权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

インターロイキン15を用いた癌免疫療法の開発

使用白细胞介素 15 开发癌症免疫疗法

基本信息

批准号：
13218058
负责人：
吉開泰信
金额：
$ 2.62万
依托单位：
Nagoya University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
财政年份：
2001
资助国家：
日本
起止时间：
2001 至 2002
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13218058/
关键词：
IL-15 メラノーマトランスジェニックマウス遺伝子治療 CD8キラーT細胞

项目摘要

IL-15のメモリーCD^<8+>T細胞の活性化と維持に働く作用に注目して、IL-15の腫瘍免疫療法への応用開発を行う。本年度は分泌型IL-15cDNAマウスにMHCクラスI陰性メラノーマ(B16L)細胞にMHCクラスI H-2Kb遺伝子を導入したMHCクラスI陽性メラノーマ(B16Kb)を5x104を皮下に接種して、腫瘍増殖曲線を調べたところ、腫瘍増殖抑制が認められた。接種10日目の脾臓細胞をさらにマイトマイシン処理B16Kbと5日間in vitro培養して、このメラノーマに対する細胞傷害活性を調べたところ、強い細胞傷害活性が認められた。この細胞傷害活性は脾臓細胞からCD8T細胞を除くと有意に低下したが、完全には抑制されなかった。抗MHCクラスI抗体の添加やcold inhibition testでこの細胞傷害活性は抑制されたが、完全ではなかった。腫瘍接種IL-15Tgマウスに抗CD8抗体を400μgx4回投与で抗腫瘍抑制効果が阻害された。また腫瘍接種IL-15Tgマウスに抗asialoGM1抗体を400μgx4回投与でも抗腫瘍抑制効果が阻害された。一方、抗CD4抗体を400μgx4回投与では抗腫瘍抑制効果は影響されなかった。以上のことから、IL-15の過剰発現はMHCクラスI陽性メラノーマに対してCD8キラーT細胞とNK細胞の活性化によって抗腫瘍効果を示すがことが明かとなった。IL15cDNAをpCR3.1に組み込んだpCR3.1:IL-15プラスミドを作成し、gene gunを用いて4mgのIL-15プラスミドをマウスに毎週投与したところ、脾臓でのCD8T細胞数が有意に増加した。MHCクラスI陽性メラノーマを接種したマウスに同様にIL-15プラスミドを投与したところ、有意に腫瘍の大きさが抑制された。

The role of IL-15 in the activation and maintenance of CD8 + T cells is of great concern, and the development of IL-15 in tumor immunotherapy is under way. This year, the secretory IL-15cDNA was introduced into the MHC I negative control (B16L) cells. The MHC I H-2Kb cDNA was introduced into the MHC I positive control (B16Kb) cells. 10 days after inoculation, spleen cells were cultured in vitro, and the cell injury activity was enhanced. The cellular injury activity of CD8 T cells was intentionally reduced and completely inhibited. The addition of anti-MHC I antibodies to the cold inhibition test results in complete inhibition of cellular injury activity. Anti-CD8 antibody 400μ g x 4 injections of IL-15 and anti-tumor inhibitory effect Anti-tumor GM1 antibody 400μ g x 4 times and anti-tumor inhibitory effect A prescription, anti-CD4 antibody 400μ g x 4 injection and anti-tumor inhibition effect The expression of IL-15 in these cells is related to the activation of CD8 T cells and NK cells and the anti-tumor effect. IL-15 cDNA pCR3.1:IL-15 protein was prepared and gene gun was administered at a dose of 4mg IL-15 protein. The number of CD8 T cells administered weekly was intentionally increased. Similarly, IL-15 overexpression was injected into MHC KRAS I-positive tumors, and the proliferation of intentional tumors was suppressed.