光化学反応を利用した細胞情報入力の時空制御システムの開発

利用光化学反应开发细胞信息输入时空控制系统

• 批准号: 18651069
• 负责人: 佐甲 靖志
• 金额: $ 2.24万
• 依托单位: The Institute of Physical and Chemical Research
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18651069/
• 关键词: 上皮成長因子; 神経成長因子; ケージド化合物; 可視化計測; 細胞内カルシウム反応

EGF(NGF)-Ras-MAPKシステムを主要な応用例として、ケージド情報伝達分子を合成し、光化学反応による情報入力制御法を開発することを目標とする。光で活性制御可能な情報伝達分子の合成、ケージド情報伝達分子をガラス基盤に結合する方法の開発、デジタルミラーデバイス(DMD)を応用した照射光学系の作成が開発要素である。昨年度に引き続きケージド情報伝達分子の開発を行った。ケージド分子の生理活性を評価する方法を種々検討し、GFP-ERK2を安定に発現したPC12細胞において、EGFもしくはNGFによって起こるGFP-ERK2の細胞質から核への局在変化を観察し、細胞の応答率をもって活性を評価する方法が最も安定であることが分かった。この方法で、ケージドEGFの粗製品を評価したところ、非ケージドEGFに比べて1/30〜1/100に活性が低下していることが分かった。また、UV照射によるケージド解除で、元の1/10〜1/3まで活性が回復した。ケージド化による不活性化、UVによるケージド解除とも実用化にはまだ不十分である。そこで化合物の精製と光解除反応の評価のため、逆相クロマトグラフィーを用いて、反応物を分析・精製する方法を確立した。今後、精製された各分画の生理活性評価と、光解除条件の検討を行う。NGFに関してもケージド化を進めている。照射光学系の設計を行い、DMDデバイスとPCのインタフェースを作成して動作確認を行った。今後、照射系を既設の落射蛍光顕微鏡に組み込む。

EGF (NGF)-the main applications of the Ras-MAPK system are the molecular synthesis, the photochemical reaction and the application of the chemical reaction system. The optical activity control system may be effective in molecular synthesis, chemical reaction, chemical synthesis, chemical reaction, chemical synthesis, chemical reaction, optical activity control, optical activity control, optical active control, optical activity control, molecular synthesis, chemical reaction, optical activity control, molecular synthesis, chemical reaction, molecular synthesis, chemical synthesis, molecular synthesis, chemical synthesis, molecular synthesis, chemical reaction, molecular synthesis, molecular synthesis, chemical reaction, molecular synthesis, molecular synthesis, chemical reaction, molecular synthesis, molecular synthesis, chemical reaction, molecular synthesis, optical activity control, optical activity control, molecular synthesis, chemical reaction, optical synthesis, optical activity control, optical active control, optical activity control, molecular synthesis, chemical reaction, In the last year, some well-informed people were invited to open a bank meeting. Molecular physiological activity assay, GFP-ERK2 diazepam assay, PC12 cell assay, EGF assay, NGF assay, cell assay, cell response rate, cell response rate, cell response rate The activity of the method, EGF and non-EGF is lower than that of the first one, the third and the second. After exposure to UV, the radiation was released, and the activity was returned to the target of 10-10-10-1-peg-3. Inactivation, UVs, inactivation, in The chemical compound was used to remove the reaction, and the reverse phase was used to determine the accuracy of the analytical method. From now on, the essence will be divided into two parts: physiological activity and light release conditions. NGF is required to improve the performance of the company. Irradiate the optical department design line, DMD equipment, PC equipment, and make a confirmation action to confirm the line performance. In the future, the radiation system is set up to measure the structure of the light micrometer.

项目成果

細胞内蛍光1分子可視化法(基礎編)

细胞内荧光单分子可视化方法（基础版）

• 发表时间: 2006
• 期刊: バイオニクス 3-6
• 作者: 日比野佳代;佐甲靖志;佐甲靖志
• 通讯作者: 佐甲靖志

Single‐molecule analysis of epidermal growth factor binding on the surface of living cells

• DOI: 10.1038/sj.emboj.7601308
• 发表时间: 2006-09
• 期刊: The EMBO Journal
• 作者: Y. Teramura;J. Ichinose;H. Takagi;K. Nishida;T. Yanagida;Y. Sako

情報伝達蛋白質Ras, Rafl相互作用のダイナミクスとキネティクス

信号蛋白 Ras 和 Rafl 之间相互作用的动力学和动力学

• 发表时间: 2006
• 期刊: 物性研究 86
• 作者: 日比野佳代;佐甲靖志
• 通讯作者: 佐甲靖志

Rho small GTPase regulates the stability of individual focal adhesions: a FRET-based visualization of GDP/GTP exchange on small GTPases

Rho 小 GTP 酶调节个体粘着斑的稳定性：基于 FRET 的小 GTP 酶上 GDP/GTP 交换的可视化

• 发表时间: 2007
• 期刊: Biophysics 3
• 作者: Miyauchi;T.
• 通讯作者: T.

Imaging single molecules for systems biology.

用于系统生物学的单分子成像。

• 发表时间: 2006
• 期刊: Mol. Syst. Biol. doi:10.1038/msb4100100
• 作者: Sako;Y.
• 通讯作者: Y.