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レトロウイルス・ベクターを用いた.新たなトランスジュンック動物作成方法の開発

レトロウイルス・ベクターを用いた.新たなトランスジュンック動物作成方法の開発
开发使用逆转录病毒载体创建转接动物的新方法
批准号：
12877255
负责人：
藤田 潤
金额：
$1.22万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2000
资助国家：
日本
项目状态：
已结题
起止时间：
2000 至 --
来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12877255/
关键词：
精巣レトロウイルスベクター精子形成

项目摘要

项目成果

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我々は、レトロウイルス・ベクターの安全性を確認する中で、(1)マウス精子形成細胞株に、レトロウイルスのレセプターが表出していることを見いだした。(2)レトロウイルス・ベクターを用いれば、この精子形成細胞株に遺伝子を導入し、発現させることが可能であった。(3)遺伝子発現に適した、レトロウイルス.ベクターの基本構造を確定させた。(4)マウスの正常精巣でも、同様に、レトロウイルスのレセプターが表出していることを確認した。これらのことから、レトロウイルス・ベクターにより生体内で精子形成細胞に遺伝子を導入して、トランスジェニック動物作成の新たな方法を確立しようと考えた。まずマーカー遺伝子を組み込んだレトロウイルス・ベクターのプラスミドを作成し、感染性ベクターを得た。次いで、感染性ベクターを含む培養上清をマウス精巣内に注入後、マーカー遺伝子の発現を組織染色で調べた。しかし間質細胞への遺伝子導入のみで、マウスの精子形成細胞へのin vivoでの導入は確認できなかった。ブスルファン投与により未分化の精子形成細胞のみとしたが、やはり遺伝子導入は確認できなかった。精細管内に注入を試みたが、発現は認められなかった。精細間に注入する際の手技が適切であったかどうか少し疑問が残っている。同様の実験系により肝臓細胞に至適のレトロウイルスを作成し、マウス肝臓に注入したところ、この場合には発現が認められた。
期刊论文(2)
专著(0)
科研奖励(0)
会议论文
Danno,S: "Decreased expression of mouse rbm3 a cold shock protein, in Sertoli cells of cryptorckid testis"American J.Pathology. 156. 1685-1692 (2000)
Danno,S：“隐睾睾丸支持细胞中小鼠 rbm3 冷休克蛋白表达降低”美国病理学杂志。
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
Tsuji, T: "Retroviral vector-mediated gene expression in human CD34^+CD38^- cells expand in vitro : cis-elements of FMEV are superior to those of MDMLV"Human Gene Therapy. 11. 271-284 (2000)
Tsuji, T：“人类 CD34^ CD38^- 细胞中逆转录病毒载体介导的基因表达在体外扩增：FMEV 的顺式元件优于 MDMLV”人类基因疗法。
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
低温ショック蛋白質が精巣の病態を悪化させる可能性の検討
  • 批准号：
    15K10639
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
  • 资助金额：
    $3.16万
  • 财政年份：
    2015
  • 负责人：
    藤田 潤
  • 依托单位：
    Kyoto University
ガンキリンによる肝細胞のがん化機構を基盤としたがん治療薬の開発
  • 批准号：
    20015020
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
  • 资助金额：
    $7.1万
  • 财政年份：
    2008
  • 负责人：
    藤田 潤
  • 依托单位：
    Kyoto University
軽度の低温環境に特異的な生体防御機構に関する研究
  • 批准号：
    20659060
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
  • 资助金额：
    $2.11万
  • 财政年份：
    2008
  • 负责人：
    藤田 潤
  • 依托单位：
    Kyoto University
哺乳類精巣の存在する軽度低温環境でのストレス応答に関する研究
  • 批准号：
    07F07799
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for JSPS Fellows
  • 资助金额：
    $1.47万
  • 财政年份：
    2007
  • 负责人：
    藤田 潤
  • 依托单位：
    Kyoto University
海外基金