全能性細胞で特異的に発現する遺伝子群の機能解析

全能细胞特异表达基因的功能分析

• 批准号: 13206054
• 负责人: 山中 伸弥
• 金额: $ 4.16万
• 依托单位: Nara Institute of Science and Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13206054/
• 关键词: エンハンサー解析; ES細胞; 分化全能性; 転写調節

(本研究の目的)ES細胞は高い増殖能と分化全能性を有しており、再生医学への応用も期待されているが、その特性がいかに維持されているかはほとんどわかっていない。本研究ではES細胞で特異的に発現する遺伝子群の網羅的同定および機能解析により、ES細胞が自己複製するメカニズムの解明を目指している。ES細胞と他の臓器細胞由来のESTライブラリーを比較した結果、ES細胞特異的発現が示唆される遺伝子を40以上同定した。ノーザンブロット解析の結果、ホメオボックス転写因子やRas類似蛋白質など9遺伝子についてES細胞特異的発現が確認された。本研究においては、ES細胞特異的発現遺伝子の同定を引き続き進めるとともに、それらの機能を遺伝子ノックアウトにより解析する。またES細胞特異的な遺伝子発現様式がもたらされるメカニズムを解明する。(今年度の成果)遺伝子ノックアウトによる機能解析 平成13年度は2遺伝子についてはホモ変異マウス作成を終了し、現在解析を進めている。1遺伝子についてはヘテロ変異マウスを作成し、現在交配中である。1遺伝子は相同組換えES細胞を樹立し、ブラストシストへの微小注入を行っている。他の2遺伝子についてはターゲティングベクターを作成し、現在ES細胞へ導入中である。ES細胞特異的な発現調節領域の解析 1遺伝子について、ES細胞特異的に発現するために必要なシスエレメントを、レポーター遺伝子を用いた解析により同定した。その結果、転写開始点から約500塩基上流にオクタマー-配列およびSox認識配列が存在しており、転写因子Oct3とSox2が協調して、ES細胞特異的な発現をもたらしていることが明らかとなった。新規遺伝子の同定 今年度はES細胞特異的な発現を示す2遺伝子を新たに同定した。今後これらについても機能解析を進めていく予定である。

(purpose of this study) ES cells can differentiate into totipotent cells, regenerative medicine is used to look forward to the growth, and the characteristics are to be maintained. In this study, the co-subscriber mechanism of the user subgroup network of the ES cell can parse the data, and the ES cell can copy the data to understand the target. The origin of ES cells is different from that of other organs. The results of EST cell tests and the results of ES cell characteristics indicate that the number of children is more than 40%. The results are parsed and the Ras type of the writing factor is similar to that of the protein

项目成果

Yamanaka, S.: "Quantitative assessment of DNA microarrays-Comparison with Northern blot analyses"Genomics. 71. 34-39 (2001)

Yamanaka, S.：“DNA 微阵列的定量评估 - 与 Northern 印迹分析的比较”基因组学。