転写因子の核―細胞質間移行と生体防御機構

转录因子的核质转移和生物防御机制

• 批准号: 11237208
• 负责人: 藤田 尚志
• 金额: $ 37.95万
• 依托单位: Tokyo Metropolitan Organization for Medical Research
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-11237208/
• 关键词: 遺伝子; ウイルス; シグナル伝達; 発現制御; 免疫; 核移行; コアクティベーター; 燐酸化; インターフェロン; リン酸化; ウイルス感染; IRF-3; CBP; p300; アセチル化

ウイルス感染が起きた細胞内では、はじめにIFN遺伝子を含む種々の遺伝子の発現が誘導され、抗ウイルス作用などの生体防御機構が働くことになる。我々はこの一連の活性化機構のうちIRF-3が最初に活性化される転写因子である事を明らかにしてきた。これまでにIRF-3の活性化は新たな蛋白質合成を必要とせず、既存の分子の燐酸化等による修飾、分子の会合を介していることを明らかにした。すなわちIRF-3の特異的な燐酸化の結果2量体が形成され、そこにコアクティベーターであるp300/CBPが複合体に加わり活性化型のホロ複合体になる。北大、稲垣教授のグループと共同でIRF-3の転写制御ドメインに相当する部分(175C)の構造決定を行った。解かれた構造より、IRF-3はSmadと立体構造的において類似していることが明らかとなった。SmadはTGF-βによるシグナルの下流で活性化される転写因子であり、これまで上流のシグナル並びに下流の標的遺伝子において、インターフェロン系との関連は全く考えられていなかった。両者は一次構造上の類似性が低いものの、重要と考えられるアミノ酸残基の保存が見い出されることから、共通の祖先から進化した遺伝子と考えられた。結晶状態では175Cは2量体に類似した配向を取っていた。そこでは一方のIRF-3の分子の一部が他方の分子のポケット状の部分と相互作用して2量体の構造を支持しているものと考えられた。挿入されている部分はこれまで我々が提唱してきた燐酸化部位をふくむループであり、実際に燐酸化により静電的な相互作用が増加するものと考えられた。われわれは本年度、新たな燐酸化特異的抗体を用いて、セリン386が生理的な活性化状態において重要である事を明らかにしたが、この事実と解明した2量体構造が良く一致した。ポケット構造に変異を導入したところ、セリン386の燐酸化に関わらず2量体形成が著しく阻害され、燐酸化による2量体形成のモデルが検証された。従って、これまでHiscottらにより提唱されていた阻害ドメインによるモデルは正しくないこと、IRF-3は構造上Smadと類似しているのみではなく、燐酸化残基とそれを受容するポケットによって、多量体形成を行うという機能的類似性も明らかとなった。

