哺乳動物におけるホメオティック遺伝子の発現と機能

哺乳动物同源基因的表达和功能

• 批准号: 62540482
• 负责人: 高橋 直樹
• 金额: $ 0.96万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1987
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1987 至 1988
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-62540482/
• 关键词: 遺伝子の発現調節; cDNAクローニング; 遺伝子クローニング; 遺伝子の機能; ホメオボックス; 発生; 遺伝子の動物細胞への導入; in situハイブリダイゼーション

1.昨年度遺伝子構造を明らかにした新しいマウスホメオボックス遺伝子(gm-13)が、これまでに報告されている他のホメオボックス遺伝子の染色体上の位置とどのような関係にあるかを明らかにするため、日本産野生ネズミ由来のマウス(MOA)とBalb/Cマウスとの間のBackcross Progeny DNAをRestriction Fragment Length Polymorphism(RFLP)を用いた連鎖解析(Linkage Analysis)でおこなった。その結果gm-13はHox3-1と強く連鎖しており、gm-13はHox3クラスター(染色体15)に含まれる新しいホメオボックス遺伝子であることが明らかになった。2.ホメオボックス遺伝子の発生過程における役割を明らかにするためにin situ hybridization法によってgm-13のマウス発生過程における組織特異的発現を調べた。gm-13は他のいくつかのマウルホメオボックス遺伝子と同様に12日胎児の脊髄で発現が認められた。しかし脊髄中での発現の領域は、それぞれのホメオボックス遺伝子で少しずつ異なっている。gm-13は脊髄での発現に加え萎脳での発現もみられた。また14日胎児では食道、肺、腸管の上皮組織での発現が観察された。3.ホメオボックス遺伝子によって発現の調節されている遺伝子を同定するために、gm-13に対応するヒト遺伝子gh-13にβアクチンプロモーターを結合したリコンビナニトをNeomycin遺伝子とともにF9細胞に導入した。トランスフォーメション前後での他の遺伝子の発現の変化を調べているが、他のホメオボックス遺伝子の発現の変化は観察されていない。

1. Last year's heritage 伝 sub structure を Ming ら か に し た new し い マ ウ ス ホ メ オ ボ ッ ク ス heritage 伝 (gm - 13) が, こ れ ま で に report さ れ て い る he の ホ メ オ ボ ッ ク ス heritage 伝 の の locus on a chromosome location と ど の よ う な masato is に あ る か を Ming ら か に す る た め, Japanese wild ネ ズ ミ origin の マ ウ ス (earth-sized) と Balb /C を ウスと between <s:1> Backcross Progeny DNAをRestriction Fragment Length Polymorphism(RFLP)を Linkage Analysis using <s:1> た でお なった なった. そ の result gm - 13 は と Hox3-1 strong く chain し て お り, gm - 13 は Hox3 ク ラ ス タ ー (chromosome 15) contains に ま れ る new し い ホ メ オ ボ ッ ク ス heritage 伝 son で あ る こ と が Ming ら か に な っ た. 2. ホ メ オ ボ ッ ク ス posthumous son 伝 の 発 birth process に お け る "を cut Ming ら か に す る た め に the in situ hybridization method に よ っ て gm - 13 の マ ウ ス 発 birth process に お け る tissue specific 発 now を adjustable べ た. Gm - 13 は he の い く つ か の マ ウ ル ホ メ オ ボ ッ ク ス posthumous son 伝 と with others in tire where に 12 の spinal marrow で 発 が now recognize め ら れ た. し か し ridge in the marrow で の 発 は の field, そ れ ぞ れ の ホ メ オ ボ ッ ク ス posthumous son 伝 で less し ず つ different な っ て い る. gm-13 <s:1> spinal cord で で occurrence に and え withering 脳で occurrence みられた みられた. Youdaoplaceholder0 At 14 days of gestation, 児で 児で, <s:1> epithelial tissues of the esophagus, lungs and intestines で, が観 and された were observed. 3. ホ メ オ ボ ッ ク ス posthumous son 伝 に よ っ て 発 is の regulating さ れ て い る posthumous son 伝 を with fixed す る た め に, gm - 13 に 応 seaborne す る ヒ ト posthumous son 伝 gh - 13 に beta ア ク チ ン プ ロ モ ー タ ー を combining し た リ コ ン ビ ナ ニ ト を Neomycin heritage 伝 son と と も に F9 cells に import し た. ト ラ ン ス フ ォ ー メ シ ョ ン before and after で の he の but 伝 の 発 の now - the を adjustable べ て い る が, he の ホ メ オ ボ ッ ク ス posthumous son 伝 の 発 の now - the は 観 examine さ れ て い な い.

项目成果

村松正実 編: "ラボマニュアル遺伝子工学" 丸善, 1-175 (1988)

村松雅美主编：《基因工程实验手册》丸善，1-175（1988）