GATA転写因子群をコードする遺伝子の構造と発現調節機序の解析

GATA转录因子编码基因的结构及表达调控机制分析

• 批准号: 05273201
• 负责人: 山本 雅之
• 金额: $ 1.6万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-05273201/
• 关键词: GATA転写因子; 転写制御; 遺伝子; 細胞分化

本研究の目的は、動物各組織・細胞におけるGATA転写因子群の発現の様子を検討して、GATA転写因子の機能を理解すること、また、GATA因子の遺伝子構造を検討し、その発現に対して行なわれている調節機序を解明することにある。この目的を達成するために、本研究では1)GATA-1因子の血球系および精巣における分化段階特異的な発現の解析、及び2)各種のGATA因子をコードする遺伝子のクローン化と構造解析を実施した。前者に関して、数種のGATA因子に対する単クローン性抗体を作成することに成功したので、これらの抗体を用いて種々の発達段階の血球系および精巣細胞におけるGATA因子発現の様子を検討した。マウスGATA-1因子に特異的なN6抗体を用いて実施した免疫組織染色では、マウス脾臓および骨髄で赤芽球と思われる細胞の他に、特に巨核球核が陽性に染色されていた。また、GATA-1は精巣のセルトリ細胞に、精巣の発達時期および精子成熟サイクルに特有のパターンを示して発現していることを見出した。一方、GATA-2は巨核球、肥満細胞に加えて、未分化血液前駆細胞に発現していた。後者について、マウス遺伝子ライブラリーより精巣型および赤血球型プロモーターを含むGATA-1遺伝子クローンを得て、それらの詳細な構造解析を実施した。その結果、すでに赤血球型プロモーターの上流に機能的に重要なGATA配列の存在が報告されているが、精巣型プロモーターにもGATA配列が存在していることが明らかになった。そこで、その機能を詳細に解析する目的で、セルトリ細胞の一次培養系調製法を確立した。GATA-2やGATA-3遺伝子の構造を詳細に決定したところ、これらGATA群をコードする遺伝子の構成は各因子間で、また、種を越えてたいへんよく保存されていることを見出した。これらの研究を通して、GATA転写因子群が細胞・組織特異的な転写調節に機能していること、また、その発現が巧妙に調節されている様子がさらに明らかになった。

The purpose of this study is to investigate the expression of GATA gene in animal tissues and cells, to understand the function of GATA gene, to investigate the gene structure of GATA gene, and to elucidate the regulatory mechanism of GATA gene expression. To achieve this goal, this study included 1) analysis of the stage-specific expression of GATA-1 in the lineage and sperm, and 2) analysis of the structural changes in the expression of GATA-1 in the lineage and sperm. The former is related to the successful production of antibodies against several GATA factors, and the sub-studies of GATA factor production in blood cell lines and sperm cells using these antibodies. GATA-1 factor specific N6 antibody was used in the immunostaining of the cells, especially megakaryocytes. GATA-1 sperm cells, sperm development period and sperm maturation period are shown. One side, GATA-2 megakaryocyte, fat cell, undifferentiated blood precursor cell The latter includes the GATA-1 gene and the detailed structural analysis. As a result, the presence of GATA alignment is important for the up-stream function of erythroid type, and the presence of GATA alignment is important for fine type. To establish a method for the preparation of primary cell culture systems, the functions of these systems were analyzed in detail. The structure of GATA-2 and GATA-3 genes is determined in detail. This study reveals that the GATA gene family is a cell and tissue-specific gene that regulates the expression of genes.

项目成果

Komatsu,N.,et al.: "Establishmeut and duaracterigation of an erythropoietin-dependeut subline,UT-7/Epo derived from human leukemia cell line,UT-7." Blood. 82. 456-465 (1993)

Komatsu,N.,et al.：“建立源自人白血病细胞系 UT-7 的促红细胞生成素依赖性亚系 UT-7/Epo 的建立和双乙酰化。”

Yatsunami,K.,et al.: "Structure of the L-histidine decarboxylase gene." Journal of Biological Chemistry. 269. 1554-1559 (1994)

Yatsunami,K.,et al.：“L-组氨酸脱羧酶基因的结构。”

Yomogida,K.,et al.: "Deuelopmeutal Stage-and spermatogeuic cycle-dependeut expression of GATA-1 in mouse Sertoli cells." Deuelopment. in press.

Yomogida,K.,et al.：“小鼠支持细胞中 GATA-1 的 Deuelopmeutal 阶段和精原周期依赖性表达。”

Igarashi,K.,et al.,: "Regulation of tramscription by dimerigation of erythroid factor NF-E2p45 with small Maf paoteins." Nature. 367. 568-572 (1994)

Igarashi,K.,et al.：“通过红系因子 NF-E2p45 与小 Maf paoteins 的二聚作用来调节转录。”

Lim,K.-C.,et al.: "Structure and tissue-specific regulation of the chicken erythroid S-aminolevulinate syuthase gene." Nucleic Acids Research. (in press).

Lim,K.-C.,et al.：“鸡红系 S-氨基乙酰丙酸合成酶基因的结构和组织特异性调节。”