ヒト脳由来の新規神経保護活性物質の探索

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アルツハイマー病(AD)、パーキンソン病、脊髄小脳変性症、筋萎縮性側索硬化症などの神経難病に共通の解決すべき最大の問題は、神経細胞が変性し、神経細胞死に至る機序の解明とともに、この神経細胞の変性を防止し、神経細胞死を予防する方法の開拓である。本研究では、in vitroの神経細胞死モデルをスクリーニング系として用い、ヒト脳より新規の神経保護活性物質の単離を試みた。ラット初代培養中脳神経細胞を用いたスクリーニングバイオアッセイ系を確立した。培養細胞を定法により4日間維持し、その後4日間血清不含培地にヒト脳抽出物を添加した。細胞固定後ドパミン(DA)ニューロン、非DAニューロンの生存率を検定した。DAニューロン:正常ヒト脳由来試料添加群では1-3μg protein/mlの低濃度投与で生存率が低下し、10μg protein/ml以上の高濃度では生存率はほとんど低下しなかった。一方、AD脳由来試料添加群では、低濃度側で生存率が若干増加する傾向を示し、高濃度になるにつれ生存率が減少する傾向を示した。3μg protein/mlの濃度でAD脳由来試料添加群の生存率が正常ヒト脳由来試料添加群と比較して有意な高値を示した。非DAニューロン:正常ヒト脳由来試料添加群、AD脳由来試料添加群ともに1μg protein/mlの低濃度投与で生存率が低下し、濃度をあげると生存率が回復し、さらに濃度をあげると著しい生存率の低下が認められた。AD脳由来試料添加群では30μg protein/mlから生存率が低下し、正常ヒト脳由来試料添加群と有意な差が認められた。以上の結果から、培養中脳細胞において、AD脳由来抽出物中にDAニューロンに対して生存促進作用のある物質が存在する可能性が示唆された。今後、この物質を同定し、既知の脳由来神経栄養因子とは異なる新たな神経保護活性物質であるか否かの検討を要する