メモリーB細胞分化の分子機構の解析

记忆B细胞分化的分子机制分析

• 批准号: 08282204
• 负责人: 徳久 剛史
• 金额: $ 1.92万
• 依托单位: Chiba University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08282204/
• 关键词: c-Fos; メモリーB細胞; トランスジェニックマウス; アポトーシス; クラススイッチ; BCL6; ノックアウトマウス; 胚中心

本研究は、メモリーB細胞の分化機構を転写因子(c-FosやBCL6遺伝子)のレベルで明らかにすることを目的とした。リンパ球の活性化のプロセスで一過性に誘導されるc-Fosを経常的に発現するトランスジェニック(H2-c-fos)マウスでは、IgGメモリーB細胞の分化が障害されていた。そこで、免疫後のH2-c-fosマウスの脾臓を病理組織学的に解析したところ、その胚中心内にあるB細胞のなかでIgG^+B細胞の分化が認められなかった。このことから、c-FosによるIgGメモリーB細胞の分化障害は、そのクラススイッチ過程にあることが示唆された。そこでつぎに、H2-c-fosマウス由来のB細胞のクラススイッチ能をIn vitro系でLPSとIL-4を用いて詳細に解析したところ、H2-c-fosB細胞がクラススイッチ過程でアポトーシスで死滅することを明らかにした。以上の結果から、c-FosがIgクラススイッチを介したメモリーB細胞の分化機構にアポトーシス誘導を介して負の方向に関与をしていることが示唆された。また、最近ヒトのB細胞リンフォーマの染色体転座部位から単離されたBCL6遺伝子がヒトの扁桃腺の胚中心の細胞で強く発現することが明らかにされた。そこで、不活性型のマウスBCL6遺伝子をES細胞に導入して、BCL6のノックアウトマウスを作製した。このマウスは、生後8週以内に心筋細胞の懐死をおこして死亡してしまう(投稿中)ので、このノックアウトマウス由来の骨髄細胞を放射線照射したrag-1ノックアウトマウスに移植して骨髄キメラを作製した。このキメラマウスを抗原で免疫した後、胚中心の形成能を病理組織学的に解析したところ、免疫後いずれの時期においても胚中心の形成が見られなかった(投稿中)。以上の研究成果からBCL6は胚中心の形成において必須の遺伝子であることが明らかとなった。

は, this study メ モ リ ー B cells の institutions を planning write factor (c - Fos や BCL6 heritage 伝) の レ ベ ル で Ming ら か に す る こ と を purpose と し た. リ ン パ ball の activeness の プ ロ セ ス で induced transient に さ れ る - c Fos を 経 regular に 発 now す る ト ラ ン ス ジ ェ ニ ッ ク (H2 - c - Fos) マ ウ ス で は, IgG メ モ リ ー B cells の が handicap of さ れ て い た. After そ こ で, immune の H2 - c - fos マ ウ ス の splenic を pathological histology of analytical し に た と こ ろ, そ の germinal center in に あ る B cells の な か で IgG ^ + B cells の が recognize め ら れ な か っ た. こ の こ と か ら, c Fos に よ る IgG メ モ リ ー の B cell differentiation handicap of は, そ の ク ラ ス ス イ ッ チ process に あ る こ と が in stopping さ れ た. そ こ で つ ぎ に, H2 - c - fos マ ウ ス origin の B cells の ク ラ ス ス イ ッ チ can を the In vitro system で LPS と IL - 4 を with い て detailed analytical し に た と こ ろ, H2 - c - fosB cells が ク ラ ス ス イ ッ チ process で ア ポ ト ー シ ス で die out す る こ と を Ming ら か に し た. の above results か ら, c Fos が Ig ク ラ ス ス イ ッ チ を interface し た メ モ リ ー B cells の institutions に ア ポ ト ー シ ス induced を interface し て negative の direction に masato and を し て い る こ と が in stopping さ れ た. ま た, recently ヒ ト の B cells リ ン フ ォ ー マ の chromosome planning a part か ら 単 from さ れ た BCL6 posthumous son 伝 が ヒ ト の tonsils の germinal center の cells で strong く 発 now す る こ と が Ming ら か に さ れ た. そ こ で type, not active の マ ウ ス BCL6 heritage 伝 を ES cells に import し て, BCL6 の ノ ッ ク ア ウ ト マ ウ ス を cropping し た. こ の マ ウ ス は, 8 weeks after birth に heart muscle cells の 懐 die を お こ し て death し て し ま う (contribute) の で, こ の ノ ッ ク ア ウ ト マ ウ ス origin の bone marrow cells を radiation し た rag - 1 ノ ッ ク ア ウ ト マ ウ ス に transplantation し て bone marrow キ メ ラ を cropping し た. こ の キ メ ラ マ ウ ス で を antigen immune し た, germinal center の formed after can を pathological histology of analytical し に た と こ ろ, immune after い ず れ の period に お い て も germinal center の form が see ら れ な か っ た (contribute). The above <s:1> research results ら らBCL6 となった embryo center <e:1> formation にお て て must leave 伝 offspring である とが とが とが ら ら となった となった.

项目成果

Taniguchi,M: "Essential requirement of an invariant Va14 TCR expression in the development of NK T cells." Proc.Natul.Acad.Sci.US.93. 11025-11028 (1996)

Taniguchi,M：“NK T 细胞发育过程中恒定 Va14 TCR 表达的基本要求。”

Hu,L: "Overexpression of c-Fos induces apoptosis of CD-43^+ pro-B cells." J.Immunol. 157. 3804-3811 (1996)

Hu,L：“c-Fos 的过度表达会诱导 CD-43^ pro-B 细胞凋亡。”

Yoshida,T: "The BCL6 gene is predominantly expressed in keratinocytes at terminal differentiation stage." Biochem.Biophys.Res.Commun.228. 216-220 (1996)

Yoshida,T：“BCL6 基因主要在终末分化阶段的角质形成细胞中表达。”

Masuda,K: "Phenotypes and invariant ab T cell antigen receptor expression of peripheral Va14+ NK T cells." J.Immunol. (1997)

Masuda,K：“外周 Va14 NK T 细胞的表型和不变的 ab T 细胞抗原受体表达。”

Imoto,S: "A regulatory role of c-Fos in the development of precursor Blymphocytes mediated by interleukin-7." Cell.Immunol. 169. 67-74 (1996)

Imoto,S：“c-Fos 在白细胞介素 7 介导的前体 B 淋巴细胞发育中的调节作用。”