プログラム細胞死を実行するプロテアーゼI CE/CED-3ファミリーの活性調節機構

执行程序性细胞死亡的蛋白酶 I CE/CED-3 家族活性的调节

• 批准号: 09780648
• 负责人: 三浦 正幸
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 1998
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09780648/
• 关键词: カスパーゼ; ショウジョウバエ; 細胞死; 線虫; アポトーシス; プロテアーゼ; ICE; Bcl-2; 酵母

CED-4はcaspaseの活性化因子として細胞死の実行に深く関与している。CED-4の機能解析を生化学的・分子遺伝学的に行うことを目的としてショウジョウバエを用いたCED-4の機能評価系を確立した。ショウジョウバエ由来の培養細胞であるS2にCED-4を過剰に発現させることによってcaspaseの活性化を伴う細胞死を誘導することが出来た。CED-4によって活性化されるcaspaseをaffinitylabelによって同定した結果、dr ICEが活性化されていることが明らかになった。免疫沈降実験によって細胞内ではCED-4とdr ICEが複合体を形成することが明らかになり、caspaseとの直接の相互作用がその活性化に必要であることが示唆された。また、CED-4内のP-loop motifがcaspaseの活性化に重要であり、P-loopmutationはdominant negativeにCED-4による細胞死を抑制した。ショウジョウバエ複眼に過剰発現させたCED-4はcaspaseの活性化を伴った細胞死を誘導し、生体でのCED-4の機能を評価する系が確立された。

CED-4 <s:1> caspase <s:1> activating factor と て cell death に is deeply く related to <s:1> て て る る る. CED - 4 の function analytical を biochemistry, molecular line but 伝 learn に う こ と を purpose と し て シ ョ ウ ジ ョ ウ バ エ を with い た CED - 4 の function evaluation を 価 department establish し た. シ ョ ウ ジ ョ ウ バ エ origin の culture cell で あ る S2 に CED - 4 を before turning に 発 now さ せ る こ と に よ っ て caspase の activeness を with う induced cell death を す る こ と が た. CED - 4 に よ っ て activeness さ れ る caspase を affinitylabel に よ っ て with fixed し た results, Dr ICE が activeness さ れ て い る こ と が Ming ら か に な っ た. Immune sink be 験 に よ っ て in cells で は CED - 4 と Dr ICE が complex を form す る こ と が Ming ら か に な り, caspase と の の directly interaction が そ の activeness に necessary で あ る こ と が in stopping さ れ た. Youdaoplaceholder0, <s:1> P-loop motifがcaspase <s:1> activation in CED-4に important であ, p-loop mutation た dominant negativeにCED-4による cell death を inhibition of た た. シ ョ ウ ジ ョ ウ バ エ compound eye に before turning 発 now さ せ た CED - 4 は caspase の activeness を with っ た cell death induced を し, life body で の CED - 4 の function を review 価 す が る department establish さ れ た.

项目成果

Sugimoto,A.: "Apoptosis Regulatory Genes" Kluwer Academic Publisher, in press (1999)

Sugimoto,A.：“细胞凋亡调节基因”Kluwer 学术出版社，印刷中（1999 年）

Tanaka,M.ら: "Insulin-like growth factor-I analog prevents apoptosis mediated through ICE-like protease of cojebellar external granuuar layer neurons : developmental stage-specific mechanisms of neuronal cell death" Neuroscience. (印刷中). (1998)

Tanaka, M. 等人：“胰岛素样生长因子-I 类似物可防止通过 Cojebellar 外部颗粒层神经元的 ICE 样蛋白酶介导的细胞凋亡：神经元细胞死亡的发育阶段特异性机制”（正在出版）。 1998）

Shiraiwa,S.ら: "Bcl-2 prevents TNF- and FAS- induced cell death but not inhibit processing of caspase-3" Biomed. Res. 18. 405-411 (1997)

Shiraiwa, S. 等人：“Bcl-2 防止 TNF 和 FAS 诱导的细胞死亡，但不抑制 caspase-3 的加工”Biomed Res. 18. 405-411 (1997)。

Suzuki,A.: "Res stance to Fas-mefiated apoptosis:activation of caspase-3 is regulated by cell cycle regulator p21 WAF and IAP gene family ILP" Oncogene. 17. 931-939 (1998)

Suzuki,A.：“抵抗 Fas 介导的细胞凋亡：caspase-3 的激活受细胞周期调节因子 p21 WAF 和 IAP 基因家族 ILP 的调节”Oncogene。

Wang,S.ら: "Murine caspase-11, an ICE interacting protease, is essential for activation of ICE" Cell. 92. 501-509 (1998)

Wang, S. 等人：“小鼠 caspase-11 是一种与 ICE 相互作用的蛋白酶，对于 ICE 的激活至关重要”Cell。 92. 501-509 (1998)