T細胞型造血器腫瘍でみられる染色体転座に関連する遺伝子の基礎的研究

T细胞造血肿瘤染色体易位相关基因的基础研究

• 批准号: 05152024
• 负责人: 林 泰秀
• 金额: $ 1.92万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Cancer Research
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05152024/
• 关键词: 急性白血病; 染色体転座; 癌遺伝子; 癌関連遺伝子

T細胞受容体(TCR)の転座によると思われる再構成がみられたt(1;7)(p13;q35)-ALLの細胞株より、1p13に想定される癌関連遺伝子をクロ-ニングするためDNAライブラリ-を作成した。TCR-βをプロ-ブにして切断点を含むDNA断片のスクリ-ニングを行い、とれた陽性クロ-ンが雑種細胞により1番染色体の断片を含むことを確認した。また1p13にあるか否かを検討するためfluorescense in situ hybridization(FISH)法で座位を検討している。この1番側から取れた0.8kbの遺伝子は普通の制限酵素の切断点を持たない繰り返し配列が多いイントロンと思われた。現在、gene walking法により1p13の転写因子を検索している。また染色体11q23転座でみいだされたMLL遺伝子が入取できたので、11q23転座型白血病の25例でMLL遺伝子を検討したところ、全例に再構成バンドが認められた。また乳児白血病27例中20例(74%)で再構成がみられ、染色体による解析(約50%)より高頻度であった。転座の相手の判明しているt(4;11)、t(9;11)そしてt(11;19)の切断点をはさむプライマ-を作成し、RT-PCR法を用いて微小残存白血病の追跡が可能であり、5例で経時的に追跡できた。我々はt(1;11)(q21;q23)、t(5;11)(q34;q23)およびt(4;6)とt(8;11)をもつ細胞を有しており、DNAのサザン解析にて再構成を認めたことより、相手遺伝子のクロ-ニングを試みた。まずt(4;6)とt(8;11)細胞よりmRNAを抽出し、MLL遺伝子を用いて転座相手のクロ-ニングを行った。MLL遺伝子を含むキメラcDNAがとれ、とれた相手がシ-クエンスより6q27に最近見つかったAF6遺伝子で、逆側が未知の遺伝子であることが判明した。t(4;6;8;11)の4way転座の可能性が考えられ、現在、4q21と8q24の遺伝子のクロ-ニングを行っているところである。

T cell receptor (TCR) is composed of T(1;7)(p13;q35)-ALL cell lines. TCR-β gene fragments were identified at the cleavage sites, including DNA fragments. fluorescense in situ hybridization(FISH) method This is a 0.8kb DNA fragment that contains a common restriction enzyme. Now, gene walking method for 1p13 and write factor search. 25 cases of MLL gene at chromosome 11q23 locus were examined and reconstructed. In 27 cases of breast leukemia, 20 cases (74%) were reconstructed and chromosome analysis was performed (about 50%). The detection of the phase difference between t(4;11), t(9;11) and t(11;19) was carried out. RT-PCR was used to detect the trace of minimal residual leukemia. I am not t(1;11)(q21;q23), t(5;11)(q34;q23) t(4;6) t(8;11) T(4;6) and T(8;11) cell lines were isolated and MLL genes were used in cell lines. MLL gene contains cDNA, which is the most recent gene, AF6 gene, which is the reverse gene. t(4;6;8;11) 4-way seat possibility is examined, present, 4q21, 8q24, and the son of the left is examined, and the son of the right is examined.

项目成果

Shimizu,K.: "An ets-related gene,ERG,is rearranged in human myeloid leukemia with t(16;21)chromosomal translocation." Proc Natl Acad Sci USA. 90. 10280-10284 (1993)

Shimizu, K.：“ET 相关基因 ERG 在人类髓系白血病中通过 t(16;21) 染色体易位进行重排。”

Komuro,H.: "Mutations of the p53 gene are involved in Ewings sarcomas but not in neuroblastomas." Cancer Res. 53. 5284-5288 (1993)

Komuro,H.：“p53 基因突变与尤文氏肉瘤有关，但与神经母细胞瘤无关。”

Miyashita,T: "Molecular diversion of dominant subclones in vivo and in vitro in Ph-positive ALL." Leukemia. 7. 586-592 (1993)

Miyashita,T：“Ph 阳性 ALL 体内和体外显性亚克隆的分子转移。”

Sato,S.: "Effects of herbimycin A and its derivatives on growth and differentiation of Philadelphia chromosome-positive acute lymphoid leukemia cell lines." Leukemia Res. (in press).

Sato,S.：“除草霉素 A 及其衍生物对费城染色体阳性急性淋巴细胞白血病细胞系生长和分化的影响。”

Kikuchi,A: "Clinical significance of TAL1 gene alteration in childhood T-cell acute lymphoblastic leukemia and lymphoma." Leukemia. 7. 946-953 (1993)

Kikuchi,A：“TAL1 基因改变在儿童 T 细胞急性淋巴细胞白血病和淋巴瘤中的临床意义。”