恒常的活性型サイトカインレセプターおよび恒常的活性型転写因子の造腫瘍性の検討

组成型活性细胞因子受体和组成型活性转录因子的致瘤性检查

• 批准号: 11162211
• 负责人: 北村 俊雄
• 金额: $ 1.73万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11162211/
• 关键词: サイトカイン; サイトカインレセプター; STAT5; 転写因子; 増殖; BMTモデル; レトロウイルス; パッケイジング細胞

我々は以前、PCRによる任意点突然変異をスクリーニングすることにより恒常的活性型STAT5転写因子およびMPL(トロンボポイエチンレセプター)を同定した。これらの活性型分子はいずれもIL-3依存性細胞の自律性増殖を誘導した。活性型STAT5は恒常的にリン酸化され、核に局在し、標的配列(β-caseinプロモーター)を結合して転写活性を上昇させることが判明した。さらに詳細な検討を行ったところ、この恒常的活性化は活性型STAT5においてリン酸化状態が安定に保たれることが原因と考えられた。また、マウスBMTモデルの実験で恒常的活性型STAT5が骨髄増殖性疾患(MPD)様の症候を誘導することが判明した。この原因がSTAT5の標的遺伝子OSMの過剰産生であることを考え現在マウスBMTモデルでOSM過剰発現マウスを作成している。一方、BMTモデルには安定して効率のよい遺伝子導入が可能な系が不可欠である。最近、我々は強力なEFIαプロモーターとIRES配列を組み合わせたパッケイジングコンストラクトを作成し、これを導入したレトロウイルスパッケイジング細胞PLAT-Eを作成した。PLAT-Eは従来のパッケイジング細胞に比較して高力価のウイルス(10^7/ml)を長期に亘り安定して産生した。現在BMTモデルはPLAT-E細胞を利用して良好な結果を得ている。

I have a constant STAT5 writing factor and MPL(change) at any point in the PCR. These active molecules are involved in IL-3-dependent cellular induction of autonomous proliferation. The activity of STAT5 was found to be increased due to the combination of β-caseins and target molecules. The activity of the active type STAT5 is stable and stable. The constant activity of STAT5 in the development of MPD is identified. The reason for this is that STAT5's target gene OSM has been generated. On the one hand, BMT is not stable, and it is possible to introduce the gene into the system. Recently, I have been trying to create a powerful EFI alpha file and an IRES file. PLAT-E is stable for a long period of time due to its high strength (10^7/ml). Now BMT is using PLAT-E cells with good results.

项目成果

Nosaka, T.: "Identification and characterization of constitutively active STAT5"Molecular Biology a Hematopoiesis 6. 277-287 (1999)

Nosaka，T.：“组成型活性 STAT5 的识别和表征”分子生物学和造血 6. 277-287 (1999)

Morita, S.: "An efficient and stable retrovirus packaging system for transient packaging."Gene Therapy. (in press). (2000)

Morita, S.：“一种用于瞬时包装的高效稳定的逆转录病毒包装系统。”基因治疗。

Nieborowska-Skorska, M.: "Signal transducer and activator of transcription (STAT) 5 activation by BCR/ABL is dependent on intact Src homology (SH) 3 and SH2 domains of BRS/ABL and is required for leukemogenesis"J. Exp. Med.. 18. 1229-1242 (1999)

Nieborowska-Skorska, M.：“BCR/ABL 激活的信号转导器和转录激活子 (STAT) 5 依赖于 BRS/ABL 的完整 Src 同源性 (SH) 3 和 SH2 结构域，并且是白血病发生所必需的”J.

Yamada, K.: "Constitutively active STAT5 A and STAT5B in vitro and in vivo: mutation of STAT5 is not a frequent cause of leukemogenesis."Int. J. Hematol.. 71. 46-54 (2000)

Yamada, K.：“体外和体内的 STAT5 A 和 STAT5B 组成型活性：STAT5 突变并不是白血病发生的常见原因。”Int。

Matsumura, I.: "Involvement of cyclin D1 in STAT5-mediated cell growth"EMBO J.. 18. 1367-1377 (1999)

Matsumura, I.：“细胞周期蛋白 D1 参与 STAT5 介导的细胞生长”EMBO J.. 18. 1367-1377 (1999)