ウ イ ル ス infection since が き た intracellular で は, は じ め に traces of IFN 伝 son を む 々 species. の heritage 伝 son の 発 now が induced さ れ, resisting ウ イ ル ス role な ど の raw body defense agency が 働 く こ と に な る. I 々 は こ の の activeness institutions in a row の う ち IRF - 3 が initially に activeness さ れ る planning write factor で あ る matter を Ming ら か に し て き た. こ れ ま で に IRF - 3 の activeness は new た な protein synthesis を necessary と せ ず, existing の molecular の 燐 acidification and に よ る meet modification, molecular の を interface し て い る こ と を Ming ら か に し た. す な わ ち IRF - 3 の specific な 燐 acidification の が results 2 quantity body formation さ れ, そ こ に コ ア ク テ ィ ベ ー タ ー で あ る p300 / CBP が complex に plus わ り activation type の ホ ロ complex に な る. Professor Peking and 稲 walls の グ ル ー プ と で IRF together - 3 の planning write suppression ド メ イ ン に quite す る part (175 c) の tectonic line decision を っ た. Solution か れ た tectonic よ り, IRF - 3 は Smad と three-dimensional structure of に お い て similar し て い る こ と が Ming ら か と な っ た. Smad は TGF - beta に よ る シ グ ナ ル の obscene で activeness さ れ る planning write factor で あ り, こ れ ま で upper の シ グ ナ ル and び に obscene の mark heritage 伝 son に お い て, イ ン タ ー フ ェ ロ ン department と の masato even は く all exam え ら れ て い な か っ た. Struck the は の on a structural similarity が low い も の の, important と exam え ら れ る ア ミ ノ acid residues の kept が see い さ れ る こ と か ら, common ancestors の か ら evolution し た heritage 伝 son と exam え ら れ た. The crystalline state で で 175C <e:1> 2 volume に is similar to <s:1> た coordination を, taking って た た た. の IRF そ こ で は party - 3 の の a が fang の molecules の ポ ケ ッ ト shape part の と interaction し て 2 quantity body の を support し て い る も の と exam え ら れ た. Scions into さ れ て い る part は こ れ ま で I 々 が mention sing し て き た 燐 acidification parts を ふ く む ル ー プ で あ り, be interstate に 燐 acidification に よ り electrostatic interaction な が raised and す る も の と exam え ら れ た. わ れ わ れ は this year, the new た な 燐 を acidification specific antibody with い て, セ リ ン 386 が physiological state of な activeness に お い て important で あ る matter を Ming ら か に し た が, こ の things be と interpret し た 2 quantity body structure consistent good が く し た. ポ ケ ッ ト tectonic に - different を import し た と こ ろ, セ リ ン 386 の 燐 acidification に masato わ ら ず 2 quantity body formation が し く resistance against さ れ, 燐 acidification に よ る 2 quantity body form の モ デ ル が 検 card さ れ た. 従 っ て, こ れ ま で Hiscott ら に よ り mention sing さ れ て い た resistance against ド メ イ ン に よ る モ デ ル は is し く な い こ と, IRF - 3 は structure on Smad と similar し て い る の み で は な く, 燐 acidification residues と そ れ を by let す る ポ ケ ッ ト に よ っ て line, more quantity body formation を う と い う functional similarity も Ming ら か と な っ Youdaoplaceholder0.

项目成果

Iwamura,T. et al.: "Induction of IRF-3/-7 Kinase and NF-κB in Response to Double-stranded RNA and Virus infection"Genes to Cells. 6(印刷中). (2001)

Iwamura, T. 等人：“IRF-3/-7 激酶和 NF-κB 响应双链 RNA 和病毒感染的诱导”Genes to Cells 6（印刷中）。

Iwamura, T. et al.: "PACT, a Double-Stranded RNA Binding Protein Acts as a Positive Regulator for Type I Interferon Gene Induced by Newcastle Disease Virus"Biochemical and Biophysical research Communications. 282. 515-523 (2001)

Iwamura, T. 等人：“PACT，一种双链 RNA 结合蛋白，作为新城疫病毒诱导的 I 型干扰素基因的正向调节剂”生物化学和生物物理研究通讯。

藤田尚志(掘越正美編): "遺伝子発現「ジーンセレクターから生命現象へ」"中外医学社. 521 (2001)

Naoshi Fujita（堀越正美编辑）：“基因表达‘从基因选择器到生命现象’”Chugai Igakusha 521 (2001)。

Suzuki, H.et al.: "Homodimer of two F-box proteins βTrCP1 or βTrCP2…………"J. Biol. Chem.. 275. 2877-2884 (2000)

Suzuki, H. 等人：“两种 F-box 蛋白 βTrCP1 或 βTrCP2 的同二聚体......” J. Biol. 275. 2877-2884 (2000)

Suhara,W. et al.: "Analyses of Virus-Induced Homomeric and Heteromeric Protein Associations between IRF-3 and Coactivator CBP/p300"J.Biochem.. 128. 301-307 (2000)

苏原，W.