ストローマ細胞と細胞外マトリックス分子を介した造血調節の分子機構

基质细胞和细胞外基质分子介导的造血调节的分子机制

• 批准号: 08671229
• 负责人: 金倉 譲
• 金额: $ 1.54万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08671229/
• 关键词: 造血幹細胞; 細胞外マトリックス; フィブロネクチン; インテグリン; アポトーシス; 増殖; シグナル伝達

造血幹細胞の造血組織における定着、あるいは、増殖・分化・生存・死などの細胞現象は、造血幹細胞周囲に存在するストローマ細胞や細胞外マトリックスにより制御されている。我々は、細胞外マトリックスの一分子であるフィブロネクチンがインテグリンVLA-^5を介して血球のアポトーシスを誘導し細胞増殖を抑制するという興味ある知見を得た。このフィブロネクチンがVLA-^5を介して血球のアポトーシスを誘導する事を直接的に証明するため、フィブロネクチンでアポトーシスが誘導されないVLA^4陽性VLA^5陰性(α_4^+α_5^-β_1^+)細胞株BALLへα_5遺伝子を導入し、VLA^4陽性VLA^5陽性BALL細胞を樹立した。このVLA-^5陽性BALL細胞をフィブロネクチンで刺激するとアポトーシスが誘導された。このフィブロネクチン/VL-^5を介したアポトーシスには、bcl-^2やICEは関与していないと考えられた。一方、正常造血幹細胞は、VLA-^4強陽性であるが、VLA-^5は極めて軽度にしか発現されていなかった。この造血幹細胞を無血清下に培養すると生存造血幹細胞の数は徐々に減少したが、フィブロネクチン添加により造血幹細胞の死滅が抑制された。さらに、各種ヒトVLA-^4陽性VLA-^5陰性細胞株をフィブロネクチンとともに培養すると、いずれの細胞株でも増殖は抑制されず、一部の細胞株では増殖の促進された。以上の結果より、ヒト血球に対して、フィブロネクチンはVLA-^4を介して生存や増殖を支持するシグナルを伝達し、VLA-^5を介しては死や増殖抑制のシグナルを伝達すると考えられる。

Hematopoietic stem cell の hematopoietic tissue に お け る fixed on, あ る い は, raised colonization, differentiation, survival, death な ど phenomenon は の cells, hematopoietic stem cells weeks 囲 に exist す る ス ト ロ ー マ cells や extracellular マ ト リ ッ ク ス に よ り suppression さ れ て い る. I 々 は, extracellular マ ト リ ッ ク ス の a molecular で あ る フ ィ ブ ロ ネ ク チ ン が イ ン テ グ リ ン VLA - ^ 5 を interface し て blood の ア ポ ト ー シ ス を induced し を inhibit cell raised colonization す る と い う tumblers あ る knowledge を た. こ の フ ィ ブ ロ ネ ク チ ン が VLA - ^ 5 を interface し て blood の ア ポ ト ー シ ス を induced す を る things directly に prove す る た め, フ ィ ブ ロ ネ ク チ ン で ア ポ ト ー シ ス が induced さ れ な い VLA ^ 4 positive VLA ^ 5 negative (alpha _4 alpha _5 ^ + ^ - beta _1 ^ +) cell line BALL へ alpha _5 heritage 伝 を import し, VLA^4 positive and VLA^5 positive BALL cells を establish a culture た. <s:1> VLA-^5 positive BALL cells をフィブロネ チ チ で で で で stimulation するとアポト シスが シスが シスが induction された. こ の フ ィ ブ ロ ネ ク チ ン / VL - ^ 5 を interface し た ア ポ ト ー シ ス に は, BCL - ^ 2 や ICE は masato and し て い な い と exam え ら れ た. Side, normal hematopoietic stem cell は, VLA - ^ 4 strong positive で あ る が, VLA - ^ 5 は め て 軽 degrees に し か 発 now さ れ て い な か っ た. こ の hematopoietic stem cells を に under serum-free culture す る と survival number of hematopoietic stem cell の は xu 々 に reduce し た が, フ ィ ブ ロ ネ ク チ ン add に よ の り hematopoietic stem cells die out が inhibit さ れ た. さ ら に, various ヒ ト VLA - ^ 4 positive VLA - ^ 5 negative cell line を フ ィ ブ ロ ネ ク チ ン と と も に cultivate す る と, い ず れ の cell lines で も raised colonization は inhibit さ れ ず, a の cell lines で は raised colonization の promote さ れ た. の above results よ り, ヒ ト blood に し seaborne て, フ ィ ブ ロ ネ ク チ ン は VLA - ^ 4 を interface し や て survival rights colonization を support す る シ グ ナ ル を 伝 し, VLA - ^ 5 を interface し て は suppress dead や raised colonization の シ グ ナ ル を 伝 da す る と exam え ら れ る.

项目成果

Kanakura,Y.,Ikeda,H.,et al.: "The c-kit receptor tyrosine kinase:its role in hematological malignancies" Cancer J.9. 79-82 (1996)

Kanakura,Y.,Ikeda,H.,et al.：“c-kit 受体酪氨酸激酶：其在血液恶性肿瘤中的作用”Cancer J.9。

Matsumura,I.,Kanakura,Y.,et al.: "The biological properties of human recombinant thrombopoietin in the proliferation and megakaryocytic differentiation of acute myeloblastic leukemia cells" Blood. 88. 3074-3082 (1996)

Matsumura，I.，Kanakura，Y.，等人：“人重组血小板生成素在急性髓细胞白血病细胞增殖和巨核细胞分化中的生物学特性”血液。

Moriyama,Y.,Kanakura,Y.,et al.: "Role of aspartic acid 814 in the function and expression of c-kit receptor tyrosine kinase" J.Biol.Chem.271. 3347-3350 (1996)

Moriyama,Y.,Kanakura,Y.,et al.：“天冬氨酸 814 在 c-kit 受体酪氨酸激酶的功能和表达中的作用”J.Biol.Chem.271。

Kitayama,H.,Kanakura,Y.,et al.: "Neoplastic transformation of normal hematopoietic cells by constitutively activating mutation of c-kit receptor tyrosine kinase" Blood. 88. 995-1004 (1996)

Kitayama, H., Kanakura, Y., et al.：“通过组成性激活 c-kit 受体酪氨酸激酶突变来实现正常造血细胞的肿瘤转化”血液。

Matsumura,I.,Kanakura,Y.,et al.: "Thrombopoietin-induced differentiation of a human megakaryoblastic leukemia cell line CMK involves transcriptional activation of p21^<WAF1/Cip1> by STAT5" Mol.Cell.Biol.(in press). (1997)

Matsumura,I.,Kanakura,Y.,et al.：“血小板生成素诱导的人巨核细胞白血病细胞系 CMK 的分化涉及 STAT5 对 p21^<WAF1/Cip1> 的转录激活”Mol.Cell.Biol.（出版中）