Mer受容体に対するリガンドとしての新規プロテインSファミリー蛋白質の同定

鉴定新型蛋白质 S 家族蛋白质作为 Mer 受体的配体

• 批准号: 08680657
• 负责人: 水野 健作
• 金额: $ 1.66万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08680657/
• 关键词: 受容体型チロシンキナーゼ; プロテインS; Gas6; 細胞増殖因子; Mer; Sky; Axl

受容体型チロシンキナーゼは細胞増殖因子・分化因子などの受容体として細胞外シグナルを細胞内に伝達する重要な機能を果たしている。私たちは新規な受容体型チロシンキナーゼSkyを同定し、さらにそのリガンドが抗血液凝固因子プロテインSに類似した蛋白質Gas6であることを明らかにした。本研究ではSky受容体ファミリーに属するMerのリガンドとして新規な増殖因子を同定、クローニングし、その生理活性を解明することを目的として、以下の実験を行った。1、Gas6とプロテインS、および3種の受容体Axl,Sky,Merの結合を、可溶型受容体をもちいた結合実験や受容体発現細胞を用いた受容体の自己リン酸化を指標として調べ、いずれの受容体もGas6を結合するが、プロテインSは結合しないことを見いだした。また、Gas6と受容体の結合の強さをBiacoreを用いて測定し、Axl>Sky>Merの順に親和性が高いことを明らかにした。Gas6とMerの解離定数は約30nMで、おそらくより親和性の高い新規なリガンド分子が存在すると考えられた。2、Gas6とプロテインSの構造に基づいて、low stringency条件下でのcDNAスクリーニングを行ったが、EGFドメインを持つ数種の蛋白質をコードするcDNA以外には新規なプロテインSファミリー分子をクローニングすることはできなかった。そこでGas6分子中の受容体結合ドメインを特定することにした。種々の欠失変異体を作成し、受容体結合能を調べた結果,C末端部の性ホルモン結合グロブリン様ドメインが結合に必要、十分であることを明らかにした。現在、この領域をプローブとして再度スクリーニングを行っているところである。

The capacitive type is different from each other. The cellular factor differentiation factor is different from that of the receptive body. The cellular differentiation factor of the receptive body is different from that of the receptive body. The new capacitive type is similar to the protein, Gas6, Sky, anticoagulant, anticoagulant. In this study, Sky acceptors are classified as Mer receptors, new regulation reproductive factors, physiological activity, physiological activity, objective, and so on. 1. The combination of the three kinds of capacitor Axl,Sky,Mer, the soluble capacitor and the capacitor, the cell is acidified by the capacitor, the capacitor is used to bind the Gas6, and the soluble capacitor is used to combine the capacitor with the capacitor. The combination of Gas6 and Gas6 capacitors can be used to determine the strength of Biacore, Axl>Sky>Mer, and sexual sensitivity. The number of Gas6 Mer dissociations is about 30nM, the number of antigens, and the number of molecules that are highly sensitive to new rules and regulations exist. 2. Under the conditions of cDNA, cDNA, and EGF, under the condition of Gas6, there are several kinds of protein in the system. In addition to the cDNA, there are many new regulations in the system, such as the number of components in the system, the number of components in the system, the number of components in the system. The receptor in the Gas6 molecule combines the receptor with the specific receptor in the molecule. The combination of the capacitor and the capacitor can analyze the results, and the combination of the terminal part of the capacitor and the capacitor can analyze the results. Now, in the field, we are going to do it again. We are going to do it again.