家族性大腸腺腫症関連遺伝子の単離と解析

家族性腺瘤性息肉病相关基因的分离与分析

• 批准号: 01015027
• 负责人: 湯浅 保仁
• 金额: $ 3.84万
• 依托单位: Tokyo Medical and Dental University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Cancer Research
• 财政年份: 1989
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1989 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-01015027/
• 关键词: 家族性大腸腺腫症; がん遺伝子; がん抑制遺伝子; 染色体

1.ヒト5番染色体を微小核融合法によりDT細胞(Kーrasがん遺伝子によってがん化した細胞)に導入すると腫瘍原性が低下した。故に、5番染色体にがん抑制遺伝子が存在することが示唆された。腫瘍原性が低下したクローンでは、いずれも5番染色体に存在する“FAP(家族性大腸腺腫症)領域″付近のDNAプローブが陽性だったので、FAP遺伝子が抑制遺伝子である可能性が示唆された。次に、ヒト5番染色体DNAをトランスフェクション法によりDT細胞に導入すると、Alu陽性のフラットリバータントが得られた。第2回トランスフェクションによるフラットリバータントでも、Alu陽性のクローンが1個得られたので、現在この遺伝子をクローニング中である。2.FAP患者細胞DNAをNIH3T3細胞にトランスフェクションした後、ヌードマウスに移植する方法で2例の新しいがん遺伝子を検出した。このうちの1例につきAluをプローブとして部分的にクローニングを行った。さらにノーザンブロット解析によりこのがん遺伝子から2.3kbと1.8kbの2種のRNAができることがわかった。3.ヒト大腸がんでは高率にKーras遺伝子の点突然変異が検出されている。培養ヒト大腸がん細胞及びがん摘出検体を用いて、ras遺伝子の機能に重要な役割を果たすと考えられるras周辺のタンパク質及びそれらの遺伝子について解析を行った。rasのGTPase活性に関与する因子として知られるGAP(GTPaseーactivating protein)にたいするcDNAをプローブとしてがん摘出検体のDNAを調べたところ、遺伝子再配列と考えられる異常が検出された。また、ホスホリパーゼCについては、ある種のアイソザイムについて高いRNAレベルの発現がみとめられ、これらrasタンパク質を介する情報伝達系が大腸がんの発がん機構に関与している可能性が示唆された。

1. ヒ ト's chromosome を tiny nuclear fusion method に よ り DT cells (K ー ras が ん posthumous son 伝 に よ っ て が ん change し た cells) に import す る と swollen sores the original low sexual が し た. Therefore, に and 5x chromosome にがん inhibitory progeny 伝 exist する とが とが とが suggest された. Swollen sores the original low sexual が し た ク ロ ー ン で は, い ず れ も's chromosome に exist す る "FAP swollen syndrome (familial large adenomas) areas" paying nearly の DNA プ ロ ー ブ が positive だ っ た の で, traces of FAP 伝 child が inhibition but 伝 で あ が る possibility in stopping さ れ た. に, ヒ ト's chromosome DNA を ト ラ ン ス フ ェ ク シ ョ ン method に よ り DT cells に import す る と, Alu positive の フ ラ ッ ト リ バ ー タ ン ト が must ら れ た. 2 back ト ラ ン ス フ ェ ク シ ョ ン に よ る フ ラ ッ ト リ バ ー タ ン ト で も, Alu positive の ク ロ ー ン が 1 have to ら れ た の で, now こ の heritage 伝 son を ク ロ ー ニ ン グ in で あ る. 2. Patients with FAP cell DNA を NIH3T3 cells に ト ラ ン ス フ ェ ク シ ョ ン し た, ヌ ー ド マ ウ ス に transplantation す る method 2 で の new し い が ん heritage 伝 son を 検 out し た. 1 こ の う ち の に つ き Alu を プ ロ ー ブ と し て part of に ク ロ ー ニ ン グ を line っ た. さ ら に ノ ー ザ ン ブ ロ ッ ト parsing に よ り こ の が ん posthumous son 伝 か ら 2.3 KB of 1.8 KB と の two の RNA が で き る こ と が わ か っ た. 3. The ヒト large intestine がんで がんで has a high rate of にK <s:1> ras remnant 伝 points, and suddenly changes が検 out されて る る. Cultivate ヒ ト e. が ん cells and び が ん pick the を 検 body with い て, ras but 伝 の function に important な "を cut fruit た す と exam え ら れ る ras weeks 辺 の タ ン パ ク qualitative and び そ れ ら の heritage 伝 son に つ い analytical line を っ て た. Ras の GTPase activity に masato and す る factor と し て know ら れ る GAP (GTPase ー activating protein) に た い す る cDNA を プ ロ ー ブ と し て が ん の DNA extraction 検 body を adjustable べ た と こ ろ, heritage 伝 with sequence と exam え ら れ る abnormal が 検 out さ れ た. ま た, ホ ス ホ リ パ ー ゼ C に つ い て は, あ る kind の ア イ ソ ザ イ ム に つ い て high い RNA レ ベ ル の 発 now が み と め ら れ, こ れ ら ras タ ン パ ク qualitative を interface す る intelligence 伝 da system が e. が ん の 発 が ん institutions に masato and し て い が る possibility in stopping さ れ た.

项目成果

Y.Yuaca et al.: "Alterations of mouse proto-oncogenes in sarcomas induced after transplantation of human tumors in athymic nude mice." Japanese Journal of Cancer Research.

Y.Yuaca 等人：“将人类肿瘤移植到无胸腺裸鼠后，诱导肉瘤中小鼠原癌基因的改变。”

岩間毅夫: "新消化器病学〔I〕消化管" 医学書院, 756-768 (1989)

岩间武雄：《新胃肠病学 [I] 胃肠道》 Igakushoin，756-768 (1989)