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サイクリン分解関連酵素Cdc53(Cul-1)の単離とノックアウトマウスの作製

サイクリン分解関連酵素Cdc53(Cul-1)の単離とノックアウトマウスの作製
细胞周期蛋白降解相关酶 Cdc53 (Cul-1) 的分离和敲除小鼠的产生
批准号：
10780445
负责人：
中山 啓子
金额：
$1.41万
依托单位：
Kyushu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1998
资助国家：
日本
项目状态：
已结题
起止时间：
1998 至 1999
来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-10780445/
关键词：
サイクリンマウスCul1ユビキチンリガーゼSCF複合体蛋白分解Cdc53マウスCu1-1

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酵母ですでに知られている、ユビキチンリガーゼのマウス相同遺伝子を単離し、その生物学的機能を知るためにノックアウトマウスを作製した。1.酵母SCF複合体のマウス相同遺伝子を、ESTdatabase上で検索し、マウスCul1のcDNA塩基配 列の一部を得ることができた。2.上記のcDNAの一部をプローブとして、マウス胸腺cDNAライブラリーをスクリーニングし、マウスCul1のcDNA上タンパクコード領域全長を得ることができた。3.cDNA全長をプローブとし、129マウスゲノムライブラリーをスクリーニングし、9個の独立したクローンを得た。4.上記クローンを解析することによって、マウスCul1遺伝子は少なくとも、60kbpに及ぶ大きな遺伝子であることが分かった。5.翻訳開始コドンをコードするエクソンを含む遺伝子領域、約1kbpをネオマイシン耐性遺伝子で置換したターゲティングベタターを構築し、ES細胞にトランスフェクションし、相同組み換え体を得た。6.相同組み換えES細胞をブラストシストにインジェクションして、キメラマウスを得、さらに交配を繰り返し、cul1ヘテロノックアウトマウスを得ることができた。7.ヘテロノックアウトマウス同士を交配したが、ホモノックアウトマウスは産まれず、胎生致死であることが判明した。8.Cul1ノックアウトマウスはいずれも胎生6.5〜7.5日目に死亡し、サイクリンEおよびβ-カテニンの蓄積が見られたので、致死の原因はSCF複合体によって蛋白分解を受けるべき様々な蛋白の以上蓄積に寄るものであると考えられた。
期刊论文(8)
专著(0)
科研奖励(0)
会议论文
Shirane,M.: "Common pathway for the ubiquitination of IκBα,IκBβ,and IκBε mediated by the F-box protein FWD1"J.Biol.Chem.. 274. 28169-28174 (1999)
Shirane, M.：“F-box 蛋白 FWD1 介导的 IκBα、IκBβ 和 IκBε 泛素化的常见途径”J.Biol.Chem.. 274. 28169-28174 (1999)
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
S.Hatakeyama: "Ubiquitin-dependent degradation of IκBα mediated by a ubiquitin ligase Skpl/Cullin/F-box protein FWD1" Proc.Natl.Acad.Sci.USA. (in press).
S. Hatakeyama：“泛素连接酶 Skpl/Cullin/F-box 蛋白 FWD1 介导的 IκBα 降解”，美国国家科学院院刊。
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
Kitagawa,M.: "An F-box protein, FWD1, mediates ubiquitin-dependent proteolysis of β-catenin."EMBO J.. 8. 2401-2410 (1999)
Kitakawa, M.：“F-box 蛋白 FWD1 介导 β-catenin 的泛素依赖性蛋白水解。” EMBO J.. 8. 2401-2410 (1999)
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
Hatakeyama,S.: "Ubiquitin-dependent degradation of IκBα is mediated by a ubiquitin ligase Skp1/Cul1/F-box protein FWD1"Proc.Natl.Acad.Sci.USA. 96. 3859-3863 (1999)
Hatakeyama, S.：“IκBα 的泛素依赖性降解是由泛素连接酶 Skp1/Cul1/F-box 蛋白 FWD1 介导的”，Proc. 96. 3859-3863 (1999)。
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
腫瘍環境におけるFibulin 2の選択的スプライシングによる腫瘍進展制御機構の解明
  • 批准号：
    24K02300
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
  • 资助金额：
    $11.9万
  • 财政年份：
    2024
  • 负责人：
    中山 啓子
  • 依托单位：
    Tohoku University
Function of SETD5 in pancreatic cancer
  • 批准号：
    21H02458
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
  • 资助金额：
    $11.15万
  • 财政年份：
    2021
  • 负责人：
    中山 啓子
  • 依托单位：
    Tohoku University
RAS活性化による転写制御ー染色体領域に注目したアプローチによる解析
  • 批准号：
    23300346
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
  • 资助金额：
    $5.91万
  • 财政年份：
    2011
  • 负责人：
    中山 啓子
  • 依托单位：
    Tohoku University
In vivoタンパク質複合体形成モニタリングの試み
  • 批准号：
    22657052
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
  • 资助金额：
    $2.19万
  • 财政年份：
    2010
  • 负责人：
    中山 啓子
  • 依托单位：
    Tohoku University