ラ ー ゲ ン IV, サ イ ト カ イ ン と し て HGF (hepatocyte growth factor) お よ び EGF (epidermal growth Factor) in the presence of の に cultivate を 継 続 す る と, タ ン パ ク レ ベ ル で ア ル ブ ミ ン を 発 now す る 2 nuclear を す る が mature liver cells differentiation inducing さ れ る こ と が.at し た. In the future, the さらに efficacy <s:1> よ さらに ES cells ら ら liver stem cells へ <s:1> differentiation induction method <e:1> will be established, and the へと research を will be carried out in める to determine である.

项目成果

Suzuki,H.Taniguchi, et al: "Flowcytometric separation and enrichment of multipotent hepatic progenitor cells in mouse developing liver"Hepatology. 32(6). 1230-1239 (2000)

Suzuki, H.Taniguchi 等人：“小鼠发育肝脏中多能肝祖细胞的流式细胞术分离和富集”肝病学。

H.Taniguchi et al: "Clonogenic colony forming ability of flowcytometrically isolated hepatic stem/progenitor cells in the murine fetal liver"Cell Transplantation. 9. 697-700 (2000)

H.Taniguchi 等人：“小鼠胎儿肝脏中流式细胞术分离的肝干/祖细胞的克隆集落形成能力”细胞移植。

谷口英樹: "肝臓における再生医療の展開"今日の移植. 13. 228-232 (2000)

Hideki Taniguchi：“肝脏再生医学的发展”《今日移植》13. 228-232 (2000)。

谷口英樹,鈴木淳史: "多能性肝幹細胞の分化・増殖機構の解明"蛋白・核酸・酵素. 45. 256-262 (2000)

Hideki Taniguchi、Atsushi Suzuki：“阐明多能肝干细胞的分化和增殖机制”蛋白质、核酸和酶 45. 256-262 (2000)。

谷口英樹,鈴木淳史: "「臓器置換」から「臓器再生」へ"細胞工学. 19. 869-873 (2000)

Hideki Taniguchi、Atsushi Suzuki：“从‘器官替代’到‘器官再生’”《细胞工程》19. 869-873 (2000)。