カブトガニ血球細胞分泌顆粒内に見い出されたプロリンイソメラーゼの機能

鲎血细胞分泌颗粒脯氨酸异构酶的功能

• 批准号: 09276223
• 负责人: 牟田 達史
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09276223/
• 关键词: プロリン; シス; トランス; イソメラーゼ; サイクロフィリン; シャペロン; カブトガニ; 分泌顆粒; 品質管理システム

カブトガニ血球細胞は、体液凝固因子、レクチン、抗菌物質などの防御物質を密に含んだ大小二種類の顆粒をもつ。これらの顆粒内成分は、グラム陰性菌表層のリポ多糖(LPS)刺激にともなって血球細胞よりエキソサイトーシスによって体液中へと放出され、感染菌の凝集、被包化、殺菌など、この動物の生体防御系の中心的役割を果たしている。我々は、体液凝固因子の一つであるG因子の機能解析の過程で,カブトガニ血球細胞内に存在する27kDaの未知のタンパク質が、抗G因子サブユニットβ抗体と反応することを見い出し、このタンパク質の解析を行い、以下の知見を得た。まず、同抗体との反応性を指標に、このタンパク質(p27)を精製し、さらにcDNAクローニングを行い、その全塩基配列を解析した。p27のアミノ酸配列は、プロリン-シストランス-イソメラーゼ(peptidyl-prorylcis/trans-isomerase)の一種で免疫抑制剤サイクロスポリンAの細胞内ターゲットと知られるサイクロフィリンBと高い相同性を示した。p27はイソメラーゼ活性を示し、この活性はサイクロスポリンAによって阻害されたが、FK506による影響は見られなかった。p27は他のサイクロフィリンBと同様、N末端に疎水性の分泌シグナル配列をもつものの、サイクロフィリンBに共通して存在するC末端の小胞体保持シグナル配列は保存されていなかった。p27は血球細胞内の大顆粒内に特異的に局在する新しいタイプのサイクロフィリンであることが明らかになり、我々は、このタンパク質をサイクロフィリンGと命名した。本研究は調節性分泌顆粒内のサイクロフィリン様のタンパク質の存在を示した初めての報告であり、分泌タンパク質の貯蔵の場においてもシャペロン様のタンパク質による品質管理システム(quality control system)が存在する可能性が示唆された。

Blood cells, coagulation factors, antibacterial substances, defense substances, and particles of all sizes The intracellular components of these bacteria are stimulated by LPS on the surface layer of negative bacteria, and released from the body fluid. The aggregation, encapsulation, and isolation of infectious bacteria are the main effects of LPS stimulation on the center of the animal's biological defense system. We found out that there is an unknown protein of 27kDa in the cytoplasm of human blood cells, and there is an anti-G factor beta antibody. The expression of the same antibody is determined by the specificity index, the purification of the protein (p27), the sequencing of the cDNA, and the analysis of the nucleotide sequence. p27-prorylcis/trans-isomerase, A kind of immunosuppressive agent, is shown to be highly identical to p27-prorylcis/trans-isomerase. p27 is A good indicator of activity, and FK506 is a good indicator of activity. p27 is a member of the N-terminal secretory group, which is a member of the N-terminal secretory group, and a member of the C-terminal secretory group. p27 is a new type of cell in which cells are specific to each other. This study was conducted to investigate the possibility of the existence of a quality control system (quality control system) for the storage field of regulatory secretory granules.

项目成果

Iwanaga,S.: "New Types of Clotting Factors and Defense Molecules Found in Horseshoe Crab Hemolymph: Their Structures and Functions." J.Biochem.123・1. 1-15 (1998)

Iwanaga, S.：“在鲎血淋巴中发现的新型凝血因子和防御分子：它们的结构和功能。J.Biochem.123·1（1998）”

Muta,T.: "Methods Mol.Biol.,Vol.78: Antibacterial Peptide Protocols" Humana Press Inc., 259 (1997)

Muta,T.：“Methods Mol.Biol.，Vol.78：抗菌肽方案”Humana Press Inc.，259 (1997)

Takaki,Y.: "A Peptidyl-prolyl cis/trans Isomerase(Cyclophilin G)in Regulated Secretory Granules." J.Biol.Chem.272・45. 28615-28621 (1997)

Takaki, Y.：“调节分泌颗粒中的肽基脯氨酰顺/反异构酶（亲环蛋白 G）。”J.Biol.Chem.272·45（1997）。

Bergner,A.: "Horseshoe Crab Coagulogen Is an Invertebrate Protein with a Nerve Growth Factor-like Domain." Biol.Chem.Hoppe Seyler. 378. 283-287 (1997)

Bergner,A.：“鲎凝固蛋白原是一种具有神经生长因子样结构域的无脊椎动物蛋白质。”