転写因子の発現量依存的な細胞運命決定機構の解明

阐明依赖于转录因子表达水平的细胞命运决定机制

• 批准号: 18659082
• 负责人: 山本 雅之
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: Tohoku University (2007)University of Tsukuba (2006)
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18659082/
• 关键词: 発生・分化; 転写因子; 遺伝子発現; 血液学

申請者らは,GATA-1と構造的に高い相同性を有する転写因子であるGATA-2が,GATA-1との機能的相補性を有することを鑑み,GATA-1とGATA-2の機能分担、ネットワーク制御、さらに、それらの合計発現量が血球細胞の運命決定に与える影響を解析する必要があると考える。そこで、これら両者の発現量を個体レベルで明らかにするために、申請書らが既に樹立した、Gata1遺伝子発現制御領域下で赤色蛍光蛋白質(dsRed2)を発現するトランスジェニックマウスとGata2遺伝子座に相同組換え法で緑色蛍光蛋白質(GFP)をノックインしたマウス、及びそれらを交配した複合改変マウスを用いて、以下の解析をおこなった。これらのマウスの造血細胞における蛍光蛋白質発現を、フローサイトメーター(FACS)を用いて定量的かつ定性的に測定し、FACSにより分取した後に、コロニー法などでin vitro分化誘導することにより、その分化能を調べた。また、GATA-1とGATA-2を共発現する細胞の同定と解析を行い、細胞の増殖・分化・アポトーシスにおける2つのGATA因子の発現量を単一細胞レベルで明らかにすることを試みた。さらに、既に樹立されているGata1およびGata2遺伝子の部分破壊マウスや条件付き遺伝子破壊マウス、及びそれらを交配した複合改変マウスをの血液細胞の解析を行い、2つの転写因子の発現量変化が細胞運命に与える影響を調べた。また、レトロウイルス遺伝子導入系を用いて、GATA-1とGATA-2を高中低の様々な発現量で未分化前駆細胞に導入することにより、細胞運命決定に与える影響を検討した。これらの結果、GATA-1、GATA-2の発現量がその機能に大きく影響することが示唆された。

The applicant considers it necessary to analyze the contribution of GATA-1 and GATA-2 in terms of structural identity, functional complementarity, and the contribution of GATA-1 and GATA-2 in terms of functional sharing, biological control, and total production to the fate of blood cells. The expression of red fluorescent protein (dsRed2) in the Gata1 gene expression control domain was analyzed in the following ways: The expression of protein in hematopoietic cells was measured quantitatively and qualitatively by FACS. The expression of protein in hematopoietic cells was modulated by FACS. The expression of GATA-1 and GATA-2 in a single cell is determined by the expression of GATA-1 and GATA-2 in a single cell, the expression of GATA-1 and GATA-2 in a single cell. In this paper, we establish the condition of Gata1 and Gata2 genes, and modify the expression of Gata1 and Gata 2 genes in blood cells. To investigate the effects of gene expression on cell fate determination in undifferentiated pre-mature cells, the expression of GATA-1 and GATA-2 in vitro was studied. The results show that GATA-1 and GATA-2 have a large impact on their functions.

项目成果

In vivo promoter analysis on refeeding response of hepatic sterol regulatory element-binding protein-lc expression.

肝甾醇调节元件结合蛋白-lc表达的再喂养反应的体内启动子分析。

• 发表时间: 2007
• 期刊: Biochem Biophys Res Commun. 363
• 作者: Takeuchi Y;Yahagi N;Nakagawa Y;Matsuzaka T;Shimizu R;Sekiya M;Iizuka Y. Ohashi K;Gotoda T;Yamamoto M;Nagai R;Kadowaki T;Yamada N;Osuga JI. and Shimano H.
• 通讯作者: Osuga JI. and Shimano H.

The environmental response to food and oxygen.

环境对食物和氧气的反应。

• 发表时间: 2007
• 作者: M. Fujita;T. Nishioka;T. Takayanagi;Noda M;高橋成実;Masayuki Yamamoto.
• 通讯作者: Masayuki Yamamoto.

Two-site substrate recognition model for the Keapl-Nrf2 system: a hinge and latch mechanism.

Keapl-Nrf2 系统的两点基板识别模型：铰链和闩锁机构。

• 发表时间: 2007
• 作者: Tong KI.;Yamamoto M;山本雅之;山本雅之;Masayuki Yamamoto.;山本雅之;Masayuki Yamamoto.
• 通讯作者: Masayuki Yamamoto.

Genetic Analysis of Mouse GATA-related Leukemia and Leukemic Stem Cells.

小鼠 GATA 相关白血病和白血病干细胞的遗传分析。

• 发表时间: 2007
• 作者: Tong KI.;Yamamoto M;山本雅之;山本雅之;Masayuki Yamamoto.;山本雅之;Masayuki Yamamoto.;Masayuki Yamamoto.;Masayuki Yamamoto.;山本雅之;山本雅之;Masayuki Yamamoto.
• 通讯作者: Masayuki Yamamoto.

Regulation of adipocyte differentiation of bone marrow stromal cells by transcription factor GATA-2.

• DOI: 10.1016/j.bbrc.2007.10.031
• 发表时间: 2007-12
• 期刊: Biochemical and biophysical research communications
• 影响因子: 3.1
• 作者: Y. Okitsu;Shinichirou Takahashi;N. Minegishi;J. Kameoka;M. Kaku;Masayuki Yamamoto;Takeshi Sasaki;H. Harigae