T細胞分化におけるIL-7レセプターによる細胞周期と細胞死の制御

T 细胞分化过程中 IL-7 受体对细胞周期和细胞死亡的控制

• 批准号: 14033222
• 负责人: 生田 宏一
• 金额: $ 3.07万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14033222/
• 关键词: サイトカインレセプター; インターロイキン7; T細胞; T細胞抗原受容体; 転写; シグナル伝達

本研究の目的は、胸腺T細胞がプレTCRからの刺激を受けた後にIL-7Rの発現が低下する分子機構を解明することにある。リンパ系前駆細胞の生成過程におけるIL-7Rの機能を明らかにするために、IL-7R遺伝子の発現制御機構を解析した。まず、胸腺におけるIL-7Rの発現を解析すると、CD4(-)CD8(-)DN分画とSP分画で発現していたが、DP分画ではまったく発現が見られなかった。次に、各分画のIL-7Rα鎖mRNAを解析したところ、DP分画で顕著に低下していた。以上の結果から、IL-7Rの発現が転写レベルで制御されることが明らかとなった。次に、マウスIL-7Rα鎖遺伝子のプロモーター領域を解析した。まず、転写が翻訳開始点の上流51bpと126bpの2ヵ所から開始することを確認した。マウスとヒトを比較すると、転写開始点の上流200bpの領域が高度に保存されており、Ikaros、PU.1、Runxの結合モチーフが存在した。また、マウスにはグルココルチコイド受容体(GR)の結合モチーフも存在した。次に、これらの領域をプロB細胞株38B9に導入し、レポーター法により解析すると、特異的な転写活性化能が検出された。この時、PU.1モチーフを破壊すると10%、GRモチーフを破壊すると44%減少し、両者を変異すると活性が完全に失われた。さらに、ゲルシフト法にて、38B9細胞の核抽出物の中にGRモチーフに結合する活性が検出され、この活性は抗GR抗体により消失した。一方、プロT細胞株KKFでは、グルココルチコイド処理によりIL-7Rの発現が増強した。以上の結果から、IL-7Rα鎖遺伝子の転写誘導において、PU.1とGRが重要な働きをしていることが示された。

The aim of this study was to elucidate the molecular mechanisms underlying IL-7R expression after thymic T cell stimulation. To clarify the function of IL-7R and the mechanism of IL-7R gene expression and control in the process of cell formation IL-7R is detected in the thymus gland, CD4 (-) CD8 (-)DN, SP and DP respectively. IL-7R α-lock mRNA analysis of each sub-picture is lower than that of DP sub-picture The above results show that IL-7R can be produced in a variety of ways. Next, the IL-7 α lock vector was analyzed. 51bp and 126bp upstream of the translation start point are confirmed. The 200bp region upstream of the start point is highly conserved. Ikaros, PU.1 and Runx are highly conserved. The combination of GR and GR exists. In addition, the domain of B cell line 38B9 was introduced, analyzed, and specifically activated. 10% decrease in activity, 44% decrease in activity, and 10% decrease in activity. The activity of GR binding in nuclear extracts of 38B9 cells was detected and the activity of anti-GR antibody disappeared. The expression of IL-7R in KKF cells was enhanced after treatment with different concentrations of IL-7. The above results show that IL-7R α gene expression is induced in the medium, PU.1 and GR are important in the medium.

项目成果

Watanabe, N: "Activation and differentiation of autoreactive B-1 cells by interleukin-10 induce autoimmune hemolytic anemia in Fas-deficient anti-erythrocyte imniunoglobulin transgenic mice"J. Exp. Med.. 196. 141-146 (2002)

Watanabe, N：“白细胞介素 10 对自身反应性 B-1 细胞的激活和分化会在 Fas 缺陷型抗红细胞免疫球蛋白转基因小鼠中诱导自身免疫性溶血性贫血”J。

Han, H.: "Inducible gene knockout of transcription factor recombination signal binding protein-J reveals its essential role in T versus B lineage decision."Int.Immunol.. 14. 637-645 (2002)

Han, H.：“转录因子重组信号结合蛋白-J 的诱导基因敲除揭示了其在 T 与 B 谱系决定中的重要作用。”Int.Immunol.. 14. 637-645 (2002)

Lahn, M.: "MHC class I-dependent Vγ4+ pulmonary T cells regulate αβ T cell-independent airway responsiveness."Proc.Natl.Acad.Sci.USA.. 99. 8850-8855 (2002)

Lahn, M.：“MHC I 类依赖性 Vγ4+ 肺 T 细胞调节 αβ T 细胞独立的气道反应性。”Proc.Natl.Acad.Sci.USA.. 99. 8850-8855 (2002)

Watanabe, N.: "Elimination of local macrophages in intestine prevents chronic colitis in interleukin-10 deficient mice."Dig.Dis.Sci.. 48. 408-418 (2003)

Watanabe, N.：“消除肠道中的局部巨噬细胞可预防白细胞介素 10 缺陷小鼠的慢性结肠炎。”Dig.Dis.Sci.. 48. 408-418 (2003)

Kim-Saijo, M.: "Generation of a transgenic animal model of hyperthyroid Graves' disease."Eur.J.Immunol.. 33. 2531-2538 (2003)

Kim-Saijo, M.：“甲状腺功能亢进格雷夫斯病转基因动物模型的生成。”Eur.J.Immunol.. 33. 2531-2538 (2003)