G蛋白質共役型及びFc受容体を介したマスト細胞のシグナル伝達機構

通过 G 蛋白偶联和 Fc 受体的肥大细胞信号转导机制

• 批准号: 12139204
• 负责人: 仁科 博史
• 金额: $ 18.56万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-12139204/
• 关键词: マスト細胞; ES細胞; MAPキナーゼ; JNK; SEK1; MKK7; IgE受容体; 顆粒放出; インターロイキン3; 幹細胞増殖因子

マスト細胞上に存在するIgE受容体(FcεRI)の刺激は、主にサイトカイン遺伝子の発現とヒスタミンやセロトニンを含む細胞内顆粒の放出を介して、アレルギーや炎症反応に深く寄与している。これら2種の生理応答に関わる細胞内のシグナル伝達系として、それぞれPI3-キナーゼの活性化と細胞内Ca^<2+>の上昇が重要視されているが、MAPキナーゼ系の役割については未だに不明な点が多い。申請者らは、これらシグナル系の生理的な役割を明らかにする目的でノックアウトマウスの作出や特異的な阻害剤を用いた解析を行っている。本年度の成果として、我々は先ずストレス応答性のMAPキナーゼであるSAPK/JNKの活性化機構を検討した。その結果、SAPK/JNKの活性化にはSEK1とMKK7の2種類の活性化因子が協調的に働いていることを明らかにした(J.Biol.Chem. 278;16595-16601,2003)。また、同じく免疫担当細胞の一つである好中球のFcγ受容体やfMLP受容体による活性酸素産生において、ERKがアダプター分子のGab2を直接リン酸化すること,その結果PI3キナーゼの活性化が促進されるという興味深い知見を見い出した(J.Immunol.171;4227-4234,2003)。次に我々は、MAPキナーゼ系の阻害剤を用いてマスト細胞の生理機能に及ぼす影響を検討した。その結果、SAPK/JNK阻害薬のSP600125によってFcεRI刺激によるサイトカイン遺伝子発現も顆粒放出も顕著に抑制されることを見い出した。しかしながら、この薬剤による抑制効果はSAPK/JNK阻害によるものでないことを、SAPK/JNK活性化の時間経過やMKK7欠損マスト細胞を用いて明らかにしている。現在までに、SP600125の作用点はPI3-キナーゼより上流に位置する分子であることを見い出しており、この作用点の解明から、サイトカイン遺伝子発現や顆粒放出に必須の役割を果たす分子の解明を目指している。

The stimulation of IgE receptor (FcεRI) on the cells is mainly mediated by the production of IgE receptor and the release of intracellular granules. These two physiological responses are related to the intracellular Ca^<2+> activation and activation of PI3-P, MAP and the intracellular Ca^<2+> elevation. The applicant shall, in accordance with the requirements of the present invention, make an analysis of the application of a specific inhibitor for the purpose of identifying the physiological components of the system. The results of this year are discussed in detail below. As a result, the activation of SAPK/JNK was coordinated between SEK1 and MKK7 and the activation of two kinds of factors (J. Biol.Chem. 278;16595- 16601, 2003). In addition, the activation of PI3 protein was promoted by direct acidification of Gab2, an ERK molecule, in the Fcγ receptor and fMLP receptor of immune responsible cells (J. Immunol.171;4227- 4234, 2003). In addition, we also discuss the influence of MAP on the physiological function of cells. Results: SP600125 for SAPK/JNK inhibitor was found to inhibit the release of FcRI. The inhibition effect of SAPK/JNK inhibition is that the activation time of SAPK/JNK is too long and the MKK7 is too short. Now, SP600125's point of action is PI3- 7, upstream molecular position, molecular position.

项目成果

K.Kontani, M.Tada, T.Ogawa, T.Okai, K.Saito, Y.Araki, T.Katada: "Di-Ras : A distinct subgroup of Ras-family GTPases with unique biochemical properties"J.Biol.Chem.. 277. 41070-41078 (2002)

K.Kontani、M.Tada、T.Okawa、T.Okai、K.Saito、Y.Araki、T.Katada：“Di-Ras：具有独特生化特性的 Ras 家族 GTP 酶的独特亚组”J.Biol。

T.Wada, K.Nakagawa, G.Nishitai, J.Seo, H.Kishimoto, et al.: "Impaired synergistic activation of stress-activated protein kinase SAPK/JNK in ES cells lacking SEK1/MKK4"J.Biol.Chem.. 276. 30892-30897 (2001)

T.Wada、K.Nakakawa、G.Nishitai、J.Seo、H.Kishimoto 等人：“缺乏 SEK1/MKK4 的 ES 细胞中应激激活蛋白激酶 SAPK/JNK 的协同激活受损”J.Biol.Chem

H.Kurosu, T.Katada: "Association of phosphatidylinositol 3-kinase composed of p110β-catalytic and p85-regulatory subunits with the small GTPase Rab5"J.Biochem.. 130. 73-78 (2001)

H.Kurosu, T.Katada：“由 p110β-催化和 p85-调节亚基组成的磷脂酰肌醇 3-激酶与小 GTPase Rab5 的关联”J.Biochem.. 130. 73-78 (2001)

H.Yoshida, S.Hamano, G.Senaldi, T.Covey, R.Faggioni, S.Mu, M.Xia, et al.: "WSX-1 is required for the initiation of Th1 responses and resistance to L. major infection"Immunity. 15. 569-578 (2001)

H.Yoshida、S.Hamano、G.Senaldi、T.Covey、R.Faggioni、S.Mu、M.Xia 等人：“WSX-1 是启动 Th1 反应和对 L. Major 的抗性所必需的

T.Watanabe, K.Nakagawa, S.Ohata, D.Kitagawa, G.Nishitai, et al.: "SEK1/MKK4-mediated SAPK/JNK signaling participates in embryonic hepatoblast proliferation via a pathway different from NF-kappaB-induced anti-apoptosis"Dev.Biol.. 15. 332-347 (2002)

T.Watanabe、K.Nakakawa、S.Ohata、D.Kitakawa、G.Nishitai 等人：“SEK1/MKK4 介导的 SAPK/JNK 信号传导通过不同于 NF-kappaB 诱导的抗肿瘤途径参与胚胎肝细胞增殖。