レチノイドによる血管内皮前駆細胞の血管形成制御機構の解明

阐明类维生素A控制血管内皮祖细胞血管生成的机制

• 批准号: 14770345
• 负责人: 鈴木 康弘
• 金额: $ 2.43万
• 依托单位: The Institute of Physical and Chemical Research
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-14770345/
• 关键词: 血管形成; レチノイド; 血管内皮前駆細胞; 漿尿膜; Flk-1; 血管リモデリング; angiopoietin; 遺伝子発現; 奬尿膜; 平滑筋型α-アクチン

1.レチノイド刺激したニワトリ胚漿尿膜におけるangiopoietin-2遺伝子発現変化:マイクロダイセクション法によって、漿尿膜の微少血管層からRNAを回収し、RT-PCR及び定量PCRを行った。その結果、未刺激の微少血管層と比較すると、レチノイド処理した微少血管層では、angiopoietin-2の遺伝子発現が促進することがわかった。対照的に、レチノイドアンタゴニストを処理することによって、内在性のレチノイドの作用をブロックした微少血管層では、angiopoietin-2遺伝子の発現が抑制された。2.レチノイドの血管形成抑制効果におけるangiopoietinの関与:レチノイドの血管形成抑制効果は、微少血管のネットワーク形成(特に血管の分岐)の抑制が特徴的である。この抑制効果は、レチノイドとangiopoietin-1の同時添加により緩和されることがわかった。また、angiopoietin-2を処理することによって、レチノイドの血管形成抑制効果が擬似されることを見出した。3.血管前駆細胞のin vivo血管形成に対するレチノイドの影響:現在、X線照射して骨髄が破壊されたマウスにGFP発現マウスの骨髄を移植し、既存の血管細胞と骨髄由来血管前駆細胞(GFP発現)によるin vivo血管形成に対するレチノイドの影響を解析している。4.レチノイドによるangiopoietin-2遺伝子の発現調節:RT-PCR及び定量PCRの結果から、レチノイドは血管前駆細胞におけるangiopoietin-2遺伝子の発現を促進するが、成熟(既に分化した)内皮細胞・壁細胞における発現には影響を与えないことがわかった。現在、angiopoietin-2遺伝子のプロモーター領域のクローニングを終え、ルシフェラーゼアッセイにて、レチノイド応答に必要とされる領域の同定を試みている。

1. レ チ ノ イ ド stimulus し た ニ ワ ト リ germ plasma allantois に お け る uncomplicated 2 heritage 伝 発 son now - : マ イ ク ロ ダ イ セ ク シ ョ ン method に よ っ て, plasma membrane の urine micro vascular layer less か ら RNA を back 収 し quantitative PCR, rt-pcr and び を line っ た. そ の results, less not stimulate の micro vascular layer と compare す る と, レ チ ノ イ ド 処 Richard し た micro vascular layer less で は, uncomplicated 2 の but 伝 発 が now promote す る こ と が わ か っ た. As に, seaborne レ チ ノ イ ド ア ン タ ゴ ニ ス ト を 処 Richard す る こ と に よ っ て, internality の レ チ ノ イ ド の role を ブ ロ ッ ク し た micro vascular layer less で は, uncomplicated 2 but 伝 の 発 now が inhibit さ れ た. 2. レ チ ノ イ ド の angiogenesis inhibiting unseen fruit に お け る uncomplicated の masato and: レ チ ノ イ ド の angiogenesis inhibiting unseen fruit は, a small blood vessels の ネ ッ ト ワ ー ク formation (に vascular の ambiguities) の inhibiting が te 徴 で あ る. <s:1> the inhibitory effect of <s:1>, レチノ ドとangiopoietin-1 <s:1>, and the addition of によ <s:1> mitigated される される とがわ とがわ とがわ った った. ま た, uncomplicated 2 を 処 Richard す る こ と に よ っ て, レ チ ノ イ ド の angiogenesis inhibiting unseen fruit が quasi さ れ る こ と を shows し た. 3. の 駆 cells before blood vessels in vivo angiogenesis に す seaborne る レ チ ノ イ ド の impact: now, X-ray irradiation し て bone marrow が broken 壊 さ れ た マ ウ ス に GFP 発 now マ ウ ス の bone marrow し を transplantation and existing の vascular cells と bone marrow origin 駆 before blood vessels (GFP 発 now) に よ る in Analysis of the effects of vivo angiogenesis に on するレチノ ド ド を analysis of を て る る る る. 4. レ チ ノ イ ド に よ る uncomplicated 2 heritage 伝 son の 発 now adjust: rt-pcr and the result of quantitative PCR の び か ら, レ チ ノ イ ド は vascular 駆 before cell に お け る uncomplicated 2 heritage 伝 son の 発 を now promote す る が, mature (both に differentiation し た), endothelial cell wall, cell に お け る 発 に now Youdaoplaceholder1 affects を and えな えな とがわ とがわ った った. Now, uncomplicated 2 but 伝 の プ ロ モ ー タ ー field の ク ロ ー ニ ン グ を finishing え ル シ フ ェ ラ ー ゼ ア ッ セ イ に て, レ チ ノ イ ド 応 answer に necessary と さ れ の る field with constant を try み て い る.

项目成果

Suzuki Y et al.: "RETINOIC ACID CONTROLS BLOOD VESSEL FORMATION BY MODULATING ENDOTHELIAL AND MURAL CELL INTERACTION VIA SUPPRESSION OF TIE2 SIGNALING IN VASCULAR PROGENITOR CELLS"Blood. (in press). (2004)

Suzuki Y 等人：“视黄酸通过抑制血管祖细胞中的 TIE2 信号传导来调节内皮细胞和壁细胞相互作用来控制血管形成”血液。

Okuno, M., et al.: "Retinoids in Liver Fibrosis and Cancer"Frontiers in Bioscience. 7. D204-D218 (2002)

Okuno, M., et al.：“类维生素A在肝纤维化和癌症中的作用”生物科学前沿。

Akita, K., et al.: "Impaired liver regeneration in mice by lipopolysaccharide via TNF-α/kallikrein-mediated activation of latent TGF-β"Gastroenterology. 123(1). 352-364 (2002)

Akita, K. 等人：“脂多糖通过 TNF-α/激肽释放酶介导的潜在 TGF-β 激活损害小鼠肝脏再生”Gastroenterology 123(1)。