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レトロウイルス・ベクターを用いた.新たなトランスジュンック動物作成方法の開発

开发使用逆转录病毒载体创建转接动物的新方法

基本信息

批准号：
12877255
负责人：
藤田潤
金额：
$ 1.22万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2000
资助国家：
日本
起止时间：
2000 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12877255/
关键词：
精巣レトロウイルスベクター精子形成

项目摘要

我々は、レトロウイルス・ベクターの安全性を確認する中で、(1)マウス精子形成細胞株に、レトロウイルスのレセプターが表出していることを見いだした。(2)レトロウイルス・ベクターを用いれば、この精子形成細胞株に遺伝子を導入し、発現させることが可能であった。(3)遺伝子発現に適した、レトロウイルス.ベクターの基本構造を確定させた。(4)マウスの正常精巣でも、同様に、レトロウイルスのレセプターが表出していることを確認した。これらのことから、レトロウイルス・ベクターにより生体内で精子形成細胞に遺伝子を導入して、トランスジェニック動物作成の新たな方法を確立しようと考えた。まずマーカー遺伝子を組み込んだレトロウイルス・ベクターのプラスミドを作成し、感染性ベクターを得た。次いで、感染性ベクターを含む培養上清をマウス精巣内に注入後、マーカー遺伝子の発現を組織染色で調べた。しかし間質細胞への遺伝子導入のみで、マウスの精子形成細胞へのin vivoでの導入は確認できなかった。ブスルファン投与により未分化の精子形成細胞のみとしたが、やはり遺伝子導入は確認できなかった。精細管内に注入を試みたが、発現は認められなかった。精細間に注入する際の手技が適切であったかどうか少し疑問が残っている。同様の実験系により肝臓細胞に至適のレトロウイルスを作成し、マウス肝臓に注入したところ、この場合には発現が認められた。

We are pleased to confirm the safety of the sperm cell line (1) and the sperm cell line (2). (2)It is possible to introduce and develop genes into spermatogenic cell lines. (3)It's the first time I've seen it. The basic structure of the structure is determined. (4)It's normal to have sex, to have sex. A new method for producing sperm cells in vivo was established. The name of the person who created it, the name of the person who created it, the name of the person who created it. After injection into the culture supernatant, the development of the infectious virus was modulated by tissue staining. The introduction of stromal cells into sperm cells in vivo is confirmed. The introduction of undifferentiated sperm cells into the cells was confirmed. The fine tube is injected into the tube, and the liquid is recovered. Fine time to inject inter-hand skills into the right place. In the same way, the liver cells are injected into the liver and the liver cells are injected into the liver.