神経芽細胞腫における癌抑制遺伝子へのアプローチ-悪性度との関連から-

探讨神经母细胞瘤中的抑癌基因 - 从与恶性肿瘤的关系 -

• 批准号: 05857196
• 负责人: 桧山 英三
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Hiroshima University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05857196/
• 关键词: 神経芽細胞腫; 癌抑制遺伝子; 悪性度

1985年以降当科(一部他院)で手術にて摘出後,冷凍保存した神経芽細胞腫の76腫瘍を用いて以下の検討を行った。1.DNA解析:腫瘍DNA及び患児の正常組織DNAをサザンブロット法で1番染色体単腕にあるL-myc遺伝子のRFLPを検索したところ11腫瘍でLOHを認め、PCR法での1p32、1p36にあるrepetitive sequenceの検索では14,36腫瘍にLOHを見い出した。L-mycのLOH症例は全例1p32のLOHを認めた。1p32LOH症例14例中は10例がN-myc増幅、12例がdiploid、11例がHa-ras p21の非発現、9例がテロメア長異常で13例が予後不良であった。2.FISH法による解析:FISH法によ染色体1p13にあるbeta-NGFをプローブとしてFISHを行い,1番染色体の欠失を検討したが欠失は5例のみでDNAploidyとの関係はなかった。3.RNA解析:23腫瘍のRNAからcDNAを作製し,p53遺伝子についてexon5〜8をPCR-DGGE法で検索したが,異常バンドが検出されなかった。また、76腫瘍のDNAをEcoRIで消化後、サザンブロット法でRb cDNAとハイブリしたところ、2例に異常バンドを認めたが、悪性度、予後等との関連はなかった。以上から、神経芽細胞腫では、癌抑制遺伝子であるp53やRbの関与はほとんどないが、L-myc遺伝子のあるlp32領域のLOHが予後と相関しており、この領域に悪性度と関連した癌抑制遺伝子の存在が示唆され、今後この領域の詳細な検討を行う予定である。

After being picked up by the Department of Medicine (a department of other hospitals) in 1985, the sprouts were kept in cold storage and used in the following fields. 1.DNA analysis: the DNA and the normal tissue of the disease were detected by the method of chromosome DNA, L-myc, RFLP, LOH, PCR, 1p36, repetitive sequence, 14, 36, and LOH. L-myc "LOH's disease" all cases 1p32 "LOH" syndrome. Of the 14 cases of 1p32LOH, there were 10 cases of N-myc, 12 cases of diploid, 11 cases of non-detectable Ha-ras p21, 9 cases of long-term dysphagia and 13 cases of post-operative dysphagia. 2.FISH analysis: 5 cases of chromosomal 1p13 deficiency were detected by FISH method, and 5 cases of chromosomal deficiency by FISH method. 3.RNA analysis: 23 times of RNA, the number of cDNA, the son of p53, the method of exon5~8, the method of PCR-DGGE, the number of samples, and the number of samples. After being digested by DNA, 76 and Rb cDNA, the symptoms were detected in 2 patients, 2 of them were normal, and the degree of sex and prognosis were similar. The above cancer suppressor, cancer suppressor cell, cancer suppressor, p53 Rb, cancer suppressor, cancer suppressor, cancer suppressor,