权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

神経細胞におけるCDK5活性化サブユニットp35の選択的分解機構の解析

神经元CDK5激活亚基p35选择性降解机制分析

基本信息

批准号：
11144235
负责人：
久永眞市
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Tokyo Metropolitan University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
财政年份：
1999
资助国家：
日本
起止时间：
1999 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11144235/
关键词：
CDK5 サイクリン p35 カルパインプロテアソーム神経細胞細胞死

项目摘要

CDK5は神経細胞で発現する特異なサイクリン依存性キナーゼである。増殖細胞におけるCDK_Sの活性は活性化サブユニットサイクリンの合成・分解によって制御されている。CDK5も活性化サブユニットであるp35との結合により活性化されるが、その分解機構については全く判っていない。我々はラット脳初代培養神経細胞を用いて、p35がターンオーバーの早い蛋白であり、その分解はプロテアソームによること、分解とともにCDK5活性も減少することを明らかにした。さらに、in vitroの分解系を作成し、p35のリン酸化が分解の引き金になっていることを示した。また、CDK5の精製過程でp35はp25へと限定分解されることが判っていたが、この分解に関わるプロテアーゼも未同定であった。ラット脳抽出液にCa^<2+>を加えると、p35からp25への限定分解が起こり、その分解はカルパイン阻害剤により制御された。培養神経細胞でも同様の結果が得られ、また、精製カルパインによりp35がp25で分解されることなどから、p35の限定分解にはカルパインが関与することが示された。P35と結合したCDK5は細胞骨格または膜分画と結合していたが、p25への限定分解で可溶性分画に遊離されてきた。この限定分解は神経細胞死誘導時に観察された。神経細胞死が誘導された時に見られる限定分解はCDK5の細胞内局在を変化させ、神経細胞の生存に好ましくない蛋白をリン酸化し、細胞死を促進させるのではないかと考えられた。

CDK5 is specific to neuronal development. The activity of CDK_S in cultured cells is activated, and the synthesis and decomposition of CDK_S in cultured cells are controlled. CDK5 is activated by p35 and activated by p35 and decomposed by p35. We found that the activity of CDK5 in primary cultured neurons was decreased due to the presence of p35 and protein. In addition, the decomposition system of p35 and p35 is prepared. CDK5 purification process p35, p25, p25 Ca^<2+> is added to the extract, p35 is added to p25, and the decomposition is limited. The results of culture of neurons show that the p35 and p25 are related to each other. CDK5 binds to the cellular membrane, binds to the cellular membrane, and dissociates from the cellular membrane in a limited manner. This limited decomposition was observed during induction of neuronal death. Cell death is induced when CDK5 cells are disrupted, and cell death is promoted when CDK5 cells are disrupted.