active repressor domainを利用した転写制御因子の標的の検索

使用活性抑制域搜索转录调节因子的靶标

• 批准号: 09780625
• 负责人: 片岡 浩介
• 金额: $ 1.54万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 1998
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09780625/
• 关键词: 転写制御; 転写因子; 遺伝子発現

転写を積極的に抑制する機能をもついわゆるactive repressor domainを利用して、既知の転写制御因子の標的となる遺伝子を単離するための実験系の確立を試みた。癌遺伝子産物/転写活性化因子Mafと、転写抑制因子Mxilのrepressor domainであるSID(Sin3-interaction domain)とのキメラ蛋白質SID-Mafは、期待されたように強い転写抑制能を示した。さらに、非常に強い転写活性化能を持つVP16 activation domainをMafに結合したキメラ蛋白質VP16-Mafを作製し、これらの転写活性化能とChicken embryo fibroblastにおけるtransformation能とを調べたところ、Mafの転写活性化能とtransformationとのあいだに明確な相関間係があることがわかった。すなわち、Mafの標的遺伝子の発現量は、通常の細胞とMafを強制発現させた細胞との差に比べて、SID-MafおよびVP16-Mafを発現する細胞間の差の方がより顕著であることが期待され、したがって、標的遺伝子を単離する上で有用であると考えられた。実際に標的遺伝子を単離するには既存の技術であるSubtractionやcDNA micro arrayなどを利用することが考えられるので、現在これらのキメラMaf蛋白質を恒常的に発現している細胞の確立を進めている。また、これらのキメラMaf蛋白質の発現のON/OFFをコントロールできる系ができればMafの1次標的遺伝子のみを効率よく単離できるであろうと考えられるので、これも同時に試みている。本研究で試みたSIDおよびVP16といった転写制御domainを利用する系は、モデルとして用いたMaf以外の転写因子についてもその標的遺伝子を単離する上で一般的に応用可能かつ有用である。

The active repressor domain is used to determine whether the active repressor domain is active, whether the active repressor domain is active or not. The protein SID-MAF domain of Mxil, a cancer protein product/gene activation factor, and a gene inhibition factor Mxil, a protein SID-MAF domain, and a gene inhibition factor Mxil, are expected to be strong. The protein VP16-Maf can be activated by the protein VP16-Maf. The protein VP16-Maf can be activated by the protein VP16-Maf. The protein VP16-Maf can be activated by the protein VP16-Maf. The amount of target gene expression in normal cells and Maf stress expression in cells is different from that in SID-Maf expression and VP16-Maf expression. In the meantime, target proteins are isolated from existing technologies, and Subtraction and cDNA micro arrays are used to investigate and develop constant protein expression in cells. On/Off of protein production in the first order of Maf protein production in the second order of Maf protein production in the third order of Maf protein production in In this study, we try to use SID and VP16 to control the use of domain, which is the most common use of domain, to control the use of domain factors other than MAF.

项目成果

T.Kurihara et al.: "Genomic structure and promoter analysis of the gene encoding MM3,a member of transmembrane 4 superfamily." Gene. 185. 277-283 (1997)

T.Kurihara 等人：“跨膜 4 超家族成员 MM3 编码基因的基因组结构和启动子分析。”

K.Kataoka et al: "Transactivation activity of Maf nuclear oncoprotein is modulated by Jun,Fos and small Maf proteins." Oncogene.12. 53-62 (1996)

K.Kataoka 等人：“Maf 核癌蛋白的反式激活活性由 Jun、Fos 和小 Maf 蛋白调节。”

T.Kurihara et al: "Genomic structure and promoter analysis of the gene encoding MM3,a member of transmembrane 4 superfamily." Gene.185. 277-283 (1997)

T.Kurihara 等人：“跨膜 4 超家族成员 MM3 编码基因的基因组结构和启动子分析”。