课题基金 / 基金详情

In vivoタンパク質複合体形成モニタリングの試み

In vivoタンパク質複合体形成モニタリングの試み
尝试监测体内蛋白质复合物的形成
批准号：
22657052
负责人：
中山 啓子
金额：
$2.19万
依托单位：
Tohoku University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
财政年份：
2010
资助国家：
日本
项目状态：
已结题
起止时间：
2010 至 2011
来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22657052/
关键词：
タンパク質相互作用蛍光色素in vivoモニタリングGeminin

项目摘要

项目成果

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マウス個体(特に発生過程)でのタンパク質の相互作用変化について高い時空間的分解能を持った解析法を確立することを目的に本研究を行った。タンパク質はそれが相互作用する分子により、異なる機能発揮するが、相互作用分子の研究は試験管内で細胞抽出液中を用いた試験管内での結合を調べるに過ぎなかった。そこで、本研究課題では、in vitroで相互作用することが知られている分子群が、in vivoでは、いつ、どこで相互作用するのかを半定量的にモニターする方法を開発することを目指し、発生工学的手法を用いて蛍光タンパク質の断片との融合タンパク質を発現するマウスを作製、in vivoでタンパク質複合体の挙動をモニタリングする。本研究ではモデルタンパク質としてGemininを用いた。GemininはCDT1とHoxB9に結合することが知られている。そこで、Geminin・CDT1・HoxB9をそれぞれ異なる蛍光タンパク質との融合タンパク質を作製する。これらの融合タンパク質がこれまでに報告されている機能を持つことを培養細胞内で確認するために、NIH3T3細胞にこれらの融合タンパク質を過剰発現し、細胞周期に与える影響と、これまで報告されている結合タンパク質との結合を免疫沈降法で確認した。また、これらの融合タンパク質を共発現し、想定される蛍光がみられることを確認した。以上の結果を踏まえて、in vivoでのモニタリングを行うために、lck promoterによって各融合タンパク質のcDNAが転写されるような発現ベクターの構築を終えた。
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会议论文
がん遺伝子RASによる広範囲染色体領域の遺伝子サイレンシング機構の解析
癌基因RAS分析广泛染色体区域的基因沉默机制
DOI： --
发表时间： 2010
期刊：
影响因子： --
作者： [舟山亮, 細金正樹, 西田有一郎, 中山啓子]
通讯作者： 中山啓子
Ras-mediated regional silencing around Fas gene locus.
Ras 介导的 Fas 基因座周围的区域沉默。
DOI： --
发表时间： 2011
期刊：
影响因子： --
作者： [細金正樹, 舟山亮, 西田有一郎, 中山啓子]
通讯作者： 中山啓子
Gemininは造血幹細胞の維持と巨核球の分化を制御する
Geminin 控制造血干细胞维持和巨核细胞分化
DOI： --
发表时间： 2010
期刊：
影响因子： --
作者： [中野星児, 佐々木陽丞, 本橋ほづみ, 中山啓子]
通讯作者： 中山啓子
Deleted in Esophageal Cancer 1(DEC1) is downregulated and contributes to migration in head and neck squamous cell carcinoma cell lines.
食管癌缺失 1 (DEC1) 下调，有助于头颈鳞状细胞癌细胞系的迁移。
DOI： --
发表时间： 2010
期刊： ORL J Otorhinolarygol. Relat. Spec. 73
影响因子： --
作者： [Kunimoto Y, Nakano S, Kataoka H, Shimada Y, Oshimmura M, Kitano H]
通讯作者： Kitano H
共 13 条
    腫瘍環境におけるFibulin 2の選択的スプライシングによる腫瘍進展制御機構の解明
    • 批准号：
      24K02300
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
    • 资助金额：
      $11.9万
    • 财政年份：
      2024
    • 负责人：
      中山 啓子
    • 依托单位：
      Tohoku University
    Function of SETD5 in pancreatic cancer
    • 批准号：
      21H02458
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
    • 资助金额：
      $11.15万
    • 财政年份：
      2021
    • 负责人：
      中山 啓子
    • 依托单位：
      Tohoku University
    RAS活性化による転写制御ー染色体領域に注目したアプローチによる解析
    • 批准号：
      23300346
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
    • 资助金额：
      $5.91万
    • 财政年份：
      2011
    • 负责人：
      中山 啓子
    • 依托单位：
      Tohoku University
    細胞周期と初期発生に関わる分子群の新規解析法の開発
    • 批准号：
      19657055
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for Exploratory Research
    • 资助金额：
      $2.24万
    • 财政年份：
      2007
    • 负责人：
      中山 啓子
    • 依托单位：
      Tohoku University
    海外基金