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哺乳類細胞における低温ストレス応答の解析

哺乳动物细胞冷应激反应分析

基本信息

批准号：
09877003
负责人：
藤田潤
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
1997
资助国家：
日本
起止时间：
1997 至 1998
项目状态：
已结题

项目摘要

生物は一般に環境の温度変化に適応する能力をもっている。哺乳類細胞において、熱ショックに対する応答は研究されているが、低温ストレス応答についてはほとんど報告がない。しかし、下等生物では低温ショック蛋白等が報告されており、哺乳類にも類似の応答機構が存在する可能性がある。そこで哺乳類細胞で低温(32℃)で誘導される遺伝子を、分子生物学的方法でできるだけたくさん同定することを試みた。また脳で恒常的に発現の見られるCIRPについては、その機能を解析した。1.ヒト血管内皮細胞株を37℃と32℃で培養する。それぞれからRNAを抽出して、プローブとし、DNAチップにより約10,000個の遺伝子発現を比較した。32℃で発現の冗進している遺伝子について解析中である。2.既報のごとくcDNAサブトラクション法で、32℃特異的に脳低体温療法モデルラットで発現している遺伝子cDNAをクローニング中である。3.マウスrbm3のcDNAをクローニングした。32度で発現が誘導される低温ショック蛋白であった。精巣のセルトリ細胞では恒常的に発現していて、実験的停留精巣では発現が減少した。4.低温ショック蛋白cirp,rbm3その他遺伝子を強制発現させるために、レトロウイルスに組み込んだ。今後、細胞株に発現させて機能を解析する予定である。5.cirpは脳ではでは恒常的に発現しているが発現に日内変動があり、概日リズムに関係している可能性が示唆された。また、低温で発現誘導がかかる機序として、遺伝子のcold responsive elementを同定した。

The ability of organisms to adapt to environmental changes Mammalian cells, heat, and oxygen are studied and reported. It is possible that similar response mechanisms exist in mammals. Mammalian cells are induced by low temperature (32℃), and molecular biology methods are used to determine the temperature. The constant occurrence and analysis of CIRP functions 1. The vascular endothelial cell line was cultured at 37℃ to 32℃. For comparison, approximately 10,000 genetic proteins were found in the RNA extracted from the open source, and the DNA was extracted from the open source. At 32℃, redundancy occurs. 2. It is reported that the cDNA library is used for the treatment of hypothermia at 32℃, and the cDNA library is used for the treatment of hypothermia. 3.マウスrbm3のcDNAをクローニングした。32 ° C induction of low temperature protein. The essence of the cell is not always present, but the essence of the cell is reduced. 4. Cryogenic protein cirp, rbm3 and other proteins are stressed to develop in the following ways: In the future, cell line development and function analysis will be determined. 5. Cirp is not a constant occurrence, but a daily occurrence, and the possibility of a daily occurrence is indicated. The cold responsive element of the seed is also determined.