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蛋白質の活性に着目した、新しい網羅的遺伝子解析の試み

蛋白質の活性に着目した、新しい網羅的遺伝子解析の試み
聚焦蛋白质活性的综合遗传分析新尝试
批准号：
15013240
负责人：
水島 徹
金额：
$3.52万
依托单位：
Okayama University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2003
资助国家：
日本
项目状态：
已结题
起止时间：
2003 至 --
来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15013240/
关键词：
DNA複製ORCDnaA活性DNAチップゲノム

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项目成果

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本年度我々は、それぞれの活性を介して発現が変化する遺伝子の解析に必要な、ATP結合、重合、膜リン脂質結合、ATPase活性部位に変異を持つ、温度感受性dnaA変異株の作成を行った。具体的には、我々が同定したそれぞれの活性の機能ドメインにランダムに変異を導入し、温度感受性変異株を単離した。その後、その変異位置を同定するとともに、変異DnaAを精製し、目的の活性だけが特異的に欠損していることを確認した。このように作成した温度感受性dnaA変異株の内、重合活性に関する変異株とDNAチップ技術を用いて、変異により発現が変化する遺伝子の同定を行った。数多くの遺伝子が同定されたが、特にDnaKなど分子シャペロン関連の遺伝子が多かった。我々は、DnaAの重合に分子シャペロンが関与しているのではないかと考えている。一方我々はGST Pull-downアッセイを用いた方法で、DnaAの重合活性依存にDnaAに結合する蛋白質を検索した。既に知られているDnaA、DnaBなどの蛋白質に加え、興味深いことにやはり分子シャペロンが同定された。一方我々は酵母の複製開始因子ORCに関してもこれまで、DnaAとの共通性という独自の観点から生化学的に研究してきた。その結果ORCもDnaA同様、ATP結合、ATPase、膜結合、重合など、様々な生化学的活性を持つ蛋白質であることが分かってきた。さらに本年度我々は、ORCもDnaA同様、ADPと高い親和性で結合し、ADP結合型ORCは不活性であることを発見した。そこでORCに関してもDnaAと同様の方法で、それぞれの活性を介した遺伝子ネットワークを明らかにすることが重要であると考えられる。
期刊论文(12)
专著(0)
科研奖励(0)
会议论文
Tsutsumi, S.: "Molecular mechanism of adaptive cytoprotection induced by ethanol in human gastric cells."Exp.Biol.Med.. 228. 1089-1095 (2003)
Tsutsumi, S.：“人胃细胞中乙醇诱导的适应性细胞保护的分子机制。”Exp.Biol.Med.. 228. 1089-1095 (2003)
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
Takahashi, N: "Analysis on Origin Recognition Complex containing Orc5p with defective Walker A motif."J.Biol.Chem.. (In press).
Takahashi, N：“对含有具有缺陷 Walker A 基序的 Orc5p 的起源识别复合体的分析。”J.Biol.Chem..（正在出版）。
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
Makise, M.: "Kinetics of ATP-binding to Origin Recognition Complex of Saccharomyces cerevisiae."J.Biol.Chem.. 278. 46440-46445 (2003)
Makise, M.：“ATP 与酿酒酵母起源识别复合物结合的动力学。”J.Biol.Chem.. 278. 46440-46445 (2003)
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
Mizushima, T.: "Protection of gastric mucosal cells from apoptosis and necrosis by induction of HSP and PGE_2"Jpn.J.Hyperthermic Oncol.. 19. 67-78 (2003)
Mizushima，T.：“通过诱导HSP和PGE_2保护胃粘膜细胞免受凋亡和坏死”Jpn.J.Hyperthermic Oncol.. 19. 67-78 (2003)
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
共 6 条
    既承認薬に着目した、アルツハイマー病治療薬のターゲットの発見
    • 批准号：
      15K14954
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
    • 资助金额：
      $2.33万
    • 财政年份：
      2015
    • 负责人：
      水島 徹
    • 依托单位：
      Keio University
    COPD治療に有効な抗炎症薬開発のための基盤研究
    • 批准号：
      15H04647
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
    • 资助金额：
      $3.91万
    • 财政年份：
      2015
    • 负责人：
      水島 徹
    • 依托单位：
      Keio University
    NSAIDsの輸送タンパク質TETRANの生理的機能と病態における役割
    • 批准号：
      20056025
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
    • 资助金额：
      $3.2万
    • 财政年份：
      2008
    • 负责人：
      水島 徹
    • 依托单位：
      Kumamoto University
    NSAIDsの抗癌作用機構の解明とDDSを用いた創薬
    • 批准号：
      20015037
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
    • 资助金额：
      $7.04万
    • 财政年份：
      2008
    • 负责人：
      水島 徹
    • 依托单位：
      Kumamoto University
    国内基金
    海外基金
    NFYA介导的内皮细胞ORC6表达上调促进视网膜血管新生
    YTHDC1通过剪接因子ROD1调控pre-ORC5剪接产物生成影响胃癌恶性进展的机制研究
    METTL8调控ORC1的m6A甲基化修饰信号轴在非小细胞肺癌恶性进展的机制研究
    • 批准号：
      2023JJ50146
    • 项目类别：
      省市级项目
    • 资助金额：
      --
    • 批准年份：
      2023
    • 负责人：
      汤敏
    • 依托单位：
      南华大学附属第二医院
    METTL3-ORC6-CDC45轴介导的前列腺癌干性增强及恩杂鲁胺耐药的机制研究
    • 批准号：
      --
    • 项目类别：
      面上项目
    • 资助金额：
      52万元
    • 批准年份：
      2022
    • 负责人：
      陈露
    • 依托单位：
      上海交通大学