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プログラム細胞死の人為的抑制による神経変性疾患の研究

通过人为抑制程序性细胞死亡来研究神经退行性疾病

基本信息

批准号：
11170234
负责人：
三浦正幸
金额：
$ 5.76万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
财政年份：
1999
资助国家：
日本
起止时间：
1999 至 2000
项目状态：
已结题

项目摘要

神経細胞死を人為的に操作することによって、神経変性における細胞死機構の役割を明らかにする研究を展開すべく、以下の実験を行った。細胞死の実行過程に関与する細胞死スイッチ担当遺伝子群を同定するために、ショウジョウバエを用いた『異所発現トラップ法』を導入した。これはショウジョウバエ個体内で未知遺伝子を強制発現させる方法であり、強制発現の結果引き起こされる様々なショウジョウバエの表現型をもとに、機能的に遺伝子をスクリーニングすることが出来る優れた手法である。まず、UAS配列を持つP-elementベクターがショウジョウバエゲノム上の様々な場所に挿入された系統を確立した(UAS異所発現トラップ系統)。その系統と、神経組織特異的にGAL4タンパク質を発現する系統(GAL4系統)を交配すると、GAL4/UASシステムによりUAS配列が挿入されたゲノム近傍の遺伝子が強制発現される。このUAS異所発現トラップ系統は、(1)強制発現された遺伝子の配列決定が容易である、(2)UAS配列の挿入によりその支配下にある遺伝子の変異体系統にもなり得るという特徴も併せ持っていることから、同定された遺伝子の迅速な機能解析が可能である。申請者はこの異所発現トラップ法を用いて、ショウジョウバエ組織に未知遺伝子群を強制発現させることにより、新規の細胞死スイッチ担当遺伝子群の同定を試みている。すでに、効率よく神経細胞死を誘導する遺伝子(endd2と命名)を上記の方法により同定し、過剰発現実験のみならずRNA interferenceを用いた機能欠損実験を進めている。

The research on the mechanism of cell death is carried out in the following ways: The cell death process is related to the cell death process, and the cell death process is related to the cell death process. The method of stress generation of unknown gene in vivo is described in detail below. The UAS is configured to maintain a P-element set up to determine the location of the UAS set up. The GAL4 system is a system that is specific to the nervous system, and the GAL4/UAS system is a system that is specific to the nervous system, and the UAS system is a system that is specific to the nervous system. The UAS heterogenetic-discovery system is: (1) easy to determine the allocation of forced discovery vectors;(2) possible to rapidly analyze the functions of UAS heterogenetic-discovery vectors under the control of UAS allocation vectors. The applicant shall apply the method for the discovery of this variant to the discovery of unknown genetic groups in the tissue, and shall try to determine the identity of the new genetic groups in the cell. In addition, the gene expression system (endd2) can be used to identify the gene expression system and to identify the gene expression system.