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B型肝炎ウイルスX蛋白の癌化・アポトーシス作用とp53蛋白との関連の解明

B型肝炎ウイルスX蛋白の癌化・アポトーシス作用とp53蛋白との関連の解明
阐明乙型肝炎病毒X蛋白和p53蛋白的致癌/凋亡作用之间的关系
批准号：
08670561
负责人：
小池 和彦
金额：
$1.47万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
1996
资助国家：
日本
项目状态：
已结题
起止时间：
1996 至 --
来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08670561/
关键词：
B型肝炎ウイルスX遺伝子肝癌細胞増殖アポトーシスp53Creリコンビナーゼ

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项目成果

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CreリコンビナーゼによるloxP配列の除去によって、初めてX遺伝子の発現がCAGプロモーターのもとにONとなるプラスミドpCALNLXを作製し、同様にLacZ遺伝子をもつプラスミドpCALNLZとともにそれぞれ肝癌培養細胞HLFおよびHepG2に導入し、細胞株をそれぞれ20株ずつ樹立した。これらの細胞株にCreリコンビナーゼを発現する組み替えアデノウイルスAxCANCreを感染させたところ、loxP配列に鋏まれたstufferDNAが除去され、X遺伝子、LacZ遺伝子ともにCreリコンビナーゼ作用3日目以降にその発現が確認された。アデノウイルス自体には細胞毒性が存在するため、moiを減少させながら、LacZ陽性細胞の割合を検討したところ、moi=0.2で100%の細胞がLacZ陽性となることが確認された。これにより最小限の細胞毒性でX蛋白の発現をONにすることが可能になった。X遺伝子をもつ細胞株にCreリコンビナーゼを作用させたところ、X蛋白は主に核周囲と細胞質に発現していた。蛍光二重染色によって癌抑制遺伝子産物p53蛋白とX蛋白の局在を検討したところ、もともと核に存在しているp53蛋白がX蛋白発現ON後には、その発現が細胞質にシフトすることが確認された。この現象は、X蛋白のもつトランス活性化作用や肝発癌作用と密接に関連していることが示唆された。また、X蛋白を発現させると、肝癌細胞株は4-5日目からアポトーシスを起こし始めることが発見された。現在その詳細を検討中である。
期刊论文(1)
专著(0)
科研奖励(0)
会议论文
K.Moriya,et al.: "In vivo inhibition of hepatitis B virus gene expression by antisenge phosphorothioute oligonucleotides" Biochem Biophys Res Commun.218. 217-223 (1996)
K.Moriya 等人：“反义硫代磷酸寡核苷酸对乙型肝炎病毒基因表达的体内抑制”Biochem Biophys Res Commun.218。
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
C型肝炎ウイルスによる肝発癌機構の解明:細胞内標的の探索と治療法の開発
  • 批准号：
    20012013
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
  • 资助金额：
    $7.55万
  • 财政年份：
    2008
  • 负责人：
    小池 和彦
  • 依托单位：
    The University of Tokyo
C型肝炎ウイルスRNAのマイクロ断片化によるウイルス増殖制御法の開発
  • 批准号：
    18659203
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Exploratory Research
  • 资助金额：
    $2.11万
  • 财政年份：
    2006
  • 负责人：
    小池 和彦
  • 依托单位：
    The University of Tokyo
C型肝炎ウイルスによる肝発癌機構の解明
  • 批准号：
    18012014
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
  • 资助金额：
    $8.0万
  • 财政年份：
    2006
  • 负责人：
    小池 和彦
  • 依托单位：
    The University of Tokyo
HIV感染によるC型慢性肝炎進行促進機序の解明
  • 批准号：
    17659210
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Exploratory Research
  • 资助金额：
    $2.18万
  • 财政年份：
    2005
  • 负责人：
    小池 和彦
  • 依托单位：
    The University of Tokyo
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