课题基金 / 基金详情

リザーバー遺伝子を用いた発癌の予防的治療の基礎研究

リザーバー遺伝子を用いた発癌の予防的治療の基礎研究
利用储存基因预防癌变的基础研究
批准号:
06282207
负责人:
三浦 直行
金额:
$1.41万
依托单位:
依托单位国家:
日本
项目类别:
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份:
1994
资助国家:
日本
项目状态:
已结题
起止时间:
1994 至 --

项目摘要

项目成果

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中文摘要
翻译
ヒトRb遺伝子は米国Dr.W.F.Benedictより供与を受けた。これを肝臓、腎臓、小腸で発現する9kbpからなるHNF-1(Hepatocyte Nuclear Factor-1)遺伝子プロモーターの支配下に置いたコンストラクトを作った。まず、9kbpのHNF-1遺伝子プロモーターの有効性を確かめるため、レポーター遺伝子としてLacZを組み込んだコンストラクトを作った。これを、肝臓由来のHep G2細胞、Hep 3B細胞、非肝臓のP19細胞、Hela細胞などに遺伝子導入した結果、9kbpのHNF-1遺伝子プロモーターは肝臓由来細胞だけに発現させることが判明した。次に、このプロモーターの支配下にヒトRb遺伝子を込み込んだコンストラクトを作り、Hep G2細胞に遺伝子導入をしてRb蛋白の解析を行った結果、正しく分子量110kDaの蛋白が発現していることが判明した。さらに、cdk2様kinaseでリン酸化される12個のセリンまたはスレオニンをアラニンに変異させた変異型Rb遺伝子を同じプロモーターの支配下に組み込んだコンストラクトを作った。これをHep G2細胞に遺伝子導入してRb蛋白を解析した結果、正しく分子量110kDaの蛋白が産生され、またSV40のT抗原と結合することが明らかになった。以上の結果を踏まえて、(HNF-1プロモーター+正常Rb)コンストラクトをマウス受精卵に微小注射してトランスジェニックマウスを作製しつつある。また、(HNF-1プロモーター+変異型Rb)コンストラクトもマウス受精卵に注射してトランスジェニックマウスを作製しつつある。
英文摘要
ヒトRb遺伝子は米国Dr.W.F.Benedictより供与を受けた。これを肝臓、腎臓、小腸で発現する9kbpからなるHNF-1(Hepatocyte Nuclear Factor-1)遺伝子プロモーターの支配下に置いたコンストラクトを作った。まず、9kbpのHNF-1遺伝子プロモーターの有効性を確かめるため、レポーター遺伝子としてLacZを組み込んだコンストラクトを作った。これを、肝臓由来のHep G2細胞、Hep 3B細胞、非肝臓のP19細胞、Hela細胞などに遺伝子導入した結果、9kbpのHNF-1遺伝子プロモーターは肝臓由来細胞だけに発現させることが判明した。次に、このプロモーターの支配下にヒトRb遺伝子を込み込んだコンストラクトを作り、Hep G2細胞に遺伝子導入をしてRb蛋白の解析を行った結果、正しく分子量110kDaの蛋白が発現していることが判明した。さらに、cdk2様kinaseでリン酸化される12個のセリンまたはスレオニンをアラニンに変異させた変異型Rb遺伝子を同じプロモーターの支配下に組み込んだコンストラクトを作った。これをHep G2細胞に遺伝子導入してRb蛋白を解析した結果、正しく分子量110kDaの蛋白が産生され、またSV40のT抗原と結合することが明らかになった。以上の結果を踏まえて、(HNF-1プロモーター+正常Rb)コンストラクトをマウス受精卵に微小注射してトランスジェニックマウスを作製しつつある。また、(HNF-1プロモーター+変異型Rb)コンストラクトもマウス受精卵に注射してトランスジェニックマウスを作製しつつある。
期刊论文(6)
专著(0)
科研奖励(0)
会议论文
DOI: --
发表时间:
期刊:
影响因子: --
作者: []
通讯作者:
三浦直行: "マウスを用いた分子遺伝学" 生体の科学. 46. 102-103 (1995)
Naoyuki Miura:“使用小鼠进行分子遗传学”生物科学 46. 102-103 (1995)。
DOI: --
发表时间:
期刊:
影响因子: --
作者: []
通讯作者:
C型肝炎ウイルスによる慢性肝炎マウスの作製と肝細胞癌研究への応用
  • 批准号:
    26670600
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
  • 资助金额:
    $2.33万
  • 财政年份:
    2014
  • 负责人:
    三浦 直行
  • 依托单位:
C型肝炎ウイルス持続感染マウスの作製と発がん機構の解明
  • 批准号:
    20012023
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
  • 资助金额:
    $6.78万
  • 财政年份:
    2008
  • 负责人:
    三浦 直行
  • 依托单位:
分子標的発見による肝臓強化新療法の基礎的研究
  • 批准号:
    17659407
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Exploratory Research
  • 资助金额:
    $2.11万
  • 财政年份:
    2005
  • 负责人:
    三浦 直行
  • 依托单位:
会話言語遺伝子FOXP2の高次脳機能における役割の解明
  • 批准号:
    17022018
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
  • 资助金额:
    $1.66万
  • 财政年份:
    2005
  • 负责人:
    三浦 直行
  • 依托单位:
国内基金
海外基金
雷公菌主要活性成分对羟基苯甲醛通过HNF-1β/EMT途径改善溃疡性结肠炎的机制研究
  • 批准号:
    82160615
  • 项目类别:
    地区科学基金项目
  • 资助金额:
    35万元
  • 批准年份:
    2021
  • 负责人:
    王宇晖
  • 依托单位:
基于HNF-1α/4α对尿酸转运蛋白OAT1/3的转录调节研究矢志方减轻肾小管炎症降尿酸的机制
  • 批准号:
    81904126
  • 项目类别:
    青年科学基金项目
  • 资助金额:
    20.0万元
  • 批准年份:
    2019
  • 负责人:
    吴燕升
  • 依托单位:
转录因子HNF-1/4alpha调控的UGT1A3对肺腺癌IGF-1R靶向治疗的影响与机制研究
  • 批准号:
    81802282
  • 项目类别:
    青年科学基金项目
  • 资助金额:
    21.0万元
  • 批准年份:
    2018
  • 负责人:
    董伟
  • 依托单位:
α1-AT及其调控因子HNF-1在中毒性肺水肿中的作用