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光化学反応を利用した細胞情報入力の時空制御システムの開発

光化学反応を利用した細胞情報入力の時空制御システムの開発
利用光化学反应开发细胞信息输入时空控制系统
批准号：
18651069
负责人：
佐甲 靖志
金额：
$2.24万
依托单位：
The Institute of Physical and Chemical Research
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2006
资助国家：
日本
项目状态：
已结题
起止时间：
2006 至 2007
来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18651069/
关键词：
上皮成長因子神経成長因子ケージド化合物可視化計測細胞内カルシウム反応

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EGF(NGF)-Ras-MAPKシステムを主要な応用例として、ケージド情報伝達分子を合成し、光化学反応による情報入力制御法を開発することを目標とする。光で活性制御可能な情報伝達分子の合成、ケージド情報伝達分子をガラス基盤に結合する方法の開発、デジタルミラーデバイス(DMD)を応用した照射光学系の作成が開発要素である。昨年度に引き続きケージド情報伝達分子の開発を行った。ケージド分子の生理活性を評価する方法を種々検討し、GFP-ERK2を安定に発現したPC12細胞において、EGFもしくはNGFによって起こるGFP-ERK2の細胞質から核への局在変化を観察し、細胞の応答率をもって活性を評価する方法が最も安定であることが分かった。この方法で、ケージドEGFの粗製品を評価したところ、非ケージドEGFに比べて1/30〜1/100に活性が低下していることが分かった。また、UV照射によるケージド解除で、元の1/10〜1/3まで活性が回復した。ケージド化による不活性化、UVによるケージド解除とも実用化にはまだ不十分である。そこで化合物の精製と光解除反応の評価のため、逆相クロマトグラフィーを用いて、反応物を分析・精製する方法を確立した。今後、精製された各分画の生理活性評価と、光解除条件の検討を行う。NGFに関してもケージド化を進めている。照射光学系の設計を行い、DMDデバイスとPCのインタフェースを作成して動作確認を行った。今後、照射系を既設の落射蛍光顕微鏡に組み込む。
期刊论文(10)
专著(0)
科研奖励(0)
会议论文
細胞内蛍光1分子可視化法(基礎編)
细胞内荧光单分子可视化方法（基础版）
DOI： --
发表时间： 2006
期刊： バイオニクス 3-6
影响因子： --
作者： [日比野佳代, 佐甲靖志, 佐甲靖志]
通讯作者： 佐甲靖志
Single‐molecule analysis of epidermal growth factor binding on the surface of living cells
DOI： 10.1038/sj.emboj.7601308
发表时间： 2006-09
期刊： The EMBO Journal
影响因子： --
作者： [Y. Teramura;J. Ichinose;H. Takagi;K. Nishida;T. Yanagida;Y. Sako]
通讯作者： Y. Teramura;J. Ichinose;H. Takagi;K. Nishida;T. Yanagida;Y. Sako
情報伝達蛋白質Ras, Rafl相互作用のダイナミクスとキネティクス
信号蛋白 Ras 和 Rafl 之间相互作用的动力学和动力学
DOI： --
发表时间： 2006
期刊： 物性研究 86
影响因子： --
作者： [日比野佳代, 佐甲靖志]
通讯作者： 佐甲靖志
Rho small GTPase regulates the stability of individual focal adhesions: a FRET-based visualization of GDP/GTP exchange on small GTPases
Rho 小 GTP 酶调节个体粘着斑的稳定性：基于 FRET 的小 GTP 酶上 GDP/GTP 交换的可视化
DOI： --
发表时间： 2007
期刊： Biophysics 3
影响因子： --
作者： [Miyauchi, T.]
通讯作者： T.
共 10 条
    １分子動態に基づく細胞膜受容体の機能予測
    Comprehensive approach toward understanding cell surface receptor functions coupled with membrane structure and lipid composition
    膜構造・膜脂質ダイナミクスと共起する細胞膜受容体の情報伝達
    細胞内情報伝達の再構成系における非線形反応の解析
    海外基金