獲得免疫の成立過程におけるIL-7レセプターの機能

IL-7受体在获得性免疫建立过程中的作用

• 批准号: 14021050
• 负责人: 生田 宏一
• 金额: $ 3.84万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14021050/
• 关键词: サイトカインレセプター; インターロイキン7; T細胞; T細胞抗原受容体; 転写; シグナル伝達

本研究の目的は、末梢T細胞がTCRからの刺激を受けた後にIL-7Rの発現が低下する分子機構を解明することにある。まず、末梢のT細胞におけるIL-7Rの発現の動態を調べた。正常マウスの脾臓T細胞を抗CD4・抗CD8・抗IL-7R抗体を用いて染色し、フローサイトメトリーにて解析した。その結果、CD4T細胞およびCD8T細胞のいずれの分画においても大部分の細胞がIL-7Rを発現していた。次に、TCR刺激後のIL-7Rの発現の変化を調べた。脾臓T細胞を固相化抗CD3抗体で刺激し、16時間後に細胞を回収し解析した。その結果、刺激しない細胞ではIL-7Rが高いレベルで発現していたが、抗CD3抗体で刺激した細胞ではIL-7Rの発現がほとんど見られなかった。同様の結果は、胸腺細胞においても認められた。胸腺細胞の各分画におけるIL-7Rの発現を解析すると、IL-7RはCD4(-)CD8(-)DN分画とSP分画で発現していたが、DP分画ではまったく発現が見られなかった。さらに、RAG2ノックアウトに抗CD3抗体を投与すると、4日後に胸腺細胞がDN分画からDP分画へと進むにつれ、IL-7Rの発現も消失した。以上のことから、プレTCR/TCRシグナルによってIL-7Rの発現が低下することが示された。次に、このIL-7Rの発現の低下がどのレベルで起こっているかを明らかにする目的で、IL-7Rα鎖の転写を調べた。胸腺細胞の各分画を磁気ビーズとセルソーターを用いて単離し、半定量的RT-PCR法にてmRNAのレベルを解析した。その結果、IL-7Rα鎖のmRNAがDP分画で顕著に低下していることが明らかになった。以上の結果から、プレTCR/TCRシグナルによってIL-7Rの発現が低下し、それが転写のレベルで誘導されることが明らかとなった。現在、IL-7Rα鎖遺伝子のプロモーター領域の機能解析を進めている。

The aim of this study was to elucidate the molecular mechanisms underlying IL-7R expression after TCR stimulation in peripheral T cells. The dynamics of IL-7R expression in peripheral T cells are modulated. Normal T cells were analyzed with anti-CD4, anti-CD8 and anti-IL-7R antibodies. As a result, CD4 T cells and CD8 T cells were isolated and most of them expressed IL-7R. The expression of IL-7R was modulated by TCR stimulation. The spleen T cells were stimulated by immobilized anti-CD3 antibodies and analyzed 16 hours later. As a result, IL-7R levels were elevated in cells stimulated by anti-CD3 antibodies, and IL-7R levels were elevated in cells stimulated by anti-CD3 antibodies. The same result, thymocytes in the middle of the recognition. IL-7R was detected in thymocytes by CD4 (-) CD8 (-)DN and SP analysis, and IL-7R was detected by DP analysis. In addition, RAG2 was not detected when anti-CD3 antibody was administered, and 4 days later, the expression of IL-7R in thymocytes disappeared. The expression of IL-7R is shown in the following ways: In addition, IL-7R's development has been reduced, and IL-7R α's development has been adjusted. The expression of mRNA in thymocytes was analyzed by semi-quantitative RT-PCR. As a result, IL-7R α mRNA was expressed in DP fragments. As a result, the expression of IL-7R was significantly lower than that of IL-7R. Now, IL-7Rα lock vector function analysis of the field to advance

项目成果

Watanabe, N.: "Activation and differentiation of autoreactive B-1 cells by interleukin-10 induce autoimmune hemolytic anemia in Fas-deficient anti-erythrocyte immunoglobulin transgenic mice."J.Exp.Med.. 196. 141-146 (2002)

Watanabe, N.：“白细胞介素 10 对自身反应性 B-1 细胞的激活和分化在 Fas 缺陷型抗红细胞免疫球蛋白转基因小鼠中诱导自身免疫性溶血性贫血。”J.Exp.Med.. 196. 141-146 (2002)

Han, H.: "Inducible gene knockout of transcription factor recombination signal binding protein-J reveals its essential role in T versus B lineage decision."Int.Immunol.. 14. 637-645 (2002)

Han, H.：“转录因子重组信号结合蛋白-J 的诱导基因敲除揭示了其在 T 与 B 谱系决定中的重要作用。”Int.Immunol.. 14. 637-645 (2002)

Lee, H.-C.: "Seeding of dendritic epidermal T cells in the neonatal skin is reduced in 129 strain of mice."Immunol.Lett.. 81. 211-216 (2002)

Lee, H.-C.：“129 品系小鼠中，新生皮肤中树突状表皮 T 细胞的接种量减少。”Immunol.Lett.. 81. 211-216 (2002)