NMDA受容体活性に果たすポリアミンの役割

多胺在 NMDA 受体活性中的作用

• 批准号: 01F00341
• 负责人: 五十嵐 一衛
• 金额: $ 1.02万
• 依托单位: Chiba University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-01F00341/
• 关键词: ポリアミン; スペルミン; スペルミジン; NMDA受容体; イフェンプロジル; サイクリックポリアミン

1.ポリアミンはNMDA受容体活性を脱分極時に促進するが、その際のポリアミンの結合部位をsite-directed mutagenesisにより作製した変異NMDA受容体活性を測定することにより同定し、アゴニスト結合領域より更にN末端側にあるこの領域を調節領域(R-domain)と命名した。この約350アミノ酸残基から成るR-domain(His-tag付加)を大腸菌に発現させ、その性質を検討した。NR1Rはスペルミン及びイフェンプロジルと強く結合したが、NR2AR及びNR2BRはスペルミンとは弱く結合したがイフェンプロジルとは全く結合しなかった。現在、このR-domainの結晶化を試みている。2.ポリアミンによるNMDA受容体活性促進にはNR1のGlu181とGlu342が関与している。この2分子のGluをGlnに置換したNMDA受容体がネイティブなNMDA受容体と等量存在すると、ポリアミンによる活性促進が消滅する。このポリアミンによる活性促進の起こらなくなったNMDA受容体cDNAを持つトランスジェニックマウスを作製した。現在、ネイティブと変異NMDA受容体の脳における発現率を検討しており、次いでこのマウスの記憶形成能や運動能力を測定する予定である。3.NMDA受容体活性のポリアミンによる阻害に関与するチャネル形成領域のアミノ酸残基を同定し、サイクリックテトラアミン又はサイクリックペンタアミンがNMDA受容体活性を強く阻害することを見出した。

1. NMDA receptor activity is depolarized and promoted, and the NMDA binding site is site-directed. Mutagenesis is produced and measured with different NMDA receptor activity. The ゴニストcombination domain よりにN terminal side にあるこのdomain をregulation domain (R-domain)とnamed した. About 350 アミノ acid residues of この are converted into るR-domain (His-tag plus) and を coliform bacteria are present させ, and the properties of その are を検した. NR1R はスペルミン和びイフェンプロジルと强くcombine したが, NR2AR and びNR 2BR はスペルミンとは weak くcombination したがイフェンプロジルとは全くcombination しなかった. Now, try the crystallization of このR-domain みている. 2. The activity of NMDA receptors is promoted by NR1Glu181 and Glu342.この2 molecules のGluをGlnにreplacementしたNMDA receptor がネイティブなNMDA receptor とexists in equal amounts すると, ポリアミンによるactivity promotion がannihilation する. NMDA The recipient cDNA was produced by Torotron Technology. Now, the appearance rate of different NMDA receptors is different.おり、时いでこのマウスのMemory formation ability and athletic ability をdetermination する Predetermined である. 3. The activity of NMDA receptor is inhibited by blocking and forming the domain of NMDA receptor, and the residues of NMDA acid residues are determined together.クリックテトラアミンはサイクリックペンタアミンがNMDA receptor activity is strong and hinders することを见出した.

项目成果

Nishimura, K. et al.: "Inhibition of cell growth through inactivation of eIF5A by deoxyspergualin"Biochem. J.. 363. 761-768 (2002)

Nishimura, K. 等人：“脱氧精胍菌素通过灭活 eIF5A 来抑制细胞生长”Biochem。

Raj, V.S.et al.: "Decrease in cell viability in an RMF, σ^<38> and OmpC triple mutant of Escherichia coli"Biochem. Biophys. Res. Commun.. 299. 252-257 (2002)

Raj，V.S. 等人：“大肠杆菌的 RMF、σ^38 和 OmpC 三重突变体中的细胞活力降低”Biochem.Res.299.252-257 (2002)

Nishimura, K. et al.: "Essential role of S-adenosylmethionine decarboxylase in mouse embryonic development."Genes Cells. 7. 41-47 (2002)

Nishimura, K. 等人：“S-腺苷甲硫氨酸脱羧酶在小鼠胚胎发育中的重要作用。”基因细胞。

Kashiwagi, K. et al.: "The ATPase activity and the functional domain of PotA, a component of the spermidine-preferential uptake system in Escherichia coli"J.Biol.Chem.. 277. 24212-24219 (2002)

Kashiwagi, K. 等人：“大肠杆菌中亚精胺优先摄取系统的一个组成部分 PotA 的 ATP 酶活性和功能域”J.Biol.Chem.. 277. 24212-24219 (2002)

Yoshida, M. et al.: "Polyamines enhance synthesis of the RNA polymerase σ^<38> subunit by suppression of an amber termination codon in the open reading frame"J.Biol.Chem.. 277. 37139-37146 (2002)

Yoshida, M. 等人：“多胺通过抑制开放阅读框中的琥珀终止密码子来增强 RNA 聚合酶 σ^<38> 亚基的合成”J.Biol.Chem.. 277. 37139-37146 (2002)