グルタミン酸・ATPによる情報伝達新規調節機構の受容体ノックインマウスによる解析

使用受体敲入小鼠分析谷氨酸和 ATP 信息传递的新调控机制

• 批准号: 16047205
• 负责人: 久保 義弘
• 金额: $ 4.74万
• 依托单位: National Institute for Physiological Sciences
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16047205/
• 关键词: 代謝型グルミン酸受容体; ATP受容体; 遺伝子改変マウス; 情報伝達; スライスパッチクランプ; 代謝型グルタミン酸受容体; ノックインマウス; ES細胞; Gd3+; target vector

我々は、これまでに、代謝型グルタミン酸受容体mGluR1がグルタミン酸のみならず、Gd^<3+>によっても活性化されること、E238Q点変異によりmGluR1のGd^<3+>に対する感受性が完全に失われることを明らかにした。しかし、脳脊髄液中にはGd^<3+>が存在しないので、mGluR1の持つGd^<3+>感受性の生理的意義は不明である。その意義を明らかにするために、饗場研究室と共同でE238Q変異を持つノックインマウスの作成を進めてきた。昨年度樹立した相同組み換え陽性のES細胞株を用い、今年度、まずキメラマウスを作成し、ここからE238Q変異ヘテロのマウスを得ることに成功した。さらに、creマウスとの交配によりneo遺伝子を脱落させた後に、最終的にE238Q変異ホモのマウスを得た。E238Q変異ホモのマウスは、体の大きさ、運動量等に関して際だった異常は示さなかった。今後、行動生理および電気生理の解析を進めていく。一方、我々は、mGluR1の、リガンドの多様性、活性化構造の多様性、出力の多様性に関しても研究を進め、mGluR1を発現させたCHO細胞において、グルタミン酸刺激がGq, Gs両系を活性化するのに対し、Gd^<3+>刺激は、Gq系を選択的に活性化するという知見を得た。これは、mGluR1がシンプルなオン-オフスイッチではなく、複数のパスの切り換え調節器として機能しているという新しい概念を提唱するものである。

I, mGluR1, Gd ^ & lt;3+>, active, sensitive, sensitive, There is an unknown physiological meaning of Gd^ & lt;3+> in the fluid of Gd^ & lt;3+>. The physiological meaning of Gd^ & lt;3+> is unknown. It means that both the E238Q system and the field research lab are responsible for the improvement of the system. Last year, the same ES cell line was used, and this year, it was successfully made, and the success rate of E238Q cell line was improved. Mating, cre, neo, falling off, falling off, and the most successful, E238Q, successful. E238Q

项目成果

Density Dependent Changes of the Pore Properties of P2X_2 Receptor

P2X_2 受体孔性质的密度依赖性变化

• 发表时间: 2004
• 期刊: Journal of Physiology 558
• 作者: Fujiwara;Y.;Kubo;Y.
• 通讯作者: Y.

Functional roles of charged amino acid residues on the wall of the cytoplasmic pore of Kir2.1

• DOI: 10.1085/jgp.200509434
• 发表时间: 2006-04-01
• 期刊: JOURNAL OF GENERAL PHYSIOLOGY
• 影响因子: 3.8
• 作者: Fujiwara, Y;Kubo, Y
• 通讯作者: Kubo, Y

Biochemical and Physiological analyses of the RGS8 function

RGS8功能的生化和生理学分析

• 发表时间: 2004
• 期刊: Methods in Enzymology 390
• 作者: Saitoh;O;Kubo;Y.
• 通讯作者: Y.

Ligand-induced rearrangement of the intracellular dimeric conformation of metabotropic glutamate receptor1a.

配体诱导的代谢型谷氨酸受体 1a 细胞内二聚体构象的重排。

• 发表时间: 2004
• 期刊: Nature Structural & Molecular Biology 11
• 作者: Tateyama;M.;Abe;H.;Nakata;H.;Saitoh;O;Kubo;Y.
• 通讯作者: Y.

OPA1 expression in the normal rat retina and optic nerve

• DOI: 10.1002/cne.20586
• 发表时间: 2005-07-18
• 期刊: JOURNAL OF COMPARATIVE NEUROLOGY
• 影响因子: 2.5
• 作者: Ju, WK;Misaka, T;Bossy-Wetzel, E
• 通讯作者: Bossy-Wetzel, E