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リボザイムを用いた組織特異的ノックアウトマウス作製法の開発

リボザイムを用いた組織特異的ノックアウトマウス作製法の開発
利用核酶开发组织特异性敲除小鼠生产方法
批准号：
14658241
负责人：
中山 啓子
金额：
$2.18万
依托单位：
Tohoku University (2003)Kyushu University (2002)
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2002
资助国家：
日本
项目状态：
已结题
起止时间：
2002 至 2003
来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14658241/
关键词：
リボザイムトランスジェニックマウスライブラリー

项目摘要

项目成果

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リボザイムは小さな触媒作用を持つRNAで、1990年代前半より基礎研究で用いられてきたが、特定の遺伝子配列を認識することができるところから、医療等の社会的有用性が大いに期待されてきた。リボザイムはあるRNA上の特定配列を認識し、その部位を切断することによって、遺伝子の発現レベルを低下させることができるRNAである。この反応は、試験管内では非常に効果的に行われるにも関わらず、細胞内での活性は、標的遺伝子に強く依存し一般的な発現抑制システムとして用いることは難しいとされていた。しかし、リボザイムの発現法の工夫によって、細胞内で任意の遺伝子の発現レベルを調節することが可能となった。そこで本研究では我々が持つ発生工学的技術をリボザイムによる発現調節システムと結びつけ、組織特異的なノックアウトマウスの作製、さらにリボザイムライブラリーを用いた網羅的ノックアウトマウスの作製という新しい方法論の確立を目指していた。すでに我々がノックアウトマウスを作製済みのp27やSkp2について検討を行った。まず、従来の発現ベクター及び、レトロレトロウイルスベクター由来を開発し、その有効性の比較検討を行ったところ、レトロウイルスベクターでは安定な遺伝子の導入効率が得られるものの、タンパク発現の抑制効果が低いことが判明した。これは、リボザイムの転写量に依存していると考えている。また、リボザイムの認識配列とその発現低下効果の比較検討を行ったが、一定の法則性を見出すことができなかった。
期刊论文(17)
专著(0)
科研奖励(0)
会议论文
Chang, T.S.et al.: "p57^<KIP2> modulates stress-activated signaling by inhibiting c-Jun NH2-terminal kinase/stress-activated protein Kinase."J.Biol.Chem.. 278. 48092-48098 (2003)
Chang, T.S.等人：“p57^<KIP2> 通过抑制 c-Jun NH2 末端激酶/应激激活蛋白激酶来调节应激激活信号传导。”J.Biol.Chem.. 278. 48092-48098 (2003)
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
Imaki, H. et al.: "Cell Cycle-dependent Regulation of the Skp2 Promoter by GA-binding Protein."Cancer Res.. 63. 4607-4613 (2003)
Imaki, H. 等人：“GA 结合蛋白对 Skp2 启动子的细胞周期依赖性调节。”Cancer Res.. 63. 4607-4613 (2003)
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
Miyamoto A. et al.: "Increased prolieration of B cells and auto-immunity in mice lacking protein kinase Cδ"Nature. 416. 865-869 (2002)
Miyamoto A. 等人：“缺乏蛋白激酶 Cδ 的小鼠中 B 细胞增殖和自身免疫增加”《自然》杂志 416. 865-869 (2002)。
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
Kaneko C. et al.: "Characterization of the mouse gene for the U-box-type ubiquitin ligase UFD2a"Biochem. Biophys. Res. Commun.. 300. 297-304 (2002)
Kaneko C. 等人：“U-box 型泛素连接酶 UFD2a 小鼠基因的表征”Biochem。
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
共 15 条
    腫瘍環境におけるFibulin 2の選択的スプライシングによる腫瘍進展制御機構の解明
    • 批准号：
      24K02300
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
    • 资助金额：
      $11.9万
    • 财政年份：
      2024
    • 负责人：
      中山 啓子
    • 依托单位：
      Tohoku University
    Function of SETD5 in pancreatic cancer
    • 批准号：
      21H02458
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
    • 资助金额：
      $11.15万
    • 财政年份：
      2021
    • 负责人：
      中山 啓子
    • 依托单位：
      Tohoku University
    RAS活性化による転写制御ー染色体領域に注目したアプローチによる解析
    • 批准号：
      23300346
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
    • 资助金额：
      $5.91万
    • 财政年份：
      2011
    • 负责人：
      中山 啓子
    • 依托单位：
      Tohoku University
    In vivoタンパク質複合体形成モニタリングの試み
    • 批准号：
      22657052
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
    • 资助金额：
      $2.19万
    • 财政年份：
      2010
    • 负责人：
      中山 啓子
    • 依托单位：
      Tohoku University
    海外基